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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8bsh | ||||||
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| タイトル | COPII inner coat | ||||||
要素 |
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キーワード | PROTEIN TRANSPORT / COPII | ||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報Antigen Presentation: Folding, assembly and peptide loading of class I MHC / Cargo concentration in the ER / regulation of COPII vesicle coating / positive regulation of ER to Golgi vesicle-mediated transport / nuclear envelope organization / COPII-coated vesicle budding / COPII-mediated vesicle transport / mitochondria-associated endoplasmic reticulum membrane contact site / positive regulation of protein exit from endoplasmic reticulum / vesicle organization ...Antigen Presentation: Folding, assembly and peptide loading of class I MHC / Cargo concentration in the ER / regulation of COPII vesicle coating / positive regulation of ER to Golgi vesicle-mediated transport / nuclear envelope organization / COPII-coated vesicle budding / COPII-mediated vesicle transport / mitochondria-associated endoplasmic reticulum membrane contact site / positive regulation of protein exit from endoplasmic reticulum / vesicle organization / COPII vesicle coat / membrane organization / mitochondrial fission / mitochondrial membrane organization / endoplasmic reticulum exit site / endoplasmic reticulum to Golgi vesicle-mediated transport / intracellular protein transport / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / Golgi membrane / GTPase activity / endoplasmic reticulum membrane / GTP binding / endoplasmic reticulum / Golgi apparatus / mitochondrion / zinc ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
| 生物種 | ![]() | ||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | ||||||
データ登録者 | Zanetti, G. / Pyle, E.W. | ||||||
| 資金援助 | European Union, 1件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2022タイトル: A Bayesian approach to single-particle electron cryo-tomography in RELION-4.0. 著者: Jasenko Zivanov / Joaquín Otón / Zunlong Ke / Andriko von Kügelgen / Euan Pyle / Kun Qu / Dustin Morado / Daniel Castaño-Díez / Giulia Zanetti / Tanmay A M Bharat / John A G Briggs / Sjors H W Scheres / ![]() 要旨: We present a new approach for macromolecular structure determination from multiple particles in electron cryo-tomography (cryo-ET) data sets. Whereas existing subtomogram averaging approaches are ...We present a new approach for macromolecular structure determination from multiple particles in electron cryo-tomography (cryo-ET) data sets. Whereas existing subtomogram averaging approaches are based on 3D data models, we propose to optimise a regularised likelihood target that approximates a function of the 2D experimental images. In addition, analogous to Bayesian polishing and contrast transfer function (CTF) refinement in single-particle analysis, we describe the approaches that exploit the increased signal-to-noise ratio in the averaged structure to optimise tilt-series alignments, beam-induced motions of the particles throughout the tilt-series acquisition, defoci of the individual particles, as well as higher-order optical aberrations of the microscope. Implementation of our approaches in the open-source software package RELION aims to facilitate their general use, particularly for those researchers who are already familiar with its single-particle analysis tools. We illustrate for three applications that our approaches allow structure determination from cryo-ET data to resolutions sufficient for de novo atomic modelling. | ||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8bsh.cif.gz | 315.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8bsh.ent.gz | 250.1 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8bsh.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 8bsh_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 8bsh_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 8bsh_validation.xml.gz | 62.1 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 8bsh_validation.cif.gz | 91 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bs/8bsh ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bs/8bsh | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 15949MC ![]() 8bqeC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 85463.242 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: SEC23 / 発現宿主: Spodoptera (蝶・蛾) / 参照: UniProt: A0A7I9GU03 |
|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 103733.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: SEC24 / 発現宿主: Spodoptera (蝶・蛾) / 参照: UniProt: A0A7I9BTX5 |
| #3: タンパク質 | 分子量: 21472.564 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: P20606, 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 |
| #4: 化合物 | ChemComp-MG / |
| #5: 化合物 | ChemComp-GNP / |
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: HELICAL ARRAY / 3次元再構成法: サブトモグラム平均法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Ternary complex of Sec23, Sec24 and Sar1, COPII inner coat タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 分子量 | 値: 230 kDa/nm / 実験値: NO |
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 由来(組換発現) | 生物種: Spodoptera (蝶・蛾) |
| 緩衝液 | pH: 6.8 |
| 試料 | 濃度: 0.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: purified protein and GMPPNP inclubated with GUVs to reconstiture membrane budding |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 4500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 2.9 e/Å2 / Avg electron dose per subtomogram: 120 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) |
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解析
| ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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| EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 4 / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||||||||||||||
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 106533 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
| EM volume selection | Num. of tomograms: 137 / Num. of volumes extracted: 106533 | ||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 120.73 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
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ムービー
コントローラー
万見について






引用






PDBj








Spodoptera (蝶・蛾)



FIELD EMISSION GUN