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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8575 | |||||||||
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タイトル | Negative stain 3D reconstruction of hexameric ComM in the presence of ATP and ssDNA | |||||||||
マップデータ | Hexameric ComM in the presence of ATP and ssDNA | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 establishment of competence for transformation / DNA duplex unwinding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Haemophilus influenzae (インフルエンザ菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 13.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Nero TM / Dalia TN / Wang JC-Y / Bochman ML / Dalia AB | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2018 タイトル: ComM is a hexameric helicase that promotes branch migration during natural transformation in diverse Gram-negative species. 著者: Thomas M Nero / Triana N Dalia / Joseph Che-Yen Wang / David T Kysela / Matthew L Bochman / Ankur B Dalia / 要旨: Acquisition of foreign DNA by natural transformation is an important mechanism of adaptation and evolution in diverse microbial species. Here, we characterize the mechanism of ComM, a broadly ...Acquisition of foreign DNA by natural transformation is an important mechanism of adaptation and evolution in diverse microbial species. Here, we characterize the mechanism of ComM, a broadly conserved AAA+ protein previously implicated in homologous recombination of transforming DNA (tDNA) in naturally competent Gram-negative bacterial species. In vivo, we found that ComM was required for efficient comigration of linked genetic markers in Vibrio cholerae and Acinetobacter baylyi, which is consistent with a role in branch migration. Also, ComM was particularly important for integration of tDNA with increased sequence heterology, suggesting that its activity promotes the acquisition of novel DNA sequences. In vitro, we showed that purified ComM binds ssDNA, oligomerizes into a hexameric ring, and has bidirectional helicase and branch migration activity. Based on these data, we propose a model for tDNA integration during natural transformation. This study provides mechanistic insight into the enigmatic steps involved in tDNA integration and uncovers the function of a protein required for this conserved mechanism of horizontal gene transfer. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8575.map.gz | 2.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8575-v30.xml emd-8575.xml | 10.9 KB 10.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8575.png | 73.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8575 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8575 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8575_validation.pdf.gz | 78.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_8575_full_validation.pdf.gz | 77.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8575_validation.xml.gz | 495 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8575 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8575 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8575.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Hexameric ComM in the presence of ATP and ssDNA | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.8 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Hexameric ComM protein in the presence of ATP and ssDNA
全体 | 名称: Hexameric ComM protein in the presence of ATP and ssDNA |
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要素 |
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-超分子 #1: Hexameric ComM protein in the presence of ATP and ssDNA
超分子 | 名称: Hexameric ComM protein in the presence of ATP and ssDNA タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Haemophilus influenzae (インフルエンザ菌) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 組換株: Rosetta 2(DE3) pLysS |
分子量 | 実験値: 342 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 25 mM Na-HEPES (pH 7.5), 5% glycerol, 300 mM NaCl, 5 mM MgCl2, and 0.05% Tween-20 |
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 材質: Uranyl Formate / 詳細: 0.75% (w/v) Uranyl Formate |
グリッド | モデル: EMS CF300-Cu / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 3200FS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 0.3 sec. / 平均電子線量: 14.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 60000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: JEOL |