+
データを開く
-
基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8d9g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | gRAMP-TPR-CHAT Non match PFS target RNA(Craspase) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 |
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
キーワード | RNA BINDING PROTEIN/RNA / CRISPR / GRAMP / RNA BINDING PROTEIN / Craspase / RNA BINDING PROTEIN-RNA complex | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.57 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Hu, C. / Nam, K.H. / Schuler, G. / Ke, A. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | 米国, 1件
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2022タイトル: Craspase is a CRISPR RNA-guided, RNA-activated protease. 著者: Chunyi Hu / Sam P B van Beljouw / Ki Hyun Nam / Gabriel Schuler / Fran Ding / Yanru Cui / Alicia Rodríguez-Molina / Anna C Haagsma / Menno Valk / Martin Pabst / Stan J J Brouns / Ailong Ke / ![]() 要旨: The CRISPR-Cas type III-E RNA-targeting effector complex gRAMP/Cas7-11 is associated with a caspase-like protein (TPR-CHAT/Csx29) to form Craspase (CRISPR-guided caspase). Here, we use cryo-electron ...The CRISPR-Cas type III-E RNA-targeting effector complex gRAMP/Cas7-11 is associated with a caspase-like protein (TPR-CHAT/Csx29) to form Craspase (CRISPR-guided caspase). Here, we use cryo-electron microscopy snapshots of Craspase to explain its target RNA cleavage and protease activation mechanisms. Target-guide pairing extending into the 5' region of the guide RNA displaces a gating loop in gRAMP, which triggers an extensive conformational relay that allosterically aligns the protease catalytic dyad and opens an amino acid side-chain-binding pocket. We further define Csx30 as the endogenous protein substrate that is site-specifically proteolyzed by RNA-activated Craspase. This protease activity is switched off by target RNA cleavage by gRAMP and is not activated by RNA targets containing a matching protospacer flanking sequence. We thus conclude that Craspase is a target RNA-activated protease with self-regulatory capacity. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 履歴 |
|
-
構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
|---|
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8d9g.cif.gz | 395.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8d9g.ent.gz | 308.7 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8d9g.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 8d9g_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 8d9g_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 8d9g_validation.xml.gz | 62 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 8d9g_validation.cif.gz | 94.7 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/d9/8d9g ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/d9/8d9g | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 27261MC ![]() 8d8nC ![]() 8d97C ![]() 8d9eC ![]() 8d9fC ![]() 8d9hC ![]() 8d9iC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
-
リンク
-
集合体
| 登録構造単位 | ![]()
|
|---|---|
| 1 |
|
-
要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 78403.711 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Candidatus Scalindua brodae (バクテリア)遺伝子: SCABRO_02601 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: A0A0B0EKL4 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 147151.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Candidatus Scalindua brodae (バクテリア)遺伝子: SCABRO_02597 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: A0A0B0EGF3 | ||||
| #3: RNA鎖 | 分子量: 11423.787 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Candidatus Scalindua brodae (バクテリア)発現宿主: ![]() | ||||
| #4: RNA鎖 | 分子量: 7466.521 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Candidatus Scalindua brodae (バクテリア)発現宿主: ![]() | ||||
| #5: 化合物 | ChemComp-ZN / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | Has protein modification | N | |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
| 構成要素 | 名称: gRAMP-TPR-CHAT with Non match PFS target RNA Craspase タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#4 / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Candidatus Scalindua brodae (バクテリア) |
| 由来(組換発現) | 生物種: ![]() |
| 緩衝液 | pH: 7.5 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-
電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-
解析
| ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.17.1_3660: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| EMソフトウェア | 名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
| CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.57 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 340526 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
|
ムービー
コントローラー
万見について




Candidatus Scalindua brodae (バクテリア)
米国, 1件
引用














PDBj
































FIELD EMISSION GUN