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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6101 | |||||||||
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| タイトル | CryoEM reveals different coronin binding modes for ADP- and ADP-BeFx- actin filaments | |||||||||
マップデータ | Actin-coronin complex in ADP-BeFx state | |||||||||
試料 |
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キーワード | actin / coronin | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報actin filament debranching / positive regulation of Arp2/3 complex-mediated actin nucleation / actin cortical patch localization / Arp2/3 complex binding / actin cortical patch / negative regulation of Arp2/3 complex-mediated actin nucleation / cytoskeletal motor activator activity / myosin heavy chain binding / tropomyosin binding / actin filament bundle ...actin filament debranching / positive regulation of Arp2/3 complex-mediated actin nucleation / actin cortical patch localization / Arp2/3 complex binding / actin cortical patch / negative regulation of Arp2/3 complex-mediated actin nucleation / cytoskeletal motor activator activity / myosin heavy chain binding / tropomyosin binding / actin filament bundle / troponin I binding / filamentous actin / mesenchyme migration / skeletal muscle myofibril / actin filament bundle assembly / striated muscle thin filament / skeletal muscle thin filament assembly / actin monomer binding / microtubule-based process / skeletal muscle fiber development / stress fiber / titin binding / actin filament polymerization / actin filament organization / filopodium / actin filament / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / calcium-dependent protein binding / actin filament binding / lamellipodium / cell body / microtubule binding / protein-macromolecule adaptor activity / protein domain specific binding / hydrolase activity / calcium ion binding / positive regulation of gene expression / magnesium ion binding / ATP binding / identical protein binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
| 手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Ge P / Durer ZAO / Kudryashov D / Zhou ZH / Reisler E | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2014タイトル: Cryo-EM reveals different coronin binding modes for ADP- and ADP-BeFx actin filaments. 著者: Peng Ge / Zeynep A Oztug Durer / Dmitri Kudryashov / Z Hong Zhou / Emil Reisler / ![]() 要旨: Essential cellular processes involving the actin cytoskeleton are regulated by auxiliary proteins that can sense the nucleotide state of actin. Here we report cryo-EM structures for ADP-bound and ADP- ...Essential cellular processes involving the actin cytoskeleton are regulated by auxiliary proteins that can sense the nucleotide state of actin. Here we report cryo-EM structures for ADP-bound and ADP-beryllium fluoride (ADP-BeFx, an ADP-Pi mimic)-bound actin filaments in complex with the β-propeller domain of yeast coronin 1 (crn1), at 8.6-Å resolution. Our structures reveal the main differences in the interaction of coronin with the two nucleotide states of F-actin. We derived pseudoatomic models by fitting the atomic structures of actin and coronin into the EM envelopes and confirmed the identified interfaces on actin by chemical cross-linking, fluorescence spectroscopy and actin mutagenesis. The models offer a structural explanation for the nucleotide-dependent effects of coronin on cofilin-assisted remodeling of F-actin. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_6101.map.gz | 118.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-6101-v30.xml emd-6101.xml | 10.7 KB 10.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | 400_6101.gif 80_6101.gif | 33.7 KB 2.6 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6101 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6101 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6101.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 122.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | Actin-coronin complex in ADP-BeFx state | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.437 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Actin-Coronin complex in ADP-BeFx state
| 全体 | 名称: Actin-Coronin complex in ADP-BeFx state |
|---|---|
| 要素 |
|
-超分子 #1000: Actin-Coronin complex in ADP-BeFx state
| 超分子 | 名称: Actin-Coronin complex in ADP-BeFx state / タイプ: sample / ID: 1000 集合状態: helix; one coronin subunit per one actin subunit Number unique components: 2 |
|---|
-分子 #1: actin
| 分子 | 名称: actin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 集合状態: helix / 組換発現: No / データベース: NCBI |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 分子量 | 理論値: 42 KDa |
| 配列 | UniProtKB: Actin, alpha skeletal muscle |
-分子 #2: Coronin 1
| 分子 | 名称: Coronin 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: crn1 / 集合状態: helix / 組換発現: Yes |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 分子量 | 理論値: 72 KDa |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
| 配列 | UniProtKB: Coronin-like protein |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | らせん対称体再構成法 |
| 試料の集合状態 | helical array |
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試料調製
| 緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 10 mM Tris, 0.2 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 50 mM KCl, 0.1 mM BeCl2, 5 mM NaF, 1 mM DTT |
|---|---|
| グリッド | 詳細: 300 Me Quantifoil R1.2/1.3 |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 77 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV 手法: blot force 1, blot time 4s, blot once, wait time 2s, drain time 2s; sample volume applied to each grid was 2.5 uL |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 温度 | 平均: 77 K |
| アライメント法 | Legacy - 非点収差: Relion software correction |
| 日付 | 2012年12月12日 |
| 撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 15 µm / 実像数: 1200 / 平均電子線量: 25 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16 |
| 電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 倍率(補正後): 104384 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 59000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
| 詳細 | Relion-based IHRSR |
|---|---|
| 最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 28.23 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: 166.3 ° 想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称) アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 8.6 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Relion, IHRSR |
| CTF補正 | 詳細: Each particle |
ムービー
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キーワード

データ登録者
引用
UCSF Chimera








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