+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5uym | |||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | 70S ribosome bound with cognate ternary complex base-paired to A site codon, closed 30S (Structure III) | |||||||||||||||
要素 |
| |||||||||||||||
キーワード | RIBOSOME / ternary complex | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 guanyl-nucleotide exchange factor complex / negative regulation of cytoplasmic translational initiation / guanosine tetraphosphate binding / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / translational elongation / Group I intron splicing / RNA folding ...guanyl-nucleotide exchange factor complex / negative regulation of cytoplasmic translational initiation / guanosine tetraphosphate binding / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / translational elongation / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / translation elongation factor activity / negative regulation of cytoplasmic translation / translational termination / DnaA-L2 complex / four-way junction DNA binding / translation repressor activity / negative regulation of translational initiation / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / cytosolic ribosome assembly / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / translational initiation / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / 5S rRNA binding / transferase activity / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Loveland, A.B. / Demo, G. / Grigorieff, N. / Korostelev, A.A. | |||||||||||||||
資金援助 | 米国, 4件
| |||||||||||||||
引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2017 タイトル: Ensemble cryo-EM elucidates the mechanism of translation fidelity. 著者: Anna B Loveland / Gabriel Demo / Nikolaus Grigorieff / Andrei A Korostelev / 要旨: Gene translation depends on accurate decoding of mRNA, the structural mechanism of which remains poorly understood. Ribosomes decode mRNA codons by selecting cognate aminoacyl-tRNAs delivered by ...Gene translation depends on accurate decoding of mRNA, the structural mechanism of which remains poorly understood. Ribosomes decode mRNA codons by selecting cognate aminoacyl-tRNAs delivered by elongation factor Tu (EF-Tu). Here we present high-resolution structural ensembles of ribosomes with cognate or near-cognate aminoacyl-tRNAs delivered by EF-Tu. Both cognate and near-cognate tRNA anticodons explore the aminoacyl-tRNA-binding site (A site) of an open 30S subunit, while inactive EF-Tu is separated from the 50S subunit. A transient conformation of decoding-centre nucleotide G530 stabilizes the cognate codon-anticodon helix, initiating step-wise 'latching' of the decoding centre. The resulting closure of the 30S subunit docks EF-Tu at the sarcin-ricin loop of the 50S subunit, activating EF-Tu for GTP hydrolysis and enabling accommodation of the aminoacyl-tRNA. By contrast, near-cognate complexes fail to induce the G530 latch, thus favouring open 30S pre-accommodation intermediates with inactive EF-Tu. This work reveals long-sought structural differences between the pre-accommodation of cognate and near-cognate tRNAs that elucidate the mechanism of accurate decoding. | |||||||||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5uym.cif.gz | 3.8 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb5uym.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 5uym.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 5uym_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 5uym_full_validation.pdf.gz | 2.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 5uym_validation.xml.gz | 273.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 5uym_validation.cif.gz | 446.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/uy/5uym ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/uy/5uym | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8617MC 8615C 8616C 8618C 8619C 8620C 5uykC 5uylC 5uynC 5uypC 5uyqC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
---|---|
類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
|
-要素
+50S ribosomal protein ... , 32種, 32分子 0405060708091011121314151617181920212223242526272829303132333403
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 BCDEFGHIJKLMNOPQRSTU
#32: タンパク質 | 分子量: 24253.943 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V0 |
---|---|
#33: タンパク質 | 分子量: 23078.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V3 |
#34: タンパク質 | 分子量: 23383.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7V8 |
#35: タンパク質 | 分子量: 16532.088 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7W1 |
#36: タンパク質 | 分子量: 11669.371 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P02358 |
#37: タンパク質 | 分子量: 16861.523 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P02359 |
#38: タンパク質 | 分子量: 14015.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7W7 |
#39: タンパク質 | 分子量: 14554.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7X3 |
#40: タンパク質 | 分子量: 11196.988 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7R5 |
#41: タンパク質 | 分子量: 12388.068 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7R9 |
#42: タンパク質 | 分子量: 13636.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7S3 |
#43: タンパク質 | 分子量: 12625.753 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7S9 |
#44: タンパク質 | 分子量: 11475.364 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0AG59 |
#45: タンパク質 | 分子量: 10159.621 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0ADZ4 |
#46: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7T3 |
#47: タンパク質 | 分子量: 9263.946 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0AG63 |
#48: タンパク質 | 分子量: 7606.768 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7T7 |
#49: タンパク質 | 分子量: 9057.626 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7U3 |
#50: タンパク質 | 分子量: 9506.190 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P0A7U7 |
#51: タンパク質 | 分子量: 7763.073 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: UniProt: P68679 |
-RNA鎖 , 6種, 7分子 A0102XWVY
#53: RNA鎖 | 分子量: 498725.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1108575010 | ||||
---|---|---|---|---|---|
#54: RNA鎖 | 分子量: 941305.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 802133627 | ||||
#55: RNA鎖 | 分子量: 38813.133 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1108609475 | ||||
#56: RNA鎖 | 分子量: 24802.785 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1160538609 #57: RNA鎖 | | 分子量: 5844.563 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) #58: RNA鎖 | | 分子量: 24485.539 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株: MRE600 / 参照: GenBank: 1160538609 |
-タンパク質 , 1種, 1分子 Z
#59: タンパク質 | 分子量: 43152.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) 株: MRE600 / 遺伝子: tufA, b3339, JW3301 / 発現宿主: Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) / 株 (発現宿主): BLR / 参照: UniProt: P0CE47 |
---|
-非ポリマー , 5種, 388分子
#60: 化合物 | ChemComp-MG / #61: 化合物 | #62: 化合物 | ChemComp-FME / | #63: 化合物 | ChemComp-PHE / | #64: 化合物 | ChemComp-GCP / | |
---|
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: 70S ribosome bound with cognate ternary complex base-paired to A site codon, closed 30S (Structure III) タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#59 / 由来: MULTIPLE SOURCES | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
分子量 | 値: 2.5 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: 250 nM 50S, 250 nM 30S, 1.25 micromolar mRNA, 500 nM fMet-tRNAfMet, 1 micromolar EF-T, 500 micromolar GDPCP, 1 micromolar Phe-tRNAPhe | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-1.2/1.3 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 275 K 詳細: 2 uL of complex was applied to each grid. After a 10-second incubation, the grids were blotted for 2 to 4 seconds. |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 60976 X / 倍率(補正後): 60976 X / 最大 デフォーカス(公称値): 5000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 0.4 sec. / 電子線照射量: 1 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 3928 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm / 横: 7676 / 縦: 7420 / 動画フレーム数/画像: 50 / 利用したフレーム数/画像: 1-50 |
-解析
EMソフトウェア |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
画像処理 | 詳細: Gain reference was applied, movies were aligned, and the summed imaged were corrected for magnification anisotropy. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | 詳細: CTFFIND3 was used to determine CTF values. FREALIGN applied CTF correction. タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 800367 詳細: Particles were picked from micrographs using Signature reference-based particle picker. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 153597 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / クラス平均像の数: 6 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: correlation coefficient |