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万見
- PDB-8fli: Cryo-EM structure of a group II intron immediately before branching -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8fli
タイトルCryo-EM structure of a group II intron immediately before branching
要素
  • Group II Intron
  • Maturase reverse transcriptase
キーワードSPLICING/RNA / group II intron / splicing / branching / maturase / SPLICING-RNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


RNA-directed DNA polymerase activity / endonuclease activity / nucleic acid binding / zinc ion binding
類似検索 - 分子機能
Reverse transcriptase, N-terminal domain / N-terminal domain of reverse transcriptase / Group II intron, maturase-specific / Group II intron reverse transcriptase/maturase / Group II intron, maturase-specific domain / HNH endonuclease / HNH endonuclease / : / HNH nucleases / HNH nuclease ...Reverse transcriptase, N-terminal domain / N-terminal domain of reverse transcriptase / Group II intron, maturase-specific / Group II intron reverse transcriptase/maturase / Group II intron, maturase-specific domain / HNH endonuclease / HNH endonuclease / : / HNH nucleases / HNH nuclease / Reverse transcriptase domain / Reverse transcriptase (RNA-dependent DNA polymerase) / Reverse transcriptase (RT) catalytic domain profile. / Reverse transcriptase/Diguanylate cyclase domain / DNA/RNA polymerase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
RNA / RNA (> 10) / RNA (> 100) / Maturase reverse transcriptase
類似検索 - 構成要素
生物種Thermosynechococcus vestitus (バクテリア)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å
データ登録者Haack, D.B. / Rudolfs, B.G. / Zhang, C. / Lyumkis, D. / Toor, N.
資金援助 米国, 2件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS) 米国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID) 米国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2024
タイトル: Structural basis of branching during RNA splicing.
著者: Daniel B Haack / Boris Rudolfs / Cheng Zhang / Dmitry Lyumkis / Navtej Toor /
要旨: Branching is a critical step in RNA splicing that is essential for 5' splice site selection. Recent spliceosome structures have led to competing models for the recognition of the invariant adenosine ...Branching is a critical step in RNA splicing that is essential for 5' splice site selection. Recent spliceosome structures have led to competing models for the recognition of the invariant adenosine at the branch point. However, there are no structures of any splicing complex with the adenosine nucleophile docked in the active site and positioned to attack the 5' splice site. Thus we lack a mechanistic understanding of adenosine selection and splice site recognition during RNA splicing. Here we present a cryo-electron microscopy structure of a group II intron that reveals that active site dynamics are coupled to the formation of a base triple within the branch-site helix that positions the 2'-OH of the adenosine for nucleophilic attack on the 5' scissile phosphate. This structure, complemented with biochemistry and comparative analyses to splicing complexes, supports a base triple model of adenosine recognition for branching within group II introns and the evolutionarily related spliceosome.
履歴
登録2022年12月21日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02023年12月13日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12023年12月20日Group: Database references / カテゴリ: citation / Item: _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title
改定 1.22024年2月7日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.year

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Group II Intron
B: Maturase reverse transcriptase
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)354,3965
ポリマ－354,3232
非ポリマー733
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: RNA鎖 Group II Intron


分子量: 289257.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Thermosynechococcus vestitus (バクテリア)
発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
#2: タンパク質 Maturase reverse transcriptase


分子量: 65065.121 Da / 分子数: 1 / Mutation: G275D / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Thermosynechococcus vestitus (バクテリア)
遺伝子: tll0114 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8DMK2
#3: 化合物 ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Group IIB intron in complex with its maturase protein
タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Thermosynechococcus vestitus (バクテリア)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TALOS ARCTICA
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: OTHER
電子レンズモード: OTHER / 最大 デフォーカス（公称値）: 2500 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1000 nm
撮影電子線照射量: 31.6 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)

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解析

ソフトウェア
名称バージョン分類
phenix.real_space_refine1.20.1_4487精密化
PHENIX1.20.1_4487精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 38881 / 対称性のタイプ: POINT
精密化交差検証法: NONE

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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