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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6mhs | ||||||||||||
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タイトル | Structure of the human TRPV3 channel in a putative sensitized conformation | ||||||||||||
要素 | Transient receptor potential cation channel subfamily V member 3 | ||||||||||||
キーワード | TRANSPORT PROTEIN / membrane protein / ion channel / TRP channel / calcium transport | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of hair cycle / TRP channels / response to temperature stimulus / positive regulation of calcium ion import / calcium ion transmembrane transport / calcium channel activity / lysosome / receptor complex / identical protein binding / plasma membrane / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Zubcevic, L. / Herzik, M.A. / Wu, M. / Borschel, W.F. / Hirschi, M. / Song, A. / Lander, G.C. / Lee, S.Y. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2018 タイトル: Conformational ensemble of the human TRPV3 ion channel. 著者: Lejla Zubcevic / Mark A Herzik / Mengyu Wu / William F Borschel / Marscha Hirschi / Albert S Song / Gabriel C Lander / Seok-Yong Lee / 要旨: Transient receptor potential vanilloid channel 3 (TRPV3), a member of the thermosensitive TRP (thermoTRPV) channels, is activated by warm temperatures and serves as a key regulator of normal skin ...Transient receptor potential vanilloid channel 3 (TRPV3), a member of the thermosensitive TRP (thermoTRPV) channels, is activated by warm temperatures and serves as a key regulator of normal skin physiology through the release of pro-inflammatory messengers. Mutations in trpv3 have been identified as the cause of the congenital skin disorder, Olmsted syndrome. Unlike other members of the thermoTRPV channel family, TRPV3 sensitizes upon repeated stimulation, yet a lack of structural information about the channel precludes a molecular-level understanding of TRPV3 sensitization and gating. Here, we present the cryo-electron microscopy structures of apo and sensitized human TRPV3, as well as several structures of TRPV3 in the presence of the common thermoTRPV agonist 2-aminoethoxydiphenyl borate (2-APB). Our results show α-to-π-helix transitions in the S6 during sensitization, and suggest a critical role for the S4-S5 linker π-helix during ligand-dependent gating. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6mhs.cif.gz | 412.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6mhs.ent.gz | 324.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6mhs.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/mh/6mhs ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/mh/6mhs | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 9117MC 9115C 9119C 9120C 9121C 6mhoC 6mhvC 6mhwC 6mhxC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 94860.219 Da / 分子数: 4 / 変異: T96A / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TRPV3 発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q8NET8 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Human TRPV3 in a putative sensitized state / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
由来(組換発現) | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 0.35 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: Gatan Solarus / グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil, UltrAuFoil, R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 277 K 詳細: Sample was manually blotted for 4 seconds prior to plunge-freezing into liquid ethane cooled by liquid nitrogen. |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TALOS ARCTICA 詳細: Alignment performed as described in Herzik, Wu, Lander, Nat Methods 2017 (PMID: 28991891) |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 45000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 最高温度: 93 K / 最低温度: 93 K |
撮影 | 平均露光時間: 12 sec. / 電子線照射量: 67 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2982 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm / 横: 3710 / 縦: 3838 / 動画フレーム数/画像: 47 / 利用したフレーム数/画像: 1-47 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.10.1_2155: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 559206 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C4 (4回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 44554 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 51 / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: Correlation coefficient | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 5AN8 PDB chain-ID: A / Accession code: 5AN8 / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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