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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8517 | |||||||||
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タイトル | Chicken Slo2.2 in a closed conformation vitrified in the presence of 300 mM NaCl | |||||||||
マップデータ | Closed Slo2.2 density map | |||||||||
試料 |
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キーワード | Ion channel / potassium channel / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 intracellular sodium-activated potassium channel activity / outward rectifier potassium channel activity / potassium ion transmembrane transport / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Gallus gallus (ニワトリ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.76 Å | |||||||||
データ登録者 | Hite RK / MacKinnon R | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2017 タイトル: Structural Titration of Slo2.2, a Na-Dependent K Channel. 著者: Richard K Hite / Roderick MacKinnon / 要旨: The stable structural conformations that occur along the complete reaction coordinate for ion channel opening have never been observed. In this study, we describe the equilibrium ensemble of ...The stable structural conformations that occur along the complete reaction coordinate for ion channel opening have never been observed. In this study, we describe the equilibrium ensemble of structures of Slo2.2, a neuronal Na-activated K channel, as a function of the Na concentration. We find that Slo2.2 exists in multiple closed conformations whose relative occupancies are independent of Na concentration. An open conformation emerges from an ensemble of closed conformations in a highly Na-dependent manner, without evidence of Na-dependent intermediates. In other words, channel opening is a highly concerted, switch-like process. The midpoint of the structural titration matches that of the functional titration. A maximum open conformation probability approaching 1.0 and maximum functional open probability approaching 0.7 imply that, within the class of open channels, there is a subclass that is not permeable to ions. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8517.map.gz | 46.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8517-v30.xml emd-8517.xml | 14.9 KB 14.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8517.png | 169.9 KB | ||
Filedesc metadata | emd-8517.cif.gz | 6.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8517 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8517 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8517_validation.pdf.gz | 452.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_8517_full_validation.pdf.gz | 452 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8517_validation.xml.gz | 6.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_8517_validation.cif.gz | 7.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8517 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8517 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8517.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Closed Slo2.2 density map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.3 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Chicken Slo2.2 in closed conformation
全体 | 名称: Chicken Slo2.2 in closed conformation |
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要素 |
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-超分子 #1: Chicken Slo2.2 in closed conformation
超分子 | 名称: Chicken Slo2.2 in closed conformation / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Gallus gallus (ニワトリ) |
-分子 #1: Potassium channel subfamily T member 1
分子 | 名称: Potassium channel subfamily T member 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Gallus gallus (ニワトリ) |
分子量 | 理論値: 137.409812 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MARAKLKNSP SESNSHVKTV PPATTEDVRG VSPLLPARRM GSLGSDVGQR PHAEDFSMDS SFSQVQVEFY VNENTFKERL KLFFIKNQR SSLRIRLFNF SLKLLTCLLY IVRVLLDNPE EGIGCWECEK QNYTLFNQST KINWSHIFWV DRKLPLWAVQ V SIALISFL ...文字列: MARAKLKNSP SESNSHVKTV PPATTEDVRG VSPLLPARRM GSLGSDVGQR PHAEDFSMDS SFSQVQVEFY VNENTFKERL KLFFIKNQR SSLRIRLFNF SLKLLTCLLY IVRVLLDNPE EGIGCWECEK QNYTLFNQST KINWSHIFWV DRKLPLWAVQ V SIALISFL ETMLLIYLSY KGNIWEQIFR ISFILEMINT VPFIITIFWP PLRNLFIPVF LNCWLAKYAL ENMINDLHRA IQ RTQSAMF NQVLILICTL LCLVFTGTCG IQHLERAGEK LSLFKSFYFC IVTFSTVGYG DVTPKIWPSQ LLVVIMICVA LVV LPLQFE ELVYLWMERQ KSGGNYSRHR AQTEKHVVLC VSSLKIDLLM DFLNEFYAHP RLQDYYVVIL CPTEMDIQVR RVLQ IPLWS QRVIYLQGSA LKDQDLMRAK MDNGEACFIL SSRNEVDRTA ADHQTILRAW AVKDFAPNCP LYVQILKPEN KFHVK FADH VVCEEECKYA MLALNCVCPA TSTLITLLVH TSRGQEGQES PEQWQRMYGR CSGNEVYHIR MGDSKFFMEY EGKSFT YAA FHAHKKYGVC LIGIRREENK SILLNPGPRH IMAASDTCFY INITKEENSA FIFKQAEKQK KKGFAGRGTY DGPSRLP VH SIIASMGTVA MDLQNTECRP TNSSKLALPA ENGSGNRRPS IAPVLELADT SSLLPCDLLS DQSEDEMTQS DEEGSAVV E YVKGYPPNSP YIGSSPTLCH LLPEKAPFCC LRLDKGCKHN SFEDAKAYGF KNKLIIVSAE TAGNGLYNFI VPLRAYYRS RKELNPIVLL LDNKPEHHFL EAICCFPMVY YMEGTIDNLD SLLQCGIIYA DNLVVVDKES TMSAEEDYMA DAKTIVNVQT MFRLFPSLS IITELTHPSN MRFMQFRAKD SYSLALSKLE KKERENGSNL AFMFRLPFAA GRVFSISMLD TLLYQSFVKD Y MITITRLL LGLDTTPGSG YLCAMKITED DLWIRTYGRL FQKLCSSSAE IPIGIYRTES HMFATSEPHD IRAQSQISIN VE DCEDTKD VKEHWGIKTG HHRNSCSSDQ SEHPLLRRKS MQWARRLSRK GNKHSGKTAE WISQQRLSLY RRSERQELSE LVK NRMKHL GLPTTGYDEM NDHQNTLSYV LINPPPDTRL ELNDIVYLIR SDPLAHVAND GHSRKSSCSN KLGPCNPETR DETQ L UniProtKB: Potassium channel subfamily T member 1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 6 mg/mL | |||||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 10 sec. | |||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 88 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 3710 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3838 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-50 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2000 / 平均露光時間: 1.2 sec. / 平均電子線量: 59.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | PDB-5u76: |