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- EMDB-9117: Structure of the human TRPV3 channel in a putative sensitized con... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-9117
タイトルStructure of the human TRPV3 channel in a putative sensitized conformation
マップデータSingle-particle cryo-EM reconstruction of human TRPV3 in a putative sensitized state
試料
  • 複合体: Human TRPV3 in a putative sensitized state
    • タンパク質・ペプチド: Transient receptor potential cation channel subfamily V member 3
キーワードmembrane protein / ion channel / TRP channel / calcium transport / TRANSPORT PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


negative regulation of hair cycle / TRP channels / response to temperature stimulus / positive regulation of calcium ion import / calcium ion transmembrane transport / calcium channel activity / lysosome / receptor complex / identical protein binding / plasma membrane / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Transient receptor potential cation channel subfamily V member 1-4 / Transient receptor potential cation channel subfamily V / Ankyrin repeat / Ankyrin repeats (3 copies) / Ankyrin repeat profile. / Ankyrin repeat region circular profile. / ankyrin repeats / Ankyrin repeat / Ankyrin repeat-containing domain superfamily / Ion transport domain / Ion transport protein
類似検索 - ドメイン・相同性
Transient receptor potential cation channel subfamily V member 3
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å
データ登録者Zubcevic L / Herzik MA
資金援助 米国, 3件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of Neurological Disorders and Stroke (NIH/NINDS)R35NS097241 米国
National Institutes of Health/National Institute of Biomedical Imaging and Bioengineering (NIH/NIBIB)DP2EB020402 米国
National Institutes of Health/National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases (NIH/NIAMS)R21AR072910 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2018
タイトル: Conformational ensemble of the human TRPV3 ion channel.
著者: Lejla Zubcevic / Mark A Herzik / Mengyu Wu / William F Borschel / Marscha Hirschi / Albert S Song / Gabriel C Lander / Seok-Yong Lee /
要旨: Transient receptor potential vanilloid channel 3 (TRPV3), a member of the thermosensitive TRP (thermoTRPV) channels, is activated by warm temperatures and serves as a key regulator of normal skin ...Transient receptor potential vanilloid channel 3 (TRPV3), a member of the thermosensitive TRP (thermoTRPV) channels, is activated by warm temperatures and serves as a key regulator of normal skin physiology through the release of pro-inflammatory messengers. Mutations in trpv3 have been identified as the cause of the congenital skin disorder, Olmsted syndrome. Unlike other members of the thermoTRPV channel family, TRPV3 sensitizes upon repeated stimulation, yet a lack of structural information about the channel precludes a molecular-level understanding of TRPV3 sensitization and gating. Here, we present the cryo-electron microscopy structures of apo and sensitized human TRPV3, as well as several structures of TRPV3 in the presence of the common thermoTRPV agonist 2-aminoethoxydiphenyl borate (2-APB). Our results show α-to-π-helix transitions in the S6 during sensitization, and suggest a critical role for the S4-S5 linker π-helix during ligand-dependent gating.
履歴
登録2018年9月18日-
ヘッダ(付随情報) 公開2018年10月3日-
マップ公開2018年10月3日-
更新2024年3月13日-
現状2024年3月13日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.05
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.05
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6mhs
  • 表面レベル: 0.05
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_9117.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_9117.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Single-particle cryo-EM reconstruction of human TRPV3 in a putative sensitized state
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.91 Å/pix.
x 256 pix.
= 232.96 Å		0.91 Å/pix.
x 256 pix.
= 232.96 Å		0.91 Å/pix.
x 256 pix.
= 232.96 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.91 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.05 / ムービー #1: 0.05
最小 - 最大-0.08902326 - 0.19661194
平均 (標準偏差)0.00008799932 (±0.011077303)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin130130130
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 232.96 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z0.910.910.91
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z232.960232.960232.960
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS130130130
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-0.0890.1970.000

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添付データ

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ハーフマップ: Even half map

ファイルemd_9117_half_map_1.map
注釈Even half map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Odd half map

ファイルemd_9117_half_map_2.map
注釈Odd half map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Human TRPV3 in a putative sensitized state

