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- EMDB-6615: State 1 of cryo-EM structure of the yeast pre-60S particles isola... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-6615
タイトルState 1 of cryo-EM structure of the yeast pre-60S particles isolated with Nog2-TAP
マップデータReconstruction of pre-60S ribosomal subunit
試料
  • 試料: state1 of pre-60S ribosome subunit
  • 複合体: pre-60S ribosome
キーワードPre-60S particle / ribosome biogenesis / assembly factor / Nog2 / Nog1 / ITS2 / Translation
機能・相同性
機能・相同性情報


protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / nuclear exosome (RNase complex) / 加水分解酵素 / PeBoW complex / 7S RNA binding / rRNA primary transcript binding / positive regulation of ATP-dependent activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) ...protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / nuclear exosome (RNase complex) / 加水分解酵素 / PeBoW complex / 7S RNA binding / rRNA primary transcript binding / positive regulation of ATP-dependent activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of 5.8S rRNA / hexon binding / pre-mRNA 5'-splice site binding / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / proteasome binding / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / ribosomal large subunit binding / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / Formation of a pool of free 40S subunits / negative regulation of mRNA splicing, via spliceosome / preribosome, large subunit precursor / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / ATPase activator activity / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / translational elongation / ribosomal large subunit export from nucleus / regulation of translational fidelity / protein-RNA complex assembly / ribonucleoprotein complex binding / ribosomal subunit export from nucleus / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of LSU-rRNA / Neutrophil degranulation / translation initiation factor activity / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / proteasome complex / nuclear periphery / assembly of large subunit precursor of preribosome / ribosomal large subunit biogenesis / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / cytosolic ribosome assembly / small-subunit processome / macroautophagy / maintenance of translational fidelity / protein catabolic process / rRNA processing / metallopeptidase activity / protein transport / ribosome biogenesis / viral capsid / protein-macromolecule adaptor activity / ATPase binding / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / nucleic acid binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / GTPase activity / mRNA binding / host cell nucleus / GTP binding / nucleolus / proteolysis / RNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / identical protein binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Ribosome biogenesis protein Rpf2 / Ribosome biogenesis protein 15, RNA recognition motif / Ribosome biogenesis protein Nop53/GLTSCR2 / Nop53 (60S ribosomal biogenesis) / : / Cgr1-like / Cgr1 family / Ribosomal biogenesis regulatory protein / Ribosome biogenesis regulatory protein (RRS1) / : ...Ribosome biogenesis protein Rpf2 / Ribosome biogenesis protein 15, RNA recognition motif / Ribosome biogenesis protein Nop53/GLTSCR2 / Nop53 (60S ribosomal biogenesis) / : / Cgr1-like / Cgr1 family / Ribosomal biogenesis regulatory protein / Ribosome biogenesis regulatory protein (RRS1) / : / Nucleolar GTP-binding protein 2, N-terminal domain / Nucleolar GTP-binding protein 2 / NGP1NT (NUC091) domain / Domain of unknown function DUF2423 / YBL028C ribosome biogenesis factor, N-terminal domain / NLE / NLE (NUC135) domain / Guanine nucleotide-binding protein-like 3, N-terminal domain / GNL3L/Grn1 putative GTPase / Zinc-finger double-stranded RNA-binding / Zinc finger, double-stranded RNA binding / : / Pescadillo / Pescadillo N-terminus / GTP-binding protein, orthogonal bundle domain superfamily / Ribosomal biogenesis NSA2 family / Ribosome assembly factor Mrt4 / : / BRCT domain, a BRCA1 C-terminus domain / NOG, C-terminal / Nucleolar GTP-binding protein 1 / NOGCT (NUC087) domain / Nucleolar GTP-binding protein 1, Rossman-fold domain / NOG1, N-terminal helical domain / Nucleolar GTP-binding protein 1 (NOG1) / NOG1 N-terminal helical domain / Brix domain / Brix domain / Brix domain profile. / Brix / Circularly permuted (CP)-type guanine nucleotide-binding (G) domain / Circularly permuted (CP)-type guanine nucleotide-binding (G) domain profile. / Matrin/U1-C-like, C2H2-type zinc finger / U1-like zinc finger / OBG-type guanine nucleotide-binding (G) domain / OBG-type guanine nucleotide-binding (G) domain profile. / Translation initiation factor IF6 / eIF-6 family / translation initiation