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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4udv | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of TMV at 3.35 A resolution | ||||||
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![]() | VIRAL PROTEIN / DIRECT ELECTRON DETECTORS / SINGLE PARTICLE HELICAL RECONSTRUCTION / HIGH RESOLUTION | ||||||
機能・相同性 | ![]() | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.35 Å | ||||||
![]() | Fromm, S.A. / Bharat, T.A.M. / Jakobi, A.J. / Hagen, W.J.H. / Sachse, C. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Seeing tobacco mosaic virus through direct electron detectors. 著者: Simon A Fromm / Tanmay A M Bharat / Arjen J Jakobi / Wim J H Hagen / Carsten Sachse / ![]() ![]() 要旨: With the introduction of direct electron detectors (DED) to the field of electron cryo-microscopy, a wave of atomic-resolution structures has become available. As the new detectors still require ...With the introduction of direct electron detectors (DED) to the field of electron cryo-microscopy, a wave of atomic-resolution structures has become available. As the new detectors still require comparative characterization, we have used tobacco mosaic virus (TMV) as a test specimen to study the quality of 3D image reconstructions from data recorded on the two direct electron detector cameras, K2 Summit and Falcon II. Using DED movie frames, we explored related image-processing aspects and compared the performance of micrograph-based and segment-based motion correction approaches. In addition, we investigated the effect of dose deposition on the atomic-resolution structure of TMV and show that radiation damage affects negative carboxyl chains first in a side-chain specific manner. Finally, using 450,000 asymmetric units and limiting the effects of radiation damage, we determined a high-resolution cryo-EM map at 3.35Å resolution. Here, we provide a comparative case study of highly ordered TMV recorded on different direct electron detectors to establish recording and processing conditions that enable structure determination up to 3.2Å in resolution using cryo-EM. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 40.7 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 26.6 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 898.8 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 901.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 16.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 22.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 2842MC ![]() 2833C ![]() 2834C ![]() 2835C ![]() 2836C ![]() 2837C ![]() 2838C ![]() 2839C ![]() 2840C ![]() 2841C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | ![]() Data size: 47.7 Data #1: Tobacco Mosaic Virus micrographs [micrographs - multiframe]) |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 | ![]()
| x 49
2 |
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3 | ![]()
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対称性 | らせん対称: (回転対称性: 1 / Dyad axis: no / N subunits divisor: 1 / Num. of operations: 49 / Rise per n subunits: 1.408 Å / Rotation per n subunits: 22.03 °) |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 17505.426 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 958.660 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: TOBACCO MOSAIC VIRUS / タイプ: VIRUS |
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緩衝液 | 名称: 50 MM NAPO4 / pH: 7 / 詳細: 50 MM NAPO4 |
試料 | 濃度: 11 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE 詳細: CRYOGEN - ETHANE, HUMIDITY - 90 PERCENT, TEMPERATURE - 95 K, INSTRUMENT - FEI VITROBOT MARK III PROCEDURE - BLOT FOR 8 SECONDS WITH AN OFFSET OF -2 MM CA 30-45 SECONDS AFTER SAMPLE APPLICATION |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2013年10月16日 詳細: NANOPROBE MODE, DOSE RATE CA 41 E- PX S ON THE CAMERA LEVEL, FULLY AUTOMATED ACQUISITION USING FEI EPU SOFTWARE |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 75000 X / 倍率(補正後): 131827 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 30.7 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
画像スキャン | デジタル画像の数: 109 |
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解析
EMソフトウェア | 名称: SPRING / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||
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CTF補正 | 詳細: CTFTILT (SPECIFIC FOR EACH SEGMENT) | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: PROJECTION MATCHING / 解像度: 3.35 Å / 粒子像の数: 450000 / ピクセルサイズ(公称値): 1.062 Å / ピクセルサイズ(実測値): 1.062 Å / 倍率補正: LAYER LINE CORRELATION 詳細: SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-2842. (DEPOSITION ID: 12988). 対称性のタイプ: HELICAL | ||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 90 / プロトコル: OTHER / 空間: REAL / Target criteria: REAL SPACE CORRELATION 詳細: METHOD--LOCAL AND GLOBAL CORRELATION REFINEMENT PROTOCOL--FIBRE DIFFRACTION | ||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 3.35 Å | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 3.35 Å
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