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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6urt | ||||||
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タイトル | Extended Sensor Paddles with Bound Lipids Revealed in Mechanosensitive Channel YnaI | ||||||
要素 | Low conductance mechanosensitive channel YnaI | ||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN / mechanosensitive channel / Phosphoserine lipid / complete paddle | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 mechanosensitive monoatomic ion channel activity / cellular response to osmotic stress / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.27 Å | ||||||
データ登録者 | Hu, W. / Wang, Z. / Zheng, H. | ||||||
引用 | ジャーナル: Commun Biol / 年: 2021 タイトル: Mechanosensitive channel YnaI has lipid-bound extended sensor paddles. 著者: Wenxin Hu / Zhiming Wang / Hongjin Zheng / 要旨: The general mechanism of bacterial mechanosensitive channels (MS) has been characterized by extensive studies on a small conductance channel MscS from Escherichia coli (E. coli). However, recent ...The general mechanism of bacterial mechanosensitive channels (MS) has been characterized by extensive studies on a small conductance channel MscS from Escherichia coli (E. coli). However, recent structural studies on the same channel have revealed controversial roles of various channel-bound lipids in channel gating. To better understand bacterial MscS-like channels, it is necessary to characterize homologs other than MscS. Here, we describe the structure of YnaI, one of the closest MscS homologs in E. coli, in its non-conducting state at 3.3 Å resolution determined by cryo electron microscopy. Our structure revealed the intact membrane sensor paddle domain in YnaI, which was stabilized by functionally important residues H43, Q46, Y50 and K93. In the pockets between sensor paddles, there were clear lipid densities that interact strongly with residues Q100 and R120. These lipids were a mixture of natural lipids but may be enriched in cardiolipin and phosphatidylserine. In addition, residues along the ion-conducting pathway and responsible for the heptameric assembly were discussed. Together with biochemical experiments and mutagenesis studies, our results provide strong support for the idea that the pocket lipids are functionally important for mechanosensitive channels. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6urt.cif.gz | 394.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6urt.ent.gz | 329 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6urt.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6urt_validation.pdf.gz | 988.4 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6urt_full_validation.pdf.gz | 1021.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6urt_validation.xml.gz | 71.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6urt_validation.cif.gz | 96.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ur/6urt ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ur/6urt | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 38792.344 Da / 分子数: 7 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) 株: K12 / 遺伝子: ynaI, b1330, JW1323 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AEB5 #2: 化合物 | ChemComp-QGD / 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: YnaI with PS lipids / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.27 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20mM HEPES pH7.5, 150mM NaCl, 0.01% LMNG, 3mM Fluorinated Fos-Cholin 8 |
試料 | 濃度: 5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-1.2/1.3 4C |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI ARCTICA |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 2 sec. / 電子線照射量: 64.3 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY |
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3次元再構成 | 解像度: 3.27 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 178000 / 対称性のタイプ: POINT |