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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7phm | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis encapsulin | ||||||
要素 | 29 kDa antigen CFP29 | ||||||
キーワード | STRUCTURAL PROTEIN / Encapsulin / icosahedral / oxidative stress response | ||||||
機能・相同性 | Type 1 encapsulin shell protein / Encapsulating protein for peroxidase / : / encapsulin nanocompartment / extracellular region / plasma membrane / Type 1 encapsulin shell protein 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.2 Å | ||||||
データ登録者 | Woodward, J.D. | ||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: To Be Published タイトル: Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis encapsulin 著者: Woodward, J.D. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7phm.cif.gz | 2.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7phm.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7phm.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ph/7phm ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ph/7phm | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 13420MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 29554.072 Da / 分子数: 60 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) 株: ATCC 25618 / H37Rv / 遺伝子: cfp29, Rv0798c / プラスミド: pET-28a(+) / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株 (発現宿主): CodonPlus / 参照: UniProt: I6WZG6 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Empty encapsulin nanocompartment / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT | |||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 1.73 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) | |||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / プラスミド: pET-28a(+) | |||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: Eluted in: 50mM Tris-HCl, 350mM NaCl, 10mM Imidazol, 10% v/v glycerol at pH 7.4 and diluted 1:2 in distilled water. | |||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 1.2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: C-flat 2/2 holey carbon film supported by a standard copper TEM grid and coated with an ultrathin (2-3 nm) continuous carbon film. | |||||||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: Glow-discharged using an EMS100X in air: 25 mA at 20 Pa for 30 seconds. グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-2/2 | |||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 14133 詳細: Data collected in super-resolution mode at 0.53 A/pixel and down-sampled during motion correction to 1.06 A/pixel. |
画像スキャン | 横: 11520 / 縦: 8184 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.13_2998: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 2000000 詳細: 2D class averages were produced using Relion from 1000 manually-picked particles. These were then used as picking templates. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 1000000 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: Correlation coefficient 詳細: Model was generated ab initio using Buccaneer within the CCPEM package and manually corrected using Coot before being refined using Isolde within ChimeraX and Phenix Real Space Refinement ...詳細: Model was generated ab initio using Buccaneer within the CCPEM package and manually corrected using Coot before being refined using Isolde within ChimeraX and Phenix Real Space Refinement within the CCPEM package. |