factor 6 / 50S ribosome-binding GTPase / Pre-hexon-linking protein VIII / Adenovirus hexon associated protein, protein VIII / Creatinase/aminopeptidase-like / GTP binding domain / 50S ribosomal protein L10, insertion domain superfamily / : / 60S ribosomal protein L10P, insertion domain / Insertion domain in 60S ribosomal protein L10P / metallochaperone-like domain / TRASH domain / breast cancer carboxy-terminal domain / Ribosomal protein L13e, conserved site / Ribosomal protein L13e signature. / Ribosomal protein L22e / Ribosomal protein L22e superfamily / Ribosomal L22e protein family / Ribosomal protein L38e / Ribosomal protein L38e superfamily / Ribosomal L38e protein family / Ribosomal protein L27e, conserved site / Ribosomal protein L27e signature. / Ribosomal protein L13e / Ribosomal protein L13e / Ribosomal protein L19, eukaryotic / 60S ribosomal protein L18a/ L20, eukaryotes / Ribosomal protein L19/L19e conserved site / Ribosomal protein L19e signature. / Ribosomal protein L34e, conserved site / Ribosomal protein L34e signature. / Ribosomal protein L5 eukaryotic, C-terminal / Ribosomal L18 C-terminal region / : / Ribosomal protein L30e signature 1. / Ribosomal protein L6e signature. / 50S ribosomal protein L18Ae/60S ribosomal protein L20 and L18a / Ribosomal protein 50S-L18Ae/60S-L20/60S-L18A / Ribosomal proteins 50S-L18Ae/60S-L20/60S-L18A / Ribosomal protein L23/L25, N-terminal / Ribosomal protein L23, N-terminal domain / Ribosomal protein L30e signature 2. / Eukaryotic Ribosomal Protein L27, KOW domain / Ribosomal protein L30e, conserved site / Ribosomal protein L27e / Ribosomal protein L27e superfamily / Ribosomal L27e protein family / Ribosomal protein L36e signature. / Ribosomal protein L39e, conserved site / Ribosomal protein L39e signature. / Ribosomal protein L34Ae / Ribosomal protein L34e
類似検索 - ドメイン・相同性
Large ribosomal subunit protein uL15 / Large ribosomal subunit protein uL23 / Large ribosomal subunit protein eL39 / Large ribosomal subunit protein uL30A / Large ribosomal subunit protein uL6A / Large ribosomal subunit protein uL22A / Large ribosomal subunit protein uL24A / Large ribosomal subunit protein eL33A / Large ribosomal subunit protein eL36A / Large ribosomal subunit protein eL15A ...Large ribosomal subunit protein uL15 / Large ribosomal subunit protein uL23 / Large ribosomal subunit protein eL39 / Large ribosomal subunit protein uL30A / Large ribosomal subunit protein uL6A / Large ribosomal subunit protein uL22A / Large ribosomal subunit protein uL24A / Large ribosomal subunit protein eL33A / Large ribosomal subunit protein eL36A / Large ribosomal subunit protein eL15A / Large ribosomal subunit protein eL22A / Large ribosomal subunit protein uL5A / Large ribosomal subunit protein eL27A / Large ribosomal subunit protein eL31A / Large ribosomal subunit protein eL20A / Large ribosomal subunit protein eL43A / Large ribosomal subunit protein uL14A / Large ribosomal subunit protein uL2A / Pre-hexon-linking protein VIII / Large ribosomal subunit protein eL19A / Large ribosomal subunit protein uL29A / Large ribosomal subunit protein uL4A / Large ribosomal subunit protein eL30 / Large ribosomal subunit protein uL3 / Large ribosomal subunit protein eL8A / Ribosome assembly protein 4 / Large ribosomal subunit protein uL18 / Large ribosomal subunit protein uL13A / Ribosome assembly factor MRT4 / Large ribosomal subunit protein eL14A / Ribosome biogenesis protein RPF2 / Large ribosomal subunit protein eL32 / UPF0642 protein YBL028C / Proteasome-interacting protein CIC1 / Nuclear GTP-binding protein NUG1 / Ribosome biogenesis protein NSA2 / Ribosome biogenesis protein RLP7 / Large ribosomal subunit protein eL37A / Large ribosomal subunit protein eL38 / rRNA-processing protein CGR1 / Pescadillo homolog / Nucleolar GTP-binding protein 2 / Ribosome biogenesis protein 15 / Large ribosomal subunit protein eL34A / Large ribosomal subunit protein eL6A / Large ribosomal subunit protein eL21A / Nucleolar GTP-binding protein 1 / Probable metalloprotease ARX1 / Ribosome biogenesis protein RLP24 / Bud site selection protein 20 / Regulator of ribosome biosynthesis / Ribosome biogenesis protein NOP53 / Eukaryotic translation initiation factor 6 / Large ribosomal subunit protein eL13A
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.08 Å
データ登録者Shan W / Beril K / Kaige Y / Hailey B / Yi XZ / Dan T / Michael G / Yi Y / Zhi FL / Jelena J ...Shan W / Beril K / Kaige Y / Hailey B / Yi XZ / Dan T / Michael G / Yi Y / Zhi FL / Jelena J / Cheng YM / Jian LL / Meng QD / Woolford Jr JL / Ning G
引用ジャーナル: Nature / : 2016
タイトル: Diverse roles of assembly factors revealed by structures of late nuclear pre-60S ribosomes.
