+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 2z9q | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Transfer RNA in the hybrid P/E state | ||||||
![]() | tRNA | ||||||
![]() | RNA / distorted anticodon-stem-loop / twisted CCA arm | ||||||
機能・相同性 | RNA / RNA (> 10)![]() | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 11.7 Å | ||||||
![]() | Frank, J. / Li, W. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Transfer RNA in the hybrid P/E state: correlating molecular dynamics simulations with cryo-EM data. 著者: Wen Li / Joachim Frank / ![]() 要旨: Transfer RNA (tRNA) transiently occupies the hybrid P/E state (P/E-tRNA) when mRNA-tRNA are translocated in the ribosome. In this study, we characterize the structure of P/E-tRNA and its interactions ...Transfer RNA (tRNA) transiently occupies the hybrid P/E state (P/E-tRNA) when mRNA-tRNA are translocated in the ribosome. In this study, we characterize the structure of P/E-tRNA and its interactions with the ribosome by correlating the results from molecular dynamics simulations on free tRNA with the cryo-EM map of P/E-tRNA. In our approach, we show that the cryo-EM map may be interpreted as a conformational average. Along the molecular dynamics trajectories (44 ns, 18 ns, and 18 ns), some of the snapshots prove to be quite close to the observed density. In a representative structure, the CCA (3') arm is uniquely twisted, and the anticodon stem loop is kinked at the junctions to both the anticodon loop and the D stem. In addition, the map shows that the P/E-tRNA is no longer bound to helix H69 of 23S rRNA and is flexible, and the conformations of helices H68 and h44 of 16S rRNA differ from those in the x-ray structure. Thus, our study presents structural and dynamic information on the P/E-tRNA and characterizes its interactions with the translocating ribosome. #1: ![]() タイトル: Locking and unlocking of ribosomal motions. 著者: Mikel Valle / Andrey Zavialov / Jayati Sengupta / Urmila Rawat / Måns Ehrenberg / Joachim Frank / ![]() 要旨: During the ribosomal translocation, the binding of elongation factor G (EF-G) to the pretranslocational ribosome leads to a ratchet-like rotation of the 30S subunit relative to the 50S subunit in the ...During the ribosomal translocation, the binding of elongation factor G (EF-G) to the pretranslocational ribosome leads to a ratchet-like rotation of the 30S subunit relative to the 50S subunit in the direction of the mRNA movement. By means of cryo-electron microscopy we observe that this rotation is accompanied by a 20 A movement of the L1 stalk of the 50S subunit, implying that this region is involved in the translocation of deacylated tRNAs from the P to the E site. These ribosomal motions can occur only when the P-site tRNA is deacylated. Prior to peptidyl-transfer to the A-site tRNA or peptide removal, the presence of the charged P-site tRNA locks the ribosome and prohibits both of these motions. | ||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
ムービー |
![]() |
---|---|
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 15.8 KB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | ![]() | 4.6 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 746.2 KB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | ![]() | 745.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 8.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 10.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 1363M M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
---|---|
類似構造データ |
-
リンク
-
集合体
登録構造単位 | ![]()
|
---|---|
1 |
|
-
要素
#1: RNA鎖 | 分子量: 24544.916 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
---|
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
構成要素 | 名称: EF-G bound Release Complex in the presence of Puromycin and GDPNP タイプ: RIBOSOME |
---|---|
緩衝液 | 名称: polymix / pH: 7.5 / 詳細: polymix |
試料 | 濃度: 32 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: carbon on quantifoil grids |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 詳細: PLUNGED INTO ETHANE |
-
電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F20 / 日付: 2001年6月1日 / 詳細: SAMPLES WERE MAINTAINED AT LIQUID NITROGEN |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 50000 X / 倍率(補正後): 49696 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3.925 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.75 nm / Cs: 2 mm |
試料ホルダ | 温度: 80 K / 傾斜角・最大: 0 ° / 傾斜角・最小: 0 ° |
撮影 | 電子線照射量: 15 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
画像スキャン | デジタル画像の数: 38858 |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 相対比: 1 |
-
解析
EMソフトウェア | 名称: SPIDER / カテゴリ: 3次元再構成 詳細: Fast Motif Search Procedure in SPIDER. Reference: Rath and Frank 2004 JSB 145 page84 | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | 詳細: CTF correction of each defocus group reconstruction | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: single particle reconstruction / 解像度: 11.7 Å / ピクセルサイズ(公称値): 2.8 Å / ピクセルサイズ(実測値): 2.82 Å / 倍率補正: TMV / 詳細: THE STRUCTURE CONTAINS P ATOMS ONLY / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL / Target criteria: cross correlation coefficient / 詳細: REFINEMENT PROTOCOL--auto | ||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 1TTT Accession code: 1TTT / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST
|