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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8ok2 | ||||||
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タイトル | Bipartite interaction of TOPBP1 with the GINS complex | ||||||
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![]() | REPLICATION / Scaffold / Replisome / Recruitment | ||||||
機能・相同性 | ![]() Unwinding of DNA / GINS complex / DNA strand elongation involved in mitotic DNA replication / CMG complex / mitotic DNA replication initiation / double-strand break repair via break-induced replication / inner cell mass cell proliferation / DNA unwinding involved in DNA replication / isomerase activity / nucleoplasm ...Unwinding of DNA / GINS complex / DNA strand elongation involved in mitotic DNA replication / CMG complex / mitotic DNA replication initiation / double-strand break repair via break-induced replication / inner cell mass cell proliferation / DNA unwinding involved in DNA replication / isomerase activity / nucleoplasm / nucleus / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | ||||||
![]() | Day, M. / Oliver, A.W. / Pearl, L.H. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: TopBP1 utilises a bipartite GINS binding mode to support genome replication. 著者: Matthew Day / Bilal Tetik / Milena Parlak / Yasser Almeida-Hernández / Markus Räschle / Farnusch Kaschani / Heike Siegert / Anika Marko / Elsa Sanchez-Garcia / Markus Kaiser / Isabel A ...著者: Matthew Day / Bilal Tetik / Milena Parlak / Yasser Almeida-Hernández / Markus Räschle / Farnusch Kaschani / Heike Siegert / Anika Marko / Elsa Sanchez-Garcia / Markus Kaiser / Isabel A Barker / Laurence H Pearl / Antony W Oliver / Dominik Boos / ![]() ![]() 要旨: Activation of the replicative Mcm2-7 helicase by loading GINS and Cdc45 is crucial for replication origin firing, and as such for faithful genetic inheritance. Our biochemical and structural studies ...Activation of the replicative Mcm2-7 helicase by loading GINS and Cdc45 is crucial for replication origin firing, and as such for faithful genetic inheritance. Our biochemical and structural studies demonstrate that the helicase activator GINS interacts with TopBP1 through two separate binding surfaces, the first involving a stretch of highly conserved amino acids in the TopBP1-GINI region, the second a surface on TopBP1-BRCT4. The two surfaces bind to opposite ends of the A domain of the GINS subunit Psf1. Mutation analysis reveals that either surface is individually able to support TopBP1-GINS interaction, albeit with reduced affinity. Consistently, either surface is sufficient for replication origin firing in Xenopus egg extracts and becomes essential in the absence of the other. The TopBP1-GINS interaction appears sterically incompatible with simultaneous binding of DNA polymerase epsilon (Polε) to GINS when bound to Mcm2-7-Cdc45, although TopBP1-BRCT4 and the Polε subunit PolE2 show only partial competitivity in binding to Psf1. Our TopBP1-GINS model improves the understanding of the recently characterised metazoan pre-loading complex. It further predicts the coordination of three molecular origin firing processes, DNA polymerase epsilon arrival, TopBP1 ejection and GINS integration into Mcm2-7-Cdc45. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 224.8 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 147.8 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 35.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 52.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 16916MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 17772.438 Da / 分子数: 1 / 変異: V97I / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q14691 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 21453.713 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q9Y248 |
#3: タンパク質 | 分子量: 24562.611 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q9BRX5 |
#4: タンパク質 | 分子量: 30831.814 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q9BRT9 |
#5: タンパク質 | 分子量: 52397.535 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: A7E2X7 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: GINS complex bound to TOPBP1 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm |
撮影 | 電子線照射量: 39.69290657 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) |
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解析
ソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 154278 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 78.33 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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