著者: Shan Wu / Beril Tutuncuoglu / Kaige Yan / Hailey Brown / Yixiao Zhang / Dan Tan / Michael Gamalinda / Yi Yuan / Zhifei Li / Jelena Jakovljevic / Chengying Ma / Jianlin Lei / Meng-Qiu Dong / ...著者: Shan Wu / Beril Tutuncuoglu / Kaige Yan / Hailey Brown / Yixiao Zhang / Dan Tan / Michael Gamalinda / Yi Yuan / Zhifei Li / Jelena Jakovljevic / Chengying Ma / Jianlin Lei / Meng-Qiu Dong / John L Woolford / Ning Gao /
要旨: Ribosome biogenesis is a highly complex process in eukaryotes, involving temporally and spatially regulated ribosomal protein (r-protein) binding and ribosomal RNA remodelling events in the ...Ribosome biogenesis is a highly complex process in eukaryotes, involving temporally and spatially regulated ribosomal protein (r-protein) binding and ribosomal RNA remodelling events in the nucleolus, nucleoplasm and cytoplasm. Hundreds of assembly factors, organized into sequential functional groups, facilitate and guide the maturation process into productive assembly branches in and across different cellular compartments. However, the precise mechanisms by which these assembly factors function are largely unknown. Here we use cryo-electron microscopy to characterize the structures of yeast nucleoplasmic pre-60S particles affinity-purified using the epitope-tagged assembly factor Nog2. Our data pinpoint the locations and determine the structures of over 20 assembly factors, which are enriched in two areas: an arc region extending from the central protuberance to the polypeptide tunnel exit, and the domain including the internal transcribed spacer 2 (ITS2) that separates 5.8S and 25S ribosomal RNAs. In particular, two regulatory GTPases, Nog2 and Nog1, act as hub proteins to interact with multiple, distant assembly factors and functional ribosomal RNA elements, manifesting their critical roles in structural remodelling checkpoints and nuclear export. Moreover, our snapshots of compositionally and structurally different pre-60S intermediates provide essential mechanistic details for three major remodelling events before nuclear export: rotation of the 5S ribonucleoprotein, construction of the active centre and ITS2 removal. The rich structural information in our structures provides a framework to dissect molecular roles of diverse assembly factors in eukaryotic ribosome assembly.
履歴
登録2016年2月29日-
ヘッダ(付随情報) 公開2016年4月27日-
マップ公開2016年6月1日-
更新2016年6月15日-
現状2016年6月15日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 0.029
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図(高さに従い着色)
  • 表面レベル: 0.029
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-3jct
  • 表面レベル: 0.029
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_6615.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 122.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Reconstruction of pre-60S ribosomal subunit
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.32 Å/pix.
x 320 pix.
= 422.4 Å
1.32 Å/pix.
x 320 pix.
= 422.4 Å
1.32 Å/pix.
x 320 pix.
= 422.4 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.32 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.029 / ムービー #1: 0.029
最小 - 最大-0.17736803 - 0.27170941
平均 (標準偏差)-0.00018456 (±0.01024579)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 422.40002 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.321.321.32
M x/y/z320320320
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z422.400422.400422.400
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS320320320
D min/max/mean-0.1770.272-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : state1 of pre-60S ribosome subunit

全体名称: state1 of pre-60S ribosome subunit
要素
  • 試料: state1 of pre-60S ribosome subunit
  • 複合体: pre-60S ribosome

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超分子 #1000: state1 of pre-60S ribosome subunit

超分子名称: state1 of pre-60S ribosome subunit / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1

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超分子 #1: pre-60S ribosome

超分子名称: pre-60S ribosome / タイプ: complex / ID: 1 / 組換発現: Yes / Ribosome-details: ribosome-eukaryote: LSU 60S
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
組換発現生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

凍結凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法 #1

Microscopy ID1
顕微鏡FEI TITAN KRIOS
日付2015年11月7日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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電子顕微鏡法 #2

Microscopy ID2
顕微鏡FEI TITAN KRIOS
日付2015年11月22日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.08 Å / 解像度の算出法: OTHER / 使用した粒子像数: 191848
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
得られたモデル

PDB-3jct:
Cryo-em structure of eukaryotic pre-60S ribosomal subunits

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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