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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8afg | ||||||||||||
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タイトル | K352D oxalyl-CoA synthetase Pcs60p | ||||||||||||
要素 | Oxalate--CoA ligase | ||||||||||||
キーワード | LIGASE / Peroxisome / Oxalyl-CoA ligase / Oligomer / Yeast | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 oxalate-CoA ligase / oxalate-CoA ligase activity / medium-chain fatty acid-CoA ligase activity / oxalate catabolic process / peroxisomal membrane / peroxisomal matrix / fatty acid metabolic process / mRNA binding / ATP binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | ||||||||||||
手法 | X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 2.45 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Burgi, J. / Chojnowski, G. / Wilmanns, M. | ||||||||||||
資金援助 | ドイツ, 3件
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引用 | ジャーナル: Biol Chem / 年: 2023 タイトル: Asymmetric horseshoe-like assembly of peroxisomal yeast oxalyl-CoA synthetase. 著者: Jérôme Bürgi / Pascal Lill / Evdokia-Anastasia Giannopoulou / Cy M Jeffries / Grzegorz Chojnowski / Stefan Raunser / Christos Gatsogiannis / Matthias Wilmanns / 要旨: Oxalyl-CoA synthetase from is one of the most abundant peroxisomal proteins in yeast and hence has become a model to study peroxisomal translocation. It contains a C-terminal Peroxisome Targeting ...Oxalyl-CoA synthetase from is one of the most abundant peroxisomal proteins in yeast and hence has become a model to study peroxisomal translocation. It contains a C-terminal Peroxisome Targeting Signal 1, which however is partly dispensable, suggesting additional receptor bindings sites. To unravel any additional features that may contribute to its capacity to be recognized as peroxisomal target, we determined its assembly and overall architecture by an integrated structural biology approach, including X-ray crystallography, single particle cryo-electron microscopy and small angle X-ray scattering. Surprisingly, it assembles into mixture of concentration-dependent dimers, tetramers and hexamers by dimer self-association. Hexameric particles form an unprecedented asymmetric horseshoe-like arrangement, which considerably differs from symmetric hexameric assembly found in many other protein structures. A single mutation within the self-association interface is sufficient to abolish any higher-level oligomerization, resulting in a homogenous dimeric assembly. The small C-terminal domain of yeast Oxalyl-CoA synthetase is connected by a partly flexible hinge with the large N-terminal domain, which provides the sole basis for oligomeric assembly. Our data provide a basis to mechanistically study peroxisomal translocation of this target. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8afg.cif.gz | 337 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8afg.ent.gz | 265 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8afg.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8afg_validation.pdf.gz | 454.8 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8afg_full_validation.pdf.gz | 464 KB | 表示 | |
XML形式データ | 8afg_validation.xml.gz | 33.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8afg_validation.cif.gz | 46.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/af/8afg ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/af/8afg | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8affC 8atdC C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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単位格子 |
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非結晶学的対称性 (NCS) | NCSドメイン:
NCSドメイン領域: Ens-ID: 1 / Beg auth comp-ID: ALA / Beg label comp-ID: ALA / End auth comp-ID: ILE / End label comp-ID: ILE / Auth seq-ID: 9 - 437 / Label seq-ID: 9 - 437
NCSアンサンブル: (詳細: Local NCS retraints between domains: 1 2) |
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 60562.410 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: PCS60, AAE3, FAT2, YBR222C, YBR1512 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P38137, oxalate-CoA ligase #2: 化合物 | ChemComp-SO4 / #3: 水 | ChemComp-HOH / | 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1 |
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-試料調製
結晶 | マシュー密度: 2.49 Å3/Da / 溶媒含有率: 50.57 % |
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結晶化 | 温度: 298 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 6 詳細: Ammonium sulfate 0.15M, MES 0.1M pH6, PEG 4000 15%(w/v) PH範囲: 6 |
-データ収集
回折 | 平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N |
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放射光源 | 由来: シンクロトロン / サイト: PETRA III, EMBL c/o DESY / ビームライン: P13 (MX1) / 波長: 0.987 Å |
検出器 | タイプ: DECTRIS PILATUS3 6M / 検出器: PIXEL / 日付: 2020年6月5日 |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 波長: 0.987 Å / 相対比: 1 |
反射 | 解像度: 2.45→47.092 Å / Num. obs: 43458 / % possible obs: 99.9 % / 冗長度: 4 % / CC1/2: 0.991 / Net I/σ(I): 5.1 |
反射 シェル | 解像度: 2.45→2.54 Å / 冗長度: 4.1 % / Mean I/σ(I) obs: 1.1 / Num. unique obs: 4561 / CC1/2: 0.514 / % possible all: 99.9 |
-解析
ソフトウェア |
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精密化 | 構造決定の手法: 分子置換 開始モデル: AlphaFold model 解像度: 2.45→47.092 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.944 / Cor.coef. Fo:Fc free: 0.912 / WRfactor Rfree: 0.234 / WRfactor Rwork: 0.189 / SU B: 24.215 / SU ML: 0.246 / Average fsc free: 0.862 / Average fsc work: 0.8733 / 交差検証法: FREE R-VALUE / ESU R: 0.407 / ESU R Free: 0.261 / 詳細: Hydrogens have not been used
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溶媒の処理 | イオンプローブ半径: 0.8 Å / 減衰半径: 0.8 Å / VDWプローブ半径: 1.2 Å / 溶媒モデル: MASK BULK SOLVENT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 45.66 Å2
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精密化ステップ | サイクル: LAST / 解像度: 2.45→47.092 Å
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拘束条件 |
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Refine LS restraints NCS |
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LS精密化 シェル |
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精密化 TLS | 手法: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION
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精密化 TLSグループ |
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