全体名称: Human TRPV3 in a putative sensitized state
要素
  • 複合体: Human TRPV3 in a putative sensitized state
    • タンパク質・ペプチド: Transient receptor potential cation channel subfamily V member 3

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超分子 #1: Human TRPV3 in a putative sensitized state

超分子名称: Human TRPV3 in a putative sensitized state / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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分子 #1: Transient receptor potential cation channel subfamily V member 3

分子名称: Transient receptor potential cation channel subfamily V member 3
タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 94.860219 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: MEKAHPKEMV PLMGKRVAAP SGNPAILPEK RPAEITPTKK SAHFFLEIEG FEPNPTVAKT SPPVFSKPMD SNIRQCISGN CDDMDSPQS PQDDVTETPS NPNSPSAQLA KEEQRRKKRR LKKRIFAAVS EGCVEELVEL LVELQELCRR RHDEDVPDFL M HKLTASDT ...文字列:
MEKAHPKEMV PLMGKRVAAP SGNPAILPEK RPAEITPTKK SAHFFLEIEG FEPNPTVAKT SPPVFSKPMD SNIRQCISGN CDDMDSPQS PQDDVTETPS NPNSPSAQLA KEEQRRKKRR LKKRIFAAVS EGCVEELVEL LVELQELCRR RHDEDVPDFL M HKLTASDT GKTCLMKALL NINPNTKEIV RILLAFAEEN DILGRFINAE YTEEAYEGQT ALNIAIERRQ GDIAALLIAA GA DVNAHAK GAFFNPKYQH EGFYFGETPL ALAACTNQPE IVQLLMEHEQ TDITSRDSRG NNILHALVTV AEDFKTQNDF VKR MYDMIL LRSGNWELET TRNNDGLTPL QLAAKMGKAE ILKYILSREI KEKRLRSLSR KFTDWAYGPV SSSLYDLTNV DTTT DNSVL EITVYNTNID NRHEMLTLEP LHTLLHMKWK KFAKHMFFLS FCFYFFYNIT LTLVSYYRPR EEEAIPHPLA LTHKM GWLQ LLGRMFVLIW AMCISVKEGI AIFLLRPSDL QSILSDAWFH FVFFIQAVLV ILSVFLYLFA YKEYLACLVL AMALGW ANM LYYTRGFQSM GMYSVMIQKV ILHDVLKFLF VYIVFLLGFG VALASLIEKC PKDNKDCSSY GSFSDAVLEL FKLTIGL GD LNIQQNSKYP ILFLFLLITY VILTFVLLLN MLIALMGETV ENVSKESERI WRLQRARTIL EFEKMLPEWL RSRFRMGE L CKVAEDDFRL CLRINEVKWT EWKTHVSFLN EDPGPVRRTD FNKIQDSSRN NSKTTLNAFE EVEEFPETSV VDAGLEVLF QGPAAAVDYK DDDDKAHHHH HHHHHH

UniProtKB: Transient receptor potential cation channel subfamily V member 3

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.35 mg/mL
緩衝液pH: 8
グリッドモデル: Quantifoil, UltrAuFoil, R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 7 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER / 詳細: Gatan Solarus
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER
詳細: Sample was manually blotted for 4 seconds prior to plunge-freezing into liquid ethane cooled by liquid nitrogen..

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TALOS ARCTICA
温度最低: 93.0 K / 最高: 93.0 K
詳細Alignment performed as described in Herzik, Wu, Lander, Nat Methods 2017 (PMID: 28991891)
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3710 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3838 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-47 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2982 / 平均露光時間: 12.0 sec. / 平均電子線量: 67.0 e/Å2
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm
最大 デフォーカス（公称値）: 1.4000000000000001 µm
最小 デフォーカス（公称値）: 0.8 µm / 倍率（公称値）: 45000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 559206
初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

9115


詳細: Initial particles were 3D auto-refined using a 30-Angstrom low-pass-filtered apo TRPV3 structure (EMDB-9115) as the initial model.
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C4 (4回回転対称) / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1) / 使用した粒子像数: 44554
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

5an8


Chain - Chain ID: A / Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 51 / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient
得られたモデル

PDB-6mhs:
Structure of the human TRPV3 channel in a putative sensitized conformation

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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