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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 7fcv | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Cryo-EM structure of the Potassium channel AKT1 mutant from Arabidopsis thaliana | ||||||
要素 | Potassium channel AKT1 | ||||||
キーワード | PLANT PROTEIN / Complex / Potassium channel / Membrane protein | ||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報root hair elongation / regulation of stomatal closure / response to water deprivation / inward rectifier potassium channel activity / potassium ion import across plasma membrane / monoatomic ion channel complex / response to salt stress / potassium ion transport / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
| 生物種 | ![]() | ||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | ||||||
データ登録者 | Yang, G.H. / Lu, Y.M. / Jia, Y.T. / Zhang, Y.M. / Tang, R.F. / Xu, X. / Li, X.M. / Lei, J.L. | ||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022タイトル: Structural basis for the activity regulation of a potassium channel AKT1 from Arabidopsis. 著者: Yaming Lu / Miao Yu / Yutian Jia / Fan Yang / Yanming Zhang / Xia Xu / Xiaomin Li / Fan Yang / Jianlin Lei / Yi Wang / Guanghui Yang / ![]() 要旨: The voltage-gated potassium channel AKT1 is responsible for primary K uptake in Arabidopsis roots. AKT1 is functionally activated through phosphorylation and negatively regulated by a potassium ...The voltage-gated potassium channel AKT1 is responsible for primary K uptake in Arabidopsis roots. AKT1 is functionally activated through phosphorylation and negatively regulated by a potassium channel α-subunit AtKC1. However, the molecular basis for the modulation mechanism remains unclear. Here we report the structures of AKT1, phosphorylated-AKT1, a constitutively-active variant, and AKT1-AtKC1 complex. AKT1 is assembled in 2-fold symmetry at the cytoplasmic domain. Such organization appears to sterically hinder the reorientation of C-linkers during ion permeation. Phosphorylated-AKT1 adopts an alternate 4-fold symmetric conformation at cytoplasmic domain, which indicates conformational changes associated with symmetry switch during channel activation. To corroborate this finding, we perform structure-guided mutagenesis to disrupt the dimeric interface and identify a constitutively-active variant Asp379Ala mediates K permeation independently of phosphorylation. This variant predominantly adopts a 4-fold symmetric conformation. Furthermore, the AKT1-AtKC1 complex assembles in 2-fold symmetry. Together, our work reveals structural insight into the regulatory mechanism for AKT1. | ||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 7fcv.cif.gz | 360 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb7fcv.ent.gz | 279.9 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 7fcv.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 7fcv_validation.pdf.gz | 972.9 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 7fcv_full_validation.pdf.gz | 981.3 KB | 表示 | |
| XML形式データ | 7fcv_validation.xml.gz | 53.1 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 7fcv_validation.cif.gz | 79.4 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fc/7fcv ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fc/7fcv | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 31532MC ![]() 7wswC ![]() 7xufC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 97065.609 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: AKT1, At2g26650, F18A8.2 / 細胞株 (発現宿主): IPLB-Sf-21-AE 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: Q38998 #2: 化合物 | ChemComp-PTY / #3: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | |
|---|
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Arabidopsis thaliana Potassium channel AKT1 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 由来(組換発現) | 生物種: ![]() 細胞: IPLB-Sf-21-AE |
| 緩衝液 | pH: 7.4 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
| 撮影 | 電子線照射量: 1.5625 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
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解析
| CTF補正 | タイプ: NONE |
|---|---|
| 3次元再構成 | 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 342803 / 対称性のタイプ: POINT |
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万見について






引用





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FIELD EMISSION GUN