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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6bpq | ||||||
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タイトル | Structure of the cold- and menthol-sensing ion channel TRPM8 | ||||||
要素 | Transient receptor potential cation channel subfamily M member 8 | ||||||
キーワード | TRANSPORT PROTEIN / cold sensor / menthol sensor / calcium-permeable ion channel / ion channel | ||||||
機能・相同性 | TRPM, SLOG domain / : / SLOG in TRPM / monoatomic ion channel activity / Ion transport domain / Ion transport protein / identical protein binding / membrane / Transient receptor potential cation channel subfamily M member 8 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Ficedula albicollis (シロエリヒタキ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | ||||||
データ登録者 | Yin, Y. / Wu, M. / Zubcevic, L. / Borschel, W.F. / Lander, G.C. / Lee, S.-Y. | ||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2018 タイトル: Structure of the cold- and menthol-sensing ion channel TRPM8. 著者: Ying Yin / Mengyu Wu / Lejla Zubcevic / William F Borschel / Gabriel C Lander / Seok-Yong Lee / 要旨: Transient receptor potential melastatin (TRPM) cation channels are polymodal sensors that are involved in a variety of physiological processes. Within the TRPM family, member 8 (TRPM8) is the primary ...Transient receptor potential melastatin (TRPM) cation channels are polymodal sensors that are involved in a variety of physiological processes. Within the TRPM family, member 8 (TRPM8) is the primary cold and menthol sensor in humans. We determined the cryo-electron microscopy structure of the full-length TRPM8 from the collared flycatcher at an overall resolution of ~4.1 ångstroms. Our TRPM8 structure reveals a three-layered architecture. The amino-terminal domain with a fold distinct among known TRP structures, together with the carboxyl-terminal region, forms a large two-layered cytosolic ring that extensively interacts with the transmembrane channel layer. The structure suggests that the menthol-binding site is located within the voltage-sensor-like domain and thus provides a structural glimpse of the design principle of the molecular transducer for cold and menthol sensation. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6bpq.cif.gz | 541.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6bpq.ent.gz | 411.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6bpq.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6bpq_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6bpq_full_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6bpq_validation.xml.gz | 84.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6bpq_validation.cif.gz | 134.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bp/6bpq ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bp/6bpq | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 107845.281 Da / 分子数: 4 / 変異: F535A,Y538D,Y539D / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Ficedula albicollis (シロエリヒタキ) 遺伝子: TRPM8 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: U3JD03*PLUS 配列の詳細 | Authors state that the sample sequence presented in the structure is of 1135 a.a. residue length, ...Authors state that the sample sequence presented in the structure is of 1135 a.a. residue length, containing N-terminal tag 'MA', full length sequence of UNP entry U3JD03 with F535A, Y538D, Y539D mutations, and C-terminal tag 'SNSLEVLFQG | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Transient receptor potential cation channel subfamily M member 8 (TRPM8) タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Ficedula albicollis (シロエリヒタキ) |
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 0.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: 15 mA / グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil, UltrAuFoil, R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 22500 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 12 sec. / 電子線照射量: 56 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 実像数: 8367 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm / 横: 3710 / 縦: 3838 / 動画フレーム数/画像: 48 / 利用したフレーム数/画像: 1-48 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 3142841 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C4 (4回回転対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 19740 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 96 / プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL |