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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7zzq | |||||||||
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タイトル | BcsH-BcsD 'beads-on-a-string' filament, local refine | |||||||||
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![]() | STRUCTURAL PROTEIN / Bacterial cytoskeleton / cellulose secretion | |||||||||
機能・相同性 | Cellulose-complementing protein / Cellulose-complementing protein A / Cellulose synthase operon protein D, bacterial / Cellulose synthase subunit D superfamily / Cellulose synthase subunit D / cellulose biosynthetic process / Cellulose-complementing protein / Cellulose biosynthesis protein![]() | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.6 Å | |||||||||
![]() | Krasteva, P.V. / Abidi, W. / Decossas, M. | |||||||||
資金援助 | European Union, ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Bacterial crystalline cellulose secretion via a supramolecular BcsHD scaffold. 著者: Wiem Abidi / Marion Decossas / Lucía Torres-Sánchez / Lucie Puygrenier / Sylvie Létoffé / Jean-Marc Ghigo / Petya V Krasteva / ![]() 要旨: Cellulose, the most abundant biopolymer on Earth, is not only the predominant constituent of plants but also a key extracellular polysaccharide in the biofilms of many bacterial species. Depending on ...Cellulose, the most abundant biopolymer on Earth, is not only the predominant constituent of plants but also a key extracellular polysaccharide in the biofilms of many bacterial species. Depending on the producers, chemical modifications, and three-dimensional assemblies, bacterial cellulose (BC) can present diverse degrees of crystallinity. Highly ordered, or crystalline, cellulose presents great economical relevance due to its ever-growing number of biotechnological applications. Even if some acetic acid bacteria have long been identified as BC superproducers, the molecular mechanisms determining the secretion of crystalline versus amorphous cellulose remain largely unknown. Here, we present structural and mechanistic insights into the role of the accessory subunits BcsH (CcpAx) and BcsD (CesD) that determine crystalline BC secretion in the lineage. We show that oligomeric BcsH drives the assembly of BcsD into a supramolecular cytoskeletal scaffold that likely stabilizes the cellulose-extruding synthase nanoarrays through an unexpected inside-out mechanism for secretion system assembly. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 488.8 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 396.9 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 78.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 119.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 17532.963 Da / 分子数: 18 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: BcsD from Gluconacetobacter hansenii ATCC 23769 expressed recombinantly in BL21 Star DE3 cells 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: acsD, GXY_04292 / プラスミド: pRSFDuet1-BcsD / 発現宿主: ![]() ![]() #2: タンパク質 | 分子量: 9919.921 Da / 分子数: 12 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: BcsH C-terminal domain from G. hansenii expressed from a pProEx-Htb vector with a HRV3c-cleavable hexahistidine tag 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: GXY_04267 / プラスミド: pProEx-Htb / 詳細 (発現宿主): pProEx-BcsH / 発現宿主: ![]() ![]() #3: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: BcsHD 'beads-on-a-string' cis-filaments / タイプ: COMPLEX 詳細: G. hansenii BcsHD complex purified after the co-expression of hexahistidine tagged BcsH C-terminal domain and full-length BcsD. IMAC purification via BcsH, tag and linker removed during purification Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() 株: ATCC 23769 |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 20 mM NaCl, 100 mM NaCL |
試料 | 濃度: 0.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: Filaments of various sizes eluting in the void volume of a Superdex 200 Increase size-exclusion column. |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 293 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2750 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 480 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 49.9 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS |
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解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 2849271 詳細: Autopicked particles using cryoSPARC's template picker function. The templates were generated by 2D classification and class selection on ~3000 manually particles. | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 1425195 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: BACKBONE TRACE / 空間: REAL 詳細: Model building with Coot, refinement with Phenix and Namdinator | ||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 3A8E PDB chain-ID: A / Accession code: 3A8E / Source name: PDB / タイプ: experimental model |