The protein was expressed with His tag and subjected to limited proteolysis by chymotrypsin
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実験情報
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実験
実験
手法: X線回折
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試料調製
結晶
マシュー密度: 2.26 Å3/Da / 溶媒含有率: 45.61 %
結晶化
温度: 289 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 7 詳細: 0.2 ul of 14 mg/ml protein in 20 mM HEPES pH 7.5, 150 mM NaCl, 10% Glycerol, 0.1% Sodium Azide and 0.5 mM TCEP were mixed with 0.2 ul of the MCSG-II condition #42 (1.1 M Ammonium Tartrate ...詳細: 0.2 ul of 14 mg/ml protein in 20 mM HEPES pH 7.5, 150 mM NaCl, 10% Glycerol, 0.1% Sodium Azide and 0.5 mM TCEP were mixed with 0.2 ul of the MCSG-II condition #42 (1.1 M Ammonium Tartrate Dibasic pH 7.0) and equilibrated against 1.5 M NaCl solution in 96 Well 3 drop Crystallization Plate (Swissci). Before crystallization protein was incubated with 1/50 v/v of 2 mg/ml chymotrypsin solution at 289 K for 3 hours. Temp details: Rigaku Gallery 700
解像度: 2.2→2.24 Å / 冗長度: 4.1 % / Rmerge(I) obs: 0.457 / Mean I/σ(I) obs: 1.9 / % possible all: 85.7
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解析
ソフトウェア
名称
バージョン
分類
HKL-3000
データ収集
HKL-3000
位相決定
HKL-3000
データスケーリング
SHELXDE
位相決定
MLPHARE
位相決定
直接法
位相決定
Coot
モデル構築
REFMAC
5.8.0049
精密化
PDB_EXTRACT
データ抽出
精密化
構造決定の手法: 単波長異常分散 / 解像度: 2.2→50 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.955 / Cor.coef. Fo:Fc free: 0.93 / SU B: 12.06 / SU ML: 0.162 / SU R Cruickshank DPI: 0.15 / 交差検証法: THROUGHOUT / σ(F): 0 / ESU R: 0.271 / ESU R Free: 0.201 / SU Rfree Cruickshank DPI: 0.2 立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS
Rfactor
反射数
%反射
Selection details
Rfree
0.21676
731
5.1 %
RANDOM
Rwork
0.16725
-
-
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obs
0.16977
13677
97.87 %
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溶媒の処理
イオンプローブ半径: 0.8 Å / 減衰半径: 0.8 Å / VDWプローブ半径: 1.2 Å / 溶媒モデル: MASK