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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8331 | |||||||||
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タイトル | Glycan shield and epitope masking of a coronavirus spike protein observed by cryo-electron microscopy | |||||||||
マップデータ | Coronavirus spike protein | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 endocytosis involved in viral entry into host cell / host cell endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment membrane / receptor-mediated virion attachment to host cell / host cell surface receptor binding / fusion of virus membrane with host plasma membrane / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope / virion membrane / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Human coronavirus NL63 (ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | |||||||||
データ登録者 | Walls AC / Tortorici MA / Frenz B / Snijder J / Li W / Rey FA / DiMaio F / Bosch BJ / Veesler D | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2016 タイトル: Glycan shield and epitope masking of a coronavirus spike protein observed by cryo-electron microscopy. 著者: Alexandra C Walls / M Alejandra Tortorici / Brandon Frenz / Joost Snijder / Wentao Li / Félix A Rey / Frank DiMaio / Berend-Jan Bosch / David Veesler / 要旨: The threat of a major coronavirus pandemic urges the development of strategies to combat these pathogens. Human coronavirus NL63 (HCoV-NL63) is an α-coronavirus that can cause severe lower- ...The threat of a major coronavirus pandemic urges the development of strategies to combat these pathogens. Human coronavirus NL63 (HCoV-NL63) is an α-coronavirus that can cause severe lower-respiratory-tract infections requiring hospitalization. We report here the 3.4-Å-resolution cryo-EM reconstruction of the HCoV-NL63 coronavirus spike glycoprotein trimer, which mediates entry into host cells and is the main target of neutralizing antibodies during infection. The map resolves the extensive glycan shield obstructing the protein surface and, in combination with mass spectrometry, provides a structural framework to understand the accessibility to antibodies. The structure reveals the complete architecture of the fusion machinery including the triggering loop and the C-terminal domains, which contribute to anchoring the trimer to the viral membrane. Our data further suggest that HCoV-NL63 and other coronaviruses use molecular trickery, based on epitope masking with glycans and activating conformational changes, to evade the immune system of infected hosts. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8331.map.gz | 10.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8331-v30.xml emd-8331.xml | 14.6 KB 14.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8331.png | 230.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8331 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8331 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8331_validation.pdf.gz | 328.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_8331_full_validation.pdf.gz | 328 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8331_validation.xml.gz | 6.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_8331_validation.cif.gz | 7.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8331 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8331 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8331.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Coronavirus spike protein | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.36 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Human coronavirus NL63 spike glycoprotein ectodomain
全体 | 名称: Human coronavirus NL63 spike glycoprotein ectodomain |
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要素 |
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-超分子 #1: Human coronavirus NL63 spike glycoprotein ectodomain
超分子 | 名称: Human coronavirus NL63 spike glycoprotein ectodomain タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Human coronavirus NL63 (ウイルス) |
組換発現 | 生物種: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) 組換細胞: Schneider 2 / 組換プラスミド: pMT-BiP-V5-His |
分子量 | 理論値: 450 KDa |
-分子 #1: Spike glycoprotein
分子 | 名称: Spike glycoprotein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Human coronavirus NL63 (ウイルス) |
分子量 | 理論値: 146.813984 KDa |
組換発現 | 生物種: Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) |
配列 | 文字列: FFTCNSNANL SMLQLGVPDN SSTIVTGLLP THWFCANQST SVYSANGFFY IDVGNHRSAF ALHTGYYDAN QYYIYVTNEI GLNASVTLK ICKFSRNTTF DFLSNASSSF DCIVNLLFTE QLGAPLGITI SGETVRLHLY NVTRTFYVPA AYKLTKLSVK C YFNYSCVF ...文字列: FFTCNSNANL SMLQLGVPDN SSTIVTGLLP THWFCANQST SVYSANGFFY IDVGNHRSAF ALHTGYYDAN QYYIYVTNEI GLNASVTLK ICKFSRNTTF DFLSNASSSF DCIVNLLFTE QLGAPLGITI SGETVRLHLY NVTRTFYVPA AYKLTKLSVK C YFNYSCVF SVVNATVTVN VTTHNGRVVN YTVCDDCNGY TDNIFSVQQD GRIPNGFPFN NWFLLTNGST LVDGVSRLYQ PL RLTCLWP VPGLKSSTGF VYFNATGSDV NCNGYQHNSV VDVMRYNLNF SANSLDNLKS GVIVFKTLQY DVLFYCSNSS SGV LDTTIP FGPSSQPYYC FINSTINTTH VSTFVGILPP TVREIVVART GQFYINGFKY FDLGFIEAVN FNVTTASATD FWTV AFATF VDVLVNVSAT NIQNLLYCDS PFEKLQCEHL QFGLQDGFYS ANFLDDNVLP ETYVALPIYY QHTDINFTAT ASFGG SCYV CKPHQVNISL NGNTSVCVRT SHFSIRYIYN RVKSGSPGDS SWHIYLKSGT CPFSFSKLNN FQKFKTICFS TVEVPG SCN FPLEATWHYT SYTIVGALYV TWSEGNSITG VPYPVSGIRE FSNLVLNNCT KYNIYDYVGT GIIRSSNQSL AGGITYV SN SGNLLGFKNV STGNIFIVTP CNQPDQVAVY QQSIIGAMTA VNESRYGLQN LLQLPNFYYV SNGGNNCTTA VMTYSNFG I CADGSLIPVR PRNSSDNGIS AIITANLSIP SNWTTSVQVE YLQITSTPIV VDCATYVCNG NPRCKNLLKQ YTSACKTIE DALRLSAHLE TNDVSSMLTF DSNAFSLANV TSFGDYNLSS VLPQRNIRSS RIAGRSALED LLFSKVVTSG LGTVDVDYKS CTKGLSIAD LACAQYYNGI MVLPGVADAE RMAMYTGSLI GGMVLGGLTS AAAIPFSLAL QARLNYVALQ TDVLQENQKI L AASFNKAI NNIVASFSSV NDAITQTAEA IHTVTIALNK IQDVVNQQGS ALNHLTSQLR HNFQAISNSI QAIYDRLDSI QA DQQVDRL ITGRLAALNA FVSQVLNKYT EVRGSRRLAQ QKINECVKSQ SNRYGFCGNG THIFSIVNSA PDGLLFLHTV LLP TDYKNV KAWSGICVDG IYGYVLRQPN LVLYSDNGVF RVTSRVMFQP RLPVLSDFVQ IYNCNVTFVN ISRVELHTVI PDYV DVNKT LQEFAQNLPK YVKPNFDLTP FNLTYLNLSS ELKQLEAKTA SLFQTTVELQ GLIDQINSTY VDLKLLNRFE NLIKR MKQI EDKIEEIESK QKKIENEIAR IKKIKLVPRG SLEWSHPQFE K |
-分子 #9: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
分子 | 名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 9 / コピー数: 21 / 式: NAG |
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分子量 | 理論値: 221.208 Da |
Chemical component information | ChemComp-NAG: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1 mg/mL | ||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 / 構成要素:
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グリッド | モデル: Protochips C-flat 1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 詳細: 20 mA | ||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サンプリング間隔: 5.0 µm / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-50 / 平均露光時間: 10.0 sec. / 平均電子線量: 48.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | PDB-5szs: |