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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 3j5l | ||||||
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タイトル | Structure of the E. coli 50S subunit with ErmBL nascent chain | ||||||
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![]() | RIBOSOME/ANTIBIOTIC / erythromycin / stalling / RIBOSOME-ANTIBIOTIC complex | ||||||
機能・相同性 | ![]() stringent response / transcriptional attenuation / positive regulation of ribosome biogenesis / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / translational termination / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation ...stringent response / transcriptional attenuation / positive regulation of ribosome biogenesis / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / translational termination / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / assembly of large subunit precursor of preribosome / ribosome assembly / cytosolic ribosome assembly / response to reactive oxygen species / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / large ribosomal subunit / transferase activity / ribosome binding / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.6 Å | ||||||
![]() | Arenz, S. / Ramu, H. / Gupta, P. / Berninghausen, O. / Beckmann, R. / Vazquez-Laslop, N. / Mankin, A.S. / Wilson, D.N. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Molecular basis for erythromycin-dependent ribosome stalling during translation of the ErmBL leader peptide. 著者: Stefan Arenz / Haripriya Ramu / Pulkit Gupta / Otto Berninghausen / Roland Beckmann / Nora Vázquez-Laslop / Alexander S Mankin / Daniel N Wilson / ![]() ![]() 要旨: In bacteria, ribosome stalling during translation of ErmBL leader peptide occurs in the presence of the antibiotic erythromycin and leads to induction of expression of the downstream macrolide ...In bacteria, ribosome stalling during translation of ErmBL leader peptide occurs in the presence of the antibiotic erythromycin and leads to induction of expression of the downstream macrolide resistance methyltransferase ErmB. The lack of structures of drug-dependent stalled ribosome complexes (SRCs) has limited our mechanistic understanding of this regulatory process. Here we present a cryo-electron microscopy structure of the erythromycin-dependent ErmBL-SRC. The structure reveals that the antibiotic does not interact directly with ErmBL, but rather redirects the path of the peptide within the tunnel. Furthermore, we identify a key peptide-ribosome interaction that defines an important relay pathway from the ribosomal tunnel to the peptidyltransferase centre (PTC). The PTC of the ErmBL-SRC appears to adopt an uninduced state that prevents accommodation of Lys-tRNA at the A-site, thus providing structural basis for understanding how the drug and the nascent peptide cooperate to inhibit peptide bond formation and induce translation arrest. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 2.2 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 1.7 MB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
+50S ribosomal protein ... , 29種, 29分子 01234CDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ
-RNA鎖 , 4種, 4分子 57AB
#6: RNA鎖 | 分子量: 617.483 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 詳細: 3'-end of A-site tRNA |
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#8: RNA鎖 | 分子量: 894.612 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 詳細: 3'-end of P-site tRNA |
#9: RNA鎖 | 分子量: 941612.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#10: RNA鎖 | 分子量: 38177.762 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-タンパク質・ペプチド , 1種, 1分子 6
#7: タンパク質・ペプチド | 分子量: 1253.513 Da / 分子数: 1 / Fragment: nascent chain / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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-非ポリマー , 2種, 2分子 
#35: 化合物 | ChemComp-UNL / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 |
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#36: 化合物 | ChemComp-ERY / |
-詳細
Has protein modification | Y |
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配列の詳細 | FULL-LENGTH PROTEIN L9 IS PRESENT IN THE RIBOSOME, BUT ONLY RESIDUES 1-56 ARE MODELED. |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: ErmBL-stalled E. coli 70S ribosome / タイプ: RIBOSOME |
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緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 詳細: Plunged into liquid ethane (FEI VITROBOT MARK IV) |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2013年3月14日 |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 148721 X / 倍率(補正後): 148721 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / カメラ長: 0 mm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 傾斜角・最大: 0 ° / 傾斜角・最小: 0 ° |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k) |
画像スキャン | デジタル画像の数: 17906 |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 相対比: 1 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: Defocus groups | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 6.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 粒子像の数: 349744 / ピクセルサイズ(公称値): 1.0605 Å / ピクセルサイズ(実測値): 1.0605 Å / 詳細: (Single particle--Applied symmetry: C1) / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / 詳細: REFINEMENT PROTOCOL--rigid body | ||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 3OFR![]() 3ofr Accession code: 3OFR / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST
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