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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6594 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM of human Ndc80-broccoli bound to microtubules | |||||||||
![]() | 3D reconstruction of the human Ndc80 broccoli complex bound to microtubules | |||||||||
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![]() | Kinetochore protein complex | |||||||||
生物種 | unidentified (未定義) / ![]() | |||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.2 Å | |||||||||
![]() | Wilson-Kubalek EM / Cheeseman IM / Milligan RA | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural comparison of the Caenorhabditis elegans and human Ndc80 complexes bound to microtubules reveals distinct binding behavior. 著者: Elizabeth M Wilson-Kubalek / Iain M Cheeseman / Ronald A Milligan / ![]() 要旨: During cell division, kinetochores must remain tethered to the plus ends of dynamic microtubule polymers. However, the molecular basis for robust kinetochore-microtubule interactions remains poorly ...During cell division, kinetochores must remain tethered to the plus ends of dynamic microtubule polymers. However, the molecular basis for robust kinetochore-microtubule interactions remains poorly understood. The conserved four-subunit Ndc80 complex plays an essential and direct role in generating dynamic kinetochore-microtubule attachments. Here we compare the binding of theCaenorhabditis elegansand human Ndc80 complexes to microtubules at high resolution using cryo-electron microscopy reconstructions. Despite the conserved roles of the Ndc80 complex in diverse organisms, we find that the attachment mode of these complexes for microtubules is distinct. The human Ndc80 complex binds every tubulin monomer along the microtubule protofilament, whereas theC. elegansNdc80 complex binds more tightly to β-tubulin. In addition, theC. elegansNdc80 complex tilts more toward the adjacent protofilament. These structural differences in the Ndc80 complex between different species may play significant roles in the nature of kinetochore-microtubule interactions. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 25 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 9.5 KB 9.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() ![]() | 146.8 KB 9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 78.7 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 77.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | 3D reconstruction of the human Ndc80 broccoli complex bound to microtubules | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.3 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : human Ndc80 Broccoli complex bound to microtubules
全体 | 名称: human Ndc80 Broccoli complex bound to microtubules |
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要素 |
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-超分子 #1000: human Ndc80 Broccoli complex bound to microtubules
超分子 | 名称: human Ndc80 Broccoli complex bound to microtubules / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: helical / Number unique components: 2 |
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-超分子 #1: microtubule
超分子 | 名称: microtubule / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: unidentified (未定義) |
-分子 #1: Ndc80
分子 | 名称: Ndc80 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 集合状態: helical / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | helical array |
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試料調製
緩衝液 | pH: 6.8 / 詳細: 80 mM PIPES, pH 6.8, 1 mM MgCl2, 1 mM EGTA |
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グリッド | 詳細: 400-mesh C-flat grids (Protochips, Inc) containing 2.0 micron holes separated by 2.0 micron spacing |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 120 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 手法: Blotted back of grid for 3 seconds. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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日付 | 2013年10月7日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 1.3 µm / 実像数: 838 / 平均電子線量: 40 e/Å2 / 詳細: Each image is an average of 30 frames. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
詳細 | EMAN2 and FREALIGN IHRSR adapted for microtubules with a dimer repeat were used. |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 11.2 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: 23.817 ° 想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C15 (15回回転対称) 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.2 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: EMAN2, FREALIGN, IHRSR 詳細: The final map was calculated from two averaged data sets. |
CTF補正 | 詳細: CTFIND v3 |