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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 3jcr | ||||||
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タイトル | 3D structure determination of the human*U4/U6.U5* tri-snRNP complex | ||||||
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![]() | SPLICING / snRNP / spliceosome / human | ||||||
機能・相同性 | ![]() Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / RNA localization / U4atac snRNA binding / R-loop processing / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / Lsm1-7-Pat1 complex ...Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / RNA localization / U4atac snRNA binding / R-loop processing / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / Lsm1-7-Pat1 complex / box C/D sno(s)RNA binding / U6 snRNP / PH domain binding / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / dense fibrillar component / histone pre-mRNA 3'end processing complex / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / box C/D methylation guide snoRNP complex / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / U4/U6 snRNP / protein methylation / U12-type spliceosomal complex / 7-methylguanosine cap hypermethylation / RNA splicing, via transesterification reactions / U1 snRNP binding / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / methylosome / pICln-Sm protein complex / U2-type catalytic step 1 spliceosome / U4 snRNA binding / snRNP binding / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / P granule / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type precatalytic spliceosome / telomerase holoenzyme complex / U2-type spliceosomal complex / telomerase RNA binding / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / box C/D snoRNP assembly / U4 snRNP / U2 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / P-body assembly / U1 snRNP / U3 snoRNA binding / U2-type prespliceosome / tRNA processing / rRNA modification in the nucleus and cytosol / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / mRNA catabolic process / mRNA Splicing - Minor Pathway / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / MLL1 complex / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / protein deubiquitination / U5 snRNA binding / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / single fertilization / pre-mRNA intronic binding / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / spliceosomal snRNP assembly / RNA processing / ribonucleoprotein complex binding / Cajal body / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / maturation of SSU-rRNA / response to cocaine / response to bacterium / spliceosomal complex / small-subunit processome / P-body / helicase activity / mRNA splicing, via spliceosome / small GTPase binding / cellular response to xenobiotic stimulus / mRNA processing / osteoblast differentiation / cellular response to tumor necrosis factor / ATPase binding / cellular response to lipopolysaccharide / ribosomal small subunit biogenesis / snRNP Assembly / protein-macromolecule adaptor activity 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7 Å | ||||||
![]() | Agafonov, D.E. / Kastner, B. / Dybkov, O. / Hofele, R.V. / Liu, W.T. / Urlaub, H. / Luhrmann, R. / Stark, H. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Molecular architecture of the human U4/U6.U5 tri-snRNP. 著者: Dmitry E Agafonov / Berthold Kastner / Olexandr Dybkov / Romina V Hofele / Wen-Ti Liu / Henning Urlaub / Reinhard Lührmann / Holger Stark / ![]() 要旨: The U4/U6.U5 triple small nuclear ribonucleoprotein (tri-snRNP) is a major spliceosome building block. We obtained a three-dimensional structure of the 1.8-megadalton human tri-snRNP at a resolution ...The U4/U6.U5 triple small nuclear ribonucleoprotein (tri-snRNP) is a major spliceosome building block. We obtained a three-dimensional structure of the 1.8-megadalton human tri-snRNP at a resolution of 7 angstroms using single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM). We fit all known high-resolution structures of tri-snRNP components into the EM density map and validated them by protein cross-linking. Our model reveals how the spatial organization of Brr2 RNA helicase prevents premature U4/U6 RNA unwinding in isolated human tri-snRNPs and how the ubiquitin C-terminal hydrolase-like protein Sad1 likely tethers the helicase Brr2 to its preactivation position. Comparison of our model with cryo-EM three-dimensional structures of the Saccharomyces cerevisiae tri-snRNP and Schizosaccharomyces pombe spliceosome indicates that Brr2 undergoes a marked conformational change during spliceosome activation, and that the scaffolding protein Prp8 is also rearranged to accommodate the spliceosome's catalytic RNA network. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 392.6 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 185.8 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 102.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 158.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 6581MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
+タンパク質 , 26種, 33分子 GDCEAFBOoPpQqRrSsTtUu8654327KL...
-RNA鎖 , 3種, 3分子 MNH
#27: RNA鎖 | 分子量: 46536.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#28: RNA鎖 | 分子量: 34098.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#29: RNA鎖 | 分子量: 36891.684 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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分子量 | 値: 1.8 MDa / 実験値: YES | |||||||||||||||
緩衝液 | 名称: 20 mM HEPES, pH 7.9, 100 mM KCl, 5 mM MgCl2, 0.1 mM EDTA pH: 7.9 詳細: 20 mM HEPES, pH 7.9, 100 mM KCl, 5 mM MgCl2, 0.1 mM EDTA | |||||||||||||||
試料 | 濃度: 0.1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||
試料支持 | 詳細: 200 mesh copper grid with carbon support film | |||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 詳細: Plunged into liquid ethane (FEI VITROBOT MARK IV). |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2015年9月10日 |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(補正後): 74000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 5350 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 0.0001 mm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
画像スキャン | デジタル画像の数: 4688 |
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解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||
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対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 141109 / ピクセルサイズ(公称値): 2 Å / ピクセルサイズ(実測値): 2 Å / 詳細: (Single particle--Applied symmetry: C1) / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST
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