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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7o17 | ||||||
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タイトル | ABC transporter NosDFY E154Q, ATP-bound in lipid nanodisc | ||||||
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![]() | MEMBRANE PROTEIN / ABC Transporter complex / ATP-bound | ||||||
機能・相同性 | ![]() ABC-type transporter activity / periplasmic space / ATP hydrolysis activity / ATP binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å | ||||||
![]() | Mueller, C. / Zhang, L. / Lu, W. / Einsle, O. / Du, J. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Molecular interplay of an assembly machinery for nitrous oxide reductase. 著者: Christoph Müller / Lin Zhang / Sara Zipfel / Annika Topitsch / Marleen Lutz / Johannes Eckert / Benedikt Prasser / Mohamed Chami / Wei Lü / Juan Du / Oliver Einsle / ![]() ![]() ![]() 要旨: Emissions of the critical ozone-depleting and greenhouse gas nitrous oxide (NO) from soils and industrial processes have increased considerably over the last decades. As the final step of bacterial ...Emissions of the critical ozone-depleting and greenhouse gas nitrous oxide (NO) from soils and industrial processes have increased considerably over the last decades. As the final step of bacterial denitrification, NO is reduced to chemically inert N (refs. ) in a reaction that is catalysed by the copper-dependent nitrous oxide reductase (NOR) (ref. ). The assembly of its unique [4Cu:2S] active site cluster Cu requires both the ATP-binding-cassette (ABC) complex NosDFY and the membrane-anchored copper chaperone NosL (refs. ). Here we report cryo-electron microscopy structures of Pseudomonas stutzeri NosDFY and its complexes with NosL and NOR, respectively. We find that the periplasmic NosD protein contains a binding site for a Cu ion and interacts specifically with NosL in its nucleotide-free state, whereas its binding to NOR requires a conformational change that is triggered by ATP binding. Mutually exclusive structures of NosDFY in complex with NosL and with NOR reveal a sequential metal-trafficking and assembly pathway for a highly complex copper site. Within this pathway, NosDFY acts as a mechanical energy transducer rather than as a transporter. It links ATP hydrolysis in the cytoplasm to a conformational transition of the NosD subunit in the periplasm, which is required for NosDFY to switch its interaction partner so that copper ions are handed over from the chaperone NosL to the enzyme NOR. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 277 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 216.2 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 49.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 75.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 12692MC ![]() 7o0yC ![]() 7o0zC ![]() 7o10C ![]() 7o11C ![]() 7o12C ![]() 7o13C ![]() 7o14C ![]() 7o15C ![]() 7o16C ![]() 7osfC ![]() 7osgC ![]() 7oshC ![]() 7osiC ![]() 7osjC ![]() 7qbaC ![]() 7znqC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 48258.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() | ||||||||
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#2: タンパク質 | 分子量: 33820.719 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: nosF / 発現宿主: ![]() ![]() #3: タンパク質 | 分子量: 29449.203 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() #4: 化合物 | #5: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: ABC Transporter NosFY E154Q variant in complex with accessory periplasmic protein NosD タイプ: COMPLEX / 詳細: ATP-bound state / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 8 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 平均露光時間: 8 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2 / 検出モード: COUNTING / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 |
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解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.5 Å / 粒子像の数: 20977 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 立体化学のターゲット値: CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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