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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6jcy | ||||||
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タイトル | Mycobacterium tuberculosis RNA polymerase transcription initiation open complex with a chimeric ECF sigma factor sigH/E | ||||||
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![]() | TRANSCRIPTION / Mycobacterium tuberculosis / RNA polymerase / open complex / sigma H/E | ||||||
機能・相同性 | ![]() response to nitrosative stress / Antimicrobial action and antimicrobial resistance in Mtb / response to host immune response / biological process involved in interaction with host / sigma factor activity / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-directed RNA polymerase complex / peptidoglycan-based cell wall / DNA-templated transcription initiation ...response to nitrosative stress / Antimicrobial action and antimicrobial resistance in Mtb / response to host immune response / biological process involved in interaction with host / sigma factor activity / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-directed RNA polymerase complex / peptidoglycan-based cell wall / DNA-templated transcription initiation / response to hydrogen peroxide / ribonucleoside binding / DNA-directed RNA polymerase / DNA-directed RNA polymerase activity / cellular response to heat / response to heat / response to oxidative stress / protein dimerization activity / response to xenobiotic stimulus / response to antibiotic / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() synthetic construct (人工物) | ||||||
手法 | ![]() ![]() ![]() | ||||||
![]() | Li, L. / Zhang, Y. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structures and mechanism of transcription initiation by bacterial ECF factors. 著者: Chengli Fang / Lingting Li / Liqiang Shen / Jing Shi / Sheng Wang / Yu Feng / Yu Zhang / ![]() ![]() 要旨: Bacterial RNA polymerase (RNAP) forms distinct holoenzymes with extra-cytoplasmic function (ECF) σ factors to initiate specific gene expression programs. In this study, we report a cryo-EM structure ...Bacterial RNA polymerase (RNAP) forms distinct holoenzymes with extra-cytoplasmic function (ECF) σ factors to initiate specific gene expression programs. In this study, we report a cryo-EM structure at 4.0 Å of Escherichia coli transcription initiation complex comprising σE-the most-studied bacterial ECF σ factor (Ec σE-RPo), and a crystal structure at 3.1 Å of Mycobacterium tuberculosis transcription initiation complex with a chimeric σH/E (Mtb σH/E-RPo). The structure of Ec σE-RPo reveals key interactions essential for assembly of E. coli σE-RNAP holoenzyme and for promoter recognition and unwinding by E. coli σE. Moreover, both structures show that the non-conserved linkers (σ2/σ4 linker) of the two ECF σ factors are inserted into the active-center cleft and exit through the RNA-exit channel. We performed secondary-structure prediction of 27,670 ECF σ factors and find that their non-conserved linkers probably reach into and exit from RNAP active-center cleft in a similar manner. Further biochemical results suggest that such σ2/σ4 linker plays an important role in RPo formation, abortive production and promoter escape during ECF σ factors-mediated transcription initiation. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 650.6 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 505.6 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 530.9 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 564.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 103 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 142.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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単位格子 |
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要素
-DNA-directed RNA polymerase subunit ... , 4種, 5分子 ABCDE
#1: タンパク質 | 分子量: 40279.039 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 株: H37Rv / 遺伝子: rpoA / プラスミド: pETduet / 発現宿主: ![]() ![]() #2: タンパク質 | | 分子量: 129602.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 株: H37Rv / 遺伝子: rpoB / プラスミド: pACYCduet / 発現宿主: ![]() ![]() #3: タンパク質 | | 分子量: 147068.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 株: H37Rv / 遺伝子: rpoC / プラスミド: pACYCduet / 発現宿主: ![]() ![]() #4: タンパク質 | | 分子量: 11851.140 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 株: H37Rv / 遺伝子: rpoZ / プラスミド: pETduet / 発現宿主: ![]() ![]() |
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-DNA鎖 , 2種, 2分子 GH
#6: DNA鎖 | 分子量: 7152.606 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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#7: DNA鎖 | 分子量: 6206.001 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-タンパク質 / RNA鎖 , 2種, 2分子 FI
#5: タンパク質 | 分子量: 23561.391 Da / 分子数: 1 Fragment: UNP residues 1-95, UNP residues 150-188, UNP residues 144-216 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 株: H37Rv / 遺伝子: sigH, sigE / プラスミド: pTOLO-EX5 / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#8: RNA鎖 | 分子量: 1851.165 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-非ポリマー , 3種, 133分子 




#9: 化合物 | #10: 化合物 | ChemComp-MG / | #11: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: ![]() |
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試料調製
結晶 | マシュー密度: 2.95 Å3/Da / 溶媒含有率: 58.27 % |
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結晶化 | 温度: 295 K / 手法: 蒸気拡散法, ハンギングドロップ法 詳細: 0.2M sodium acetate, 0.1M sodium citrate pH 5.5, 10% PEG4000 |
-データ収集
回折 | 平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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放射光源 | 由来: ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
検出器 | タイプ: DECTRIS EIGER X 16M / 検出器: PIXEL / 日付: 2018年4月2日 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
放射波長 | 波長: 0.97916 Å / 相対比: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
反射 | 解像度: 3.1→50 Å / Num. obs: 78903 / % possible obs: 93.3 % / 冗長度: 4.2 % / Biso Wilson estimate: 92.64 Å2 / CC1/2: 0.995 / Rmerge(I) obs: 0.09 / Rpim(I) all: 0.047 / Rrim(I) all: 0.102 / Χ2: 1.152 / Net I/av σ(I): 14.18 / Net I/σ(I): 12.3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
反射 シェル | Diffraction-ID: 1
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解析
ソフトウェア |
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精密化 | 構造決定の手法: ![]() 開始モデル: 5zx3 解像度: 3.106→48.766 Å / SU ML: 0.4 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 1.35 / 位相誤差: 28.52
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溶媒の処理 | 減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso max: 188.48 Å2 / Biso mean: 102.0856 Å2 / Biso min: 43.46 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: final / 解像度: 3.106→48.766 Å
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LS精密化 シェル | Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION / Rfactor Rfree error: 0 / Total num. of bins used: 17
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