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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8k15 | ||||||
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タイトル | The Streptococcus azizii ORF-less Group IIC intron HYER2 at apo state | ||||||
要素 | RNA (470-MER) | ||||||
キーワード | RNA / ORF-less Group IIC intron / ribozymes | ||||||
機能・相同性 | RNA / RNA (> 10) / RNA (> 100) 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Streptococcus azizii (バクテリア) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.58 Å | ||||||
データ登録者 | Zhu, H.Z. / Liu, J.J.G. | ||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2024 タイトル: Hydrolytic endonucleolytic ribozyme (HYER) is programmable for sequence-specific DNA cleavage. 著者: Zi-Xian Liu / Shouyue Zhang / Han-Zhou Zhu / Zhi-Hang Chen / Yun Yang / Long-Qi Li / Yuan Lei / Yun Liu / Dan-Yuan Li / Ao Sun / Cheng-Ping Li / Shun-Qing Tan / Gao-Li Wang / Jie-Yi Shen / ...著者: Zi-Xian Liu / Shouyue Zhang / Han-Zhou Zhu / Zhi-Hang Chen / Yun Yang / Long-Qi Li / Yuan Lei / Yun Liu / Dan-Yuan Li / Ao Sun / Cheng-Ping Li / Shun-Qing Tan / Gao-Li Wang / Jie-Yi Shen / Shuai Jin / Caixia Gao / Jun-Jie Gogo Liu / 要旨: Ribozymes are catalytic RNAs with diverse functions including self-splicing and polymerization. This work aims to discover natural ribozymes that behave as hydrolytic and sequence-specific DNA ...Ribozymes are catalytic RNAs with diverse functions including self-splicing and polymerization. This work aims to discover natural ribozymes that behave as hydrolytic and sequence-specific DNA endonucleases, which could be repurposed as DNA manipulation tools. Focused on bacterial group II-C introns, we found that many systems without intron-encoded protein propagate multiple copies in their resident genomes. These introns, named HYdrolytic Endonucleolytic Ribozymes (HYERs), cleaved RNA, single-stranded DNA, bubbled double-stranded DNA (dsDNA), and plasmids in vitro. HYER1 generated dsDNA breaks in the mammalian genome. Cryo-electron microscopy analysis revealed a homodimer structure for HYER1, where each monomer contains a Mg-dependent hydrolysis pocket and captures DNA complementary to the target recognition site (TRS). Rational designs including TRS extension, recruiting sequence insertion, and heterodimerization yielded engineered HYERs showing improved specificity and flexibility for DNA manipulation. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8k15.cif.gz | 265.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8k15.ent.gz | 200 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8k15.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8k15_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8k15_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8k15_validation.xml.gz | 22.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8k15_validation.cif.gz | 33.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k1/8k15 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k1/8k15 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 36786MC 8k0pC 8k0qC 8k0rC 8k0sC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: RNA鎖 | 分子量: 201116.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Streptococcus azizii (バクテリア) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) | ||
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#2: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: The Streptococcus azizii ORF-less Group IIC intron HYER2 at apo state タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Streptococcus azizii (バクテリア) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: NONE |
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3次元再構成 | 解像度: 2.58 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 335884 / 対称性のタイプ: POINT |