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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7x22 | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of non gastric H,K-ATPase alpha2 K794S in (2K+)E2-AlF state | ||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / P-type ATPase / transporter / proton pump / kidney / colon / airway | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Basigin interactions / H+/K+-exchanging ATPase / Ion transport by P-type ATPases / Na+/K+-exchanging ATPase / P-type potassium:proton transporter activity / positive regulation of sodium ion export across plasma membrane / positive regulation of potassium ion import across plasma membrane / metal ion transport / P-type sodium:potassium-exchanging transporter activity / sodium:potassium-exchanging ATPase complex ...Basigin interactions / H+/K+-exchanging ATPase / Ion transport by P-type ATPases / Na+/K+-exchanging ATPase / P-type potassium:proton transporter activity / positive regulation of sodium ion export across plasma membrane / positive regulation of potassium ion import across plasma membrane / metal ion transport / P-type sodium:potassium-exchanging transporter activity / sodium:potassium-exchanging ATPase complex / membrane repolarization / regulation of pH / sodium ion export across plasma membrane / intracellular potassium ion homeostasis / regulation of calcium ion transmembrane transport / potassium ion homeostasis / intracellular sodium ion homeostasis / regulation of cardiac muscle contraction by calcium ion signaling / response to metal ion / relaxation of cardiac muscle / Ion homeostasis / sodium ion transport / organelle membrane / potassium ion import across plasma membrane / monoatomic cation transmembrane transport / ATPase activator activity / blastocyst development / intercalated disc / lateral plasma membrane / sperm flagellum / sodium ion transmembrane transport / ATP metabolic process / cardiac muscle contraction / T-tubule / proton transmembrane transport / protein localization to plasma membrane / potassium ion transport / caveola / response to organic cyclic compound / sarcolemma / intracellular calcium ion homeostasis / protein-macromolecule adaptor activity / ATPase binding / regulation of gene expression / basolateral plasma membrane / response to hypoxia / protein stabilization / cell adhesion / protein heterodimerization activity / apical plasma membrane / innate immune response / protein kinase binding / ATP hydrolysis activity / ATP binding / membrane / metal ion binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Rattus norvegicus (ドブネズミ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||
データ登録者 | Nakanishi, H. / Abe, K. | ||||||
資金援助 | 日本, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Structure and function of H/K pump mutants reveal Na/K pump mechanisms. 著者: Victoria C Young / Hanayo Nakanishi / Dylan J Meyer / Tomohiro Nishizawa / Atsunori Oshima / Pablo Artigas / Kazuhiro Abe / 要旨: Ion-transport mechanisms evolve by changing ion-selectivity, such as switching from Na to H selectivity in secondary-active transporters or P-type-ATPases. Here we study primary-active transport via ...Ion-transport mechanisms evolve by changing ion-selectivity, such as switching from Na to H selectivity in secondary-active transporters or P-type-ATPases. Here we study primary-active transport via P-type ATPases using functional and structural analyses to demonstrate that four simultaneous residue substitutions transform the non-gastric H/K pump, a strict H-dependent electroneutral P-type ATPase, into a bona fide Na-dependent electrogenic Na/K pump. Conversion of a H-dependent primary-active transporter into a Na-dependent one provides a prototype for similar studies of ion-transport proteins. Moreover, we solve the structures of the wild-type non-gastric H/K pump, a suitable drug target to treat cystic fibrosis, and of its Na/K pump-mimicking mutant in two major conformations, providing insight on how Na binding drives a concerted mechanism leading to Na/K pump phosphorylation. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7x22.cif.gz | 254.1 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7x22.ent.gz | 199.3 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7x22.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7x22_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7x22_full_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7x22_validation.xml.gz | 55.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7x22_validation.cif.gz | 80.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/x2/7x22 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/x2/7x22 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 32955MC 7x20C 7x21C 7x23C 7x24C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 2種, 2分子 AB
#1: タンパク質 | 分子量: 109042.586 Da / 分子数: 1 / 変異: K794S / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Rattus norvegicus (ドブネズミ) / 遺伝子: Atp12a, Atp1al1 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) 参照: UniProt: P54708, H+/K+-exchanging ATPase, Na+/K+-exchanging ATPase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 37516.859 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Rattus norvegicus (ドブネズミ) / 遺伝子: Atp1b1 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P07340 |
-糖 , 1種, 1分子
#8: 糖 | ChemComp-NAG / |
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-非ポリマー , 6種, 14分子
#3: 化合物 | ChemComp-ALF / | ||||||
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#4: 化合物 | ChemComp-MG / | ||||||
#5: 化合物 | #6: 化合物 | #7: 化合物 | ChemComp-PCW / #9: 水 | ChemComp-HOH / | |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: non gastric H,K-ATPase / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 150 kDa/nm / 実験値: YES |
由来(天然) | 生物種: Rattus norvegicus (ドブネズミ) |
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 6.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm |
撮影 | 電子線照射量: 48 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
ソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 873901 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 100.27 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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