手法: 溶液NMR 詳細: Independent half-domains enriched with disulfide bonds and separated by linker.
NMR実験
Conditions-ID
Experiment-ID
Solution-ID
タイプ
1
1
1
2D 1H-15N HSQC
1
2
1
2D 1H-13C HSQC
1
3
1
3DHN(CO)CA
1
4
1
3D HNCA
1
5
1
3D MQ-(H)CCH-TOCSY
1
6
1
13C/ 15N edited-NOESY
-
試料調製
詳細
内容: 10 mM sodium phosphate, 0.1 mM sodium azide, 100 mM sodium chloride, 1 mM EDTA, 0.8 mM [U-100% 13C; U-100% 15N] protein, 95% H2O, 5% D2O 溶媒系: 95% H2O/5% D2O
試料
濃度 (mg/ml)
構成要素
Isotopic labeling
Solution-ID
10mM
sodium phosphate-1
1
0.1mM
sodium azide-2
1
100mM
sodium chloride-3
1
1mM
EDTA-4
1
0.8mM
entity-5
[U-100% 13C; U-100% 15N]
1
試料状態
pH: 6.5 / 圧: ambient / 温度: 303 K
-
NMR測定
NMRスペクトロメーター
タイプ: Bruker Avance / 製造業者: Bruker / モデル: Avance / 磁場強度: 800 MHz
-
解析
NMR software
名称
バージョン
開発者
分類
CYANA
2.1
GuntertP.
精密化
NMRPipe
1
Delaglio, Grzesiek, Vuister, Zhu, PfeiferandBax
解析
NMRView
5.04
Johnson, OneMoonScientific
データ解析
TALOS
Cornilescu, DelaglioandBax
geometryoptimization
精密化
手法: simulated annealing / ソフトェア番号: 1 詳細: NOE distance refinement using CYANA 2.1. Hydrogen bond restraints using H-D exchange experiment
NMR constraints
NOE constraints total: 1869 / NOE intraresidue total count: 763 / NOE long range total count: 389 / NOE medium range total count: 124 / NOE sequential total count: 593 / Hydrogen bond constraints total count: 5 / Protein phi angle constraints total count: 54 / Protein psi angle constraints total count: 54
代表構造
選択基準: lowest energy
NMRアンサンブル
コンフォーマー選択の基準: target function / 計算したコンフォーマーの数: 100 / 登録したコンフォーマーの数: 10