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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8bws | |||||||||||||||||||||
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タイトル | Structure of yeast RNA Polymerase III elongation complex at 3.3 A | |||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / targeted DNA integration / Ty1 retrotransposon / Ty1 integrase / RNA 19 polymerase III | |||||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening ...RNA Polymerase I Transcription Initiation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA-templated transcription / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / termination of RNA polymerase III transcription / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / RNA polymerase III activity / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / termination of RNA polymerase I transcription / RNA Polymerase I Promoter Escape / nucleolar large rRNA transcription by RNA polymerase I / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription by RNA polymerase I / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / Estrogen-dependent gene expression / transcription by RNA polymerase III / Dual incision in TC-NER / transcription elongation by RNA polymerase I / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / RNA polymerase II, core complex / nucleotidyltransferase activity / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / transcription elongation by RNA polymerase II / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / peroxisome / ribosome biogenesis / single-stranded DNA binding / transcription by RNA polymerase II / nucleic acid binding / protein dimerization activity / nucleotide binding / nucleolus / mitochondrion / DNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) | |||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||||||||||||||
データ登録者 | Nguyen, P.Q. / Fernandez-Tornero, C. | |||||||||||||||||||||
資金援助 | European Union, フランス, スペイン, 6件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Structural basis of Ty1 integrase tethering to RNA polymerase III for targeted retrotransposon integration. 著者: Phong Quoc Nguyen / Sonia Huecas / Amna Asif-Laidin / Adrián Plaza-Pegueroles / Beatrice Capuzzi / Noé Palmic / Christine Conesa / Joël Acker / Juan Reguera / Pascale Lesage / Carlos Fernández-Tornero / 要旨: The yeast Ty1 retrotransposon integrates upstream of genes transcribed by RNA polymerase III (Pol III). Specificity of integration is mediated by an interaction between the Ty1 integrase (IN1) and ...The yeast Ty1 retrotransposon integrates upstream of genes transcribed by RNA polymerase III (Pol III). Specificity of integration is mediated by an interaction between the Ty1 integrase (IN1) and Pol III, currently uncharacterized at the atomic level. We report cryo-EM structures of Pol III in complex with IN1, revealing a 16-residue segment at the IN1 C-terminus that contacts Pol III subunits AC40 and AC19, an interaction that we validate by in vivo mutational analysis. Binding to IN1 associates with allosteric changes in Pol III that may affect its transcriptional activity. The C-terminal domain of subunit C11, involved in RNA cleavage, inserts into the Pol III funnel pore, providing evidence for a two-metal mechanism during RNA cleavage. Additionally, ordering next to C11 of an N-terminal portion from subunit C53 may explain the connection between these subunits during termination and reinitiation. Deletion of the C53 N-terminal region leads to reduced chromatin association of Pol III and IN1, and a major fall in Ty1 integration events. Our data support a model in which IN1 binding induces a Pol III configuration that may favor its retention on chromatin, thereby improving the likelihood of Ty1 integration. | |||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8bws.cif.gz | 944 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8bws.ent.gz | 746.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8bws.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8bws_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8bws_full_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8bws_validation.xml.gz | 141.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8bws_validation.cif.gz | 215.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bw/8bws ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bw/8bws | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 16299MC 7z0hC 7z2zC 7z30C 7z31C C: 同じ文献を引用 (文献) M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-directed RNA polymerase III subunit ... , 10種, 10分子 ABDGIMNOPQ
#1: タンパク質 | 分子量: 162517.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPO31, RPC1, RPC160, YOR116C, O3254, YOR3254C / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P04051, DNA-directed RNA polymerase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 129629.383 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RET1, RPC128, RPC2, YOR207C / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P22276, DNA-directed RNA polymerase |
#4: タンパク質 | 分子量: 18623.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC17, YJL011C, J1349 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P47076 |
#7: タンパク質 | 分子量: 24349.770 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC25, YKL144C, UNF1, YKL1 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P35718 |
#9: タンパク質 | 分子量: 12525.109 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC11, YDR045C, YD9609.01C / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: Q04307 |
#13: タンパク質 | 分子量: 32178.115 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC37, YKR025W / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P36121 |
#14: タンパク質 | 分子量: 46751.469 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC53, RPC4, YDL150W, D1557 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P25441 |
#15: タンパク質 | 分子量: 74112.820 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC82, RPC3, YPR190C, P9677.11 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P32349 |
#16: タンパク質 | 分子量: 36174.160 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC34, YNR003C, N2031 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P32910 |
#17: タンパク質 | 分子量: 27752.971 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 遺伝子: RPC31, ACP2, RPC8, YNL151C, N1769 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P17890 |
-DNA-directed RNA polymerases I and III subunit ... , 2種, 2分子 CK
#3: タンパク質 | 分子量: 37732.613 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC40, RPC5, YPR110C, P8283.18 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P07703 |
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#11: タンパク質 | 分子量: 16167.860 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPC19, YNL113W, N1937 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P28000 |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 5種, 5分子 EFHJL
#5: タンパク質 | 分子量: 25117.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P20434 |
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#6: タンパク質 | 分子量: 17931.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P20435 |
#8: タンパク質 | 分子量: 16525.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 遺伝子: RPB8 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P20436 |
#10: タンパク質 | 分子量: 8290.732 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P22139 |
#12: タンパク質 | 分子量: 8240.599 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 遺伝子: RPC10, RPB12, YHR143W-A, YHR143BW / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / 参照: UniProt: P40422 |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 ST
#18: DNA鎖 | 分子量: 16039.287 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) |
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#19: DNA鎖 | 分子量: 15816.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 R
#20: RNA鎖 | 分子量: 3264.036 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) |
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-非ポリマー , 3種, 10分子
#21: 化合物 | ChemComp-ZN / #22: 化合物 | ChemComp-MG / | #23: 化合物 | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Structure of yeast RNA Polymerase III elongation complex at 3.3 A タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#8, #10-#20 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) |
由来(組換発現) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 濃度: 0.7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
顕微鏡 | モデル: TFS TALOS |
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電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2600 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm |
撮影 | 電子線照射量: 30.96 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 粒子像の数: 101928 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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