温度: 293 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 7.5 詳細: 12-15% PEG 4000 OR PEG 3000, 0.1M MGCL2, 0.015M BETA MERCAPTOETHANOL, 0.1M TRIS-DCL, PD 7.9, 0.4M NASCN. ALL DISSOLVED IN D2O. CRYSTAL GROWN IN A 15 + 15 MICROLITRE SITTING DROP THAT WAS ...詳細: 12-15% PEG 4000 OR PEG 3000, 0.1M MGCL2, 0.015M BETA MERCAPTOETHANOL, 0.1M TRIS-DCL, PD 7.9, 0.4M NASCN. ALL DISSOLVED IN D2O. CRYSTAL GROWN IN A 15 + 15 MICROLITRE SITTING DROP THAT WAS FIRST EQUILIBRATED FOR 1 WEEK. A SMALL CRYSTAL GROWN AT 20-28% PEG WAS THEN INTRODUCED. THE DROP WAS FED WITH FRESH PROTEIN BY ADDING 3-4 MICROLITRES OF PROTEIN WITH 10 MM LACTOSE EVERY 3-4 DAYS FOR 3 MONTHS. LACTOSE WAS THEN REMOVED IN TWO STEPS, FIRST BY DIALYSING AGAINST 1M GLYCEROL FOR 1 MONTH THEN AGAINST BUFFER WITH NO GLYCEROL FOR 1 MONTH. FOR DETAILS, SEE MANZONI ET AL. (2016).
-
データ収集
回折
ID
平均測定温度 (K)
Crystal-ID
1
100
1
2
298
1
放射光源
由来
サイト
ビームライン
ID
波長 (Å)
シンクロトロン
ESRF
BM30A
1
0.98081
NUCLEAR REACTOR
ILL
LADIIII
2
3.35-4.35
検出器
タイプ
ID
検出器
日付
詳細
ADSC QUANTUM 315r
1
CCD
2017年3月10日
FOCUSINGMIRRORS
2
IMAGE PLATE
2017年2月15日
放射
ID
モノクロメーター
プロトコル
単色(M)・ラウエ(L)
散乱光タイプ
Wavelength-ID
1
DOUBLECRYSTAL
SINGLEWAVELENGTH
M
x-ray
1
2
LAUE
L
neutron
2
放射波長
ID
波長 (Å)
相対比
1
0.98081
1
2
3.35
1
3
4.35
1
反射
Entry-ID: 6F2Q
解像度 (Å)
Num. obs
% possible obs (%)
冗長度 (%)
CC1/2
Rmerge(I) obs
Rpim(I) all
Diffraction-ID
Net I/σ(I)
Rsym value
1.03-28
70173
99.8
14
1
0.044
0.012
1
35.5
1.8-30
9844
83.8
4.9
0.993
0.053
2
8.5
0.132
反射 シェル
解像度 (Å)
冗長度 (%)
Rmerge(I) obs
Mean I/σ(I) obs
Num. unique obs
CC1/2
Rpim(I) all
Diffraction-ID
% possible all
1.03-1.06
9.3
2.357
1
5138
0.355
0.933
1
99.2
1.8-1.9
3.4
0.194
1177
0.917
0.091
2
67.1
-
解析
ソフトウェア
名称
バージョン
分類
PHENIX
(1.12_2829: ???)
精密化
XDS
データ削減
LAUEGEN
データスケーリング
PHENIX
位相決定
精密化
SU ML: 0.11 / 交差検証法: THROUGHOUT / 構造決定の手法: フーリエ合成 / 位相誤差: 13.66 / 減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 開始モデル: 6EYM