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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8dgi | ||||||||||||
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| タイトル | Structural Basis of MicroRNA Biogenesis by Dicer-1 and Its Partner Protein Loqs-PB - complex Ia | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | RNA BINDING PROTEIN/RNA / Dicer / Dcr-1 / Loquacious / Loqs-PB / miRNA / RNA BINDING PROTEIN-RNA complex | ||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報mitotic cell cycle, embryonic / germarium-derived female germ-line cyst formation / germarium-derived oocyte fate determination / germ-line stem cell division / pole cell formation / MicroRNA (miRNA) biogenesis / segment polarity determination / Small interfering RNA (siRNA) biogenesis / PKR-mediated signaling / female germ-line stem cell asymmetric division ...mitotic cell cycle, embryonic / germarium-derived female germ-line cyst formation / germarium-derived oocyte fate determination / germ-line stem cell division / pole cell formation / MicroRNA (miRNA) biogenesis / segment polarity determination / Small interfering RNA (siRNA) biogenesis / PKR-mediated signaling / female germ-line stem cell asymmetric division / regulation of regulatory ncRNA processing / dosage compensation by hyperactivation of X chromosome / RISC complex binding / pre-miRNA binding / apoptotic DNA fragmentation / germ-line stem cell population maintenance / ribonuclease III / deoxyribonuclease I activity / RISC-loading complex / miRNA metabolic process / RISC complex assembly / regulatory ncRNA-mediated post-transcriptional gene silencing / miRNA processing / ribonuclease III activity / pre-miRNA processing / siRNA processing / siRNA binding / RISC complex / response to starvation / dendrite morphogenesis / RNA endonuclease activity / central nervous system development / helicase activity / double-stranded RNA binding / single-stranded RNA binding / RNA binding / ATP binding / metal ion binding / nucleus / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
| 生物種 | ![]() | ||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.94 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Jouravleva, K. / Golovenko, D. / Demo, G. / Dutcher, R.C. / Tanaka Hall, T.M. / Zamore, P.D. / Korostelev, A.A. | ||||||||||||
| 資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2022タイトル: Structural basis of microRNA biogenesis by Dicer-1 and its partner protein Loqs-PB. 著者: Karina Jouravleva / Dmitrij Golovenko / Gabriel Demo / Robert C Dutcher / Traci M Tanaka Hall / Phillip D Zamore / Andrei A Korostelev / ![]() 要旨: In animals and plants, Dicer enzymes collaborate with double-stranded RNA-binding domain (dsRBD) proteins to convert precursor-microRNAs (pre-miRNAs) into miRNA duplexes. We report six cryo-EM ...In animals and plants, Dicer enzymes collaborate with double-stranded RNA-binding domain (dsRBD) proteins to convert precursor-microRNAs (pre-miRNAs) into miRNA duplexes. We report six cryo-EM structures of Drosophila Dicer-1 that show how Dicer-1 and its partner Loqs‑PB cooperate (1) before binding pre-miRNA, (2) after binding and in a catalytically competent state, (3) after nicking one arm of the pre-miRNA, and (4) following complete dicing and initial product release. Our reconstructions suggest that pre-miRNA binds a rare, open conformation of the Dicer‑1⋅Loqs‑PB heterodimer. The Dicer-1 dsRBD and three Loqs‑PB dsRBDs form a tight belt around the pre-miRNA, distorting the RNA helix to place the scissile phosphodiester bonds in the RNase III active sites. Pre-miRNA cleavage shifts the dsRBDs and partially closes Dicer-1, which may promote product release. Our data suggest a model for how the Dicer‑1⋅Loqs‑PB complex affects a complete cycle of pre-miRNA recognition, stepwise endonuclease cleavage, and product release. | ||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8dgi.cif.gz | 388.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8dgi.ent.gz | 252.9 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8dgi.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 8dgi_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 8dgi_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 8dgi_validation.xml.gz | 58.6 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 8dgi_validation.cif.gz | 86.1 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/dg/8dgi ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/dg/8dgi | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 27423MC ![]() 8dfvC ![]() 8dg5C ![]() 8dg7C ![]() 8dgaC ![]() 8dgjC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 255733.797 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: Dcr-1, CG4792 / 発現宿主: unidentified baculovirus (ウイルス)参照: UniProt: Q9VCU9, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ |
|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 50149.867 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: CG6866 / 発現宿主: unidentified baculovirus (ウイルス) / 参照: UniProt: Q9VJY9 |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: 2D ARRAY / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Complex of Dicer-1 and Loqs-PB / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: MULTIPLE SOURCES |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: NO |
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 由来(組換発現) | 生物種: unidentified baculovirus (ウイルス) |
| 緩衝液 | pH: 7.9 |
| 緩衝液成分 | 濃度: 20 mM / 名称: HEPES-KOH / 式: HEPES-KOH |
| 試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 試料支持 | グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-1.2/1.3 |
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TALOS ARCTICA |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 57471 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 48.06 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
| ソフトウェア |
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| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1478681 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 3.94 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 112398 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 119.8 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
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ムービー
コントローラー
万見について






米国, 3件
引用











PDBj


unidentified baculovirus (ウイルス)
FIELD EMISSION GUN