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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8by2 | |||||||||
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| タイトル | Structure of the K+/H+ exchanger KefC with GSH. | |||||||||
要素 | Glutathione-regulated potassium-efflux system protein KefC | |||||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN / potassium proton exchanger / KefC / Transporter / CPA / GSH | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報glutathione-regulated potassium exporter activity / response to methylglyoxal / potassium:proton antiporter complex / intracellular pH elevation / regulation of pH / toxic substance binding / proton transmembrane transport / regulation of intracellular pH / response to hydrogen peroxide / potassium ion transport ...glutathione-regulated potassium exporter activity / response to methylglyoxal / potassium:proton antiporter complex / intracellular pH elevation / regulation of pH / toxic substance binding / proton transmembrane transport / regulation of intracellular pH / response to hydrogen peroxide / potassium ion transport / response to toxic substance / nucleotide binding / enzyme binding / protein homodimerization activity / membrane / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() | |||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.18 Å | |||||||||
データ登録者 | Gulati, A. / Drew, D. | |||||||||
| 資金援助 | European Union, スウェーデン, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024タイトル: Structure and mechanism of the K/H exchanger KefC. 著者: Ashutosh Gulati / Surabhi Kokane / Annemarie Perez-Boerema / Claudia Alleva / Pascal F Meier / Rei Matsuoka / David Drew / ![]() 要旨: Intracellular potassium (K) homeostasis is fundamental to cell viability. In addition to channels, K levels are maintained by various ion transporters. One major family is the proton-driven K efflux ...Intracellular potassium (K) homeostasis is fundamental to cell viability. In addition to channels, K levels are maintained by various ion transporters. One major family is the proton-driven K efflux transporters, which in gram-negative bacteria is important for detoxification and in plants is critical for efficient photosynthesis and growth. Despite their importance, the structure and molecular basis for K-selectivity is poorly understood. Here, we report ~3.1 Å resolution cryo-EM structures of the Escherichia coli glutathione (GSH)-gated K efflux transporter KefC in complex with AMP, AMP/GSH and an ion-binding variant. KefC forms a homodimer similar to the inward-facing conformation of Na/H antiporter NapA. By structural assignment of a coordinated K ion, MD simulations, and SSM-based electrophysiology, we demonstrate how ion-binding in KefC is adapted for binding a dehydrated K ion. KefC harbors C-terminal regulator of K conductance (RCK) domains, as present in some bacterial K-ion channels. The domain-swapped helices in the RCK domains bind AMP and GSH and they inhibit transport by directly interacting with the ion-transporter module. Taken together, we propose that KefC is activated by detachment of the RCK domains and that ion selectivity exploits the biophysical properties likewise adapted by K-ion-channels. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8by2.cif.gz | 520.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8by2.ent.gz | 346 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8by2.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 8by2_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 8by2_full_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 8by2_validation.xml.gz | 46.2 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 8by2_validation.cif.gz | 66.9 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/by/8by2 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/by/8by2 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 16319MC ![]() 8bxgC ![]() 9embC C: 同じ文献を引用 ( M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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|---|---|
| 1 |
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 61183.223 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #2: 化合物 | #3: 化合物 | #4: 化合物 | #5: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | Has protein modification | N | |
|---|
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Kefc protein dimer with GSH / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: NO |
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 由来(組換発現) | 生物種: ![]() |
| 緩衝液 | pH: 7.5 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
| 撮影 | 電子線照射量: 64.3 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
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| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 3.18 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 260115 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 82.62 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
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ムービー
コントローラー
万見について






スウェーデン, 2件
引用




PDBj








gel filtration




