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- EMDB-60396: HBcAg-D4 Fab complex -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-60396
タイトルHBcAg-D4 Fab complex
マップデータ
試料
  • 複合体: Asymmetric unit of the complex between HBV capsid and D4 Fab
    • タンパク質・ペプチド: Heavy chains of D4 Fab
    • タンパク質・ペプチド: Light chains of D4 Fab
    • タンパク質・ペプチド: Capsid protein
キーワードASU / D4 Antibody / HBcAg VLP / VIRUS LIKE PARTICLE / VIRAL PROTEIN-IMMUNE SYSTEM complex
機能・相同性
機能・相同性情報


microtubule-dependent intracellular transport of viral material towards nucleus / T=4 icosahedral viral capsid / viral penetration into host nucleus / host cell / host cell cytoplasm / symbiont entry into host cell / structural molecule activity / DNA binding / RNA binding
類似検索 - 分子機能
Hepatitis core antigen / Viral capsid core domain supefamily, Hepatitis B virus / Hepatitis core antigen
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種Homo sapiens (ヒト) / hepatitis B virus genotype C (ウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å
データ登録者Zhang Z / Ju B / Liu C / Yan H
資金援助 中国, 1件
OrganizationGrant number
National Natural Science Foundation of China (NSFC)82025022 中国
引用ジャーナル: J Virol / : 2025
タイトル: The characterization and structural basis of a human broadly binding antibody to HBV core protein.
著者: Hu Yan / Congcong Liu / Yuxiao Li / Shilong Tang / Huimin Guo / Bing Zhou / Qing Fan / Haiyan Wang / Xiangyang Ge / Xin Wang / Xuejiao Liao / Jin Li / Zheng Zhang / Bin Ju /
要旨: Hepatitis B virus (HBV) core protein (HBc) plays a crucial role in the virus life cycle, making it an important detection marker for HBV infection and a potential target for treatment. However, ...Hepatitis B virus (HBV) core protein (HBc) plays a crucial role in the virus life cycle, making it an important detection marker for HBV infection and a potential target for treatment. However, several commercially available monoclonal antibodies (mAbs) or polyclonal antibodies (pAbs) targeting HBc have certain limitations in detecting HBV across different genotypes in various biochemical assays, such as enzyme-linked immunosorbent assay, western blot, immunofluorescence assay, flow cytometry, and immune spot assay. In this study, we identified 12 human anti-HBc mAbs and evaluated their potential application in multiple biochemical assays. These mAbs mainly recognized the epitopes near residues 20-22 amino acids (a.a.) and 77-78 a.a. of HBc, demonstrating a broadly cross-genotypic activity. Notably, three Group II mAbs, named cAbA1, cAbD4, and cAbF9, displayed excellent capacities for the detection of HBV infection in all tested biochemical assays. Furthermore, we determined a 3.22 Å of cryo-electron microscopy (cryo-EM) structure of the fragment of antigen binding (Fab) of cAbD4 complexed with HBc dimer, which was the highest resolution of the structural model for Fab-HBc to date. Collectively, our findings provided excellent and reliable antibody candidates for live HBV detection and revealed the recognition mechanism and the detailed interaction information of a potent human anti-HBc mAb binding to the spike tips of HBc dimer.IMPORTANCEThe lack of excellent detection Abs for live hepatitis B virus (HBV) infection and high-resolution structures of the Ab-HBV core protein (HBc) complex largely limited the development of HBV-related research. This study reports a panel of anti-HBc monoclonal antibodies (mAbs) with excellent capacities for detecting HBV infection in multiple biochemical assays and determines a 3.22 Å of cryo-EM structure of HBc with a potent binding mAb. These findings provide excellent and reliable detecting tools for HBV-related research and promote the understanding of the recognition mechanism of anti-HBc mAbs to HBc particles.
履歴
登録2024年6月4日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年11月13日-
マップ公開2024年11月13日-
更新2025年2月19日-
現状2025年2月19日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_60396.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.07 Å/pix.
x 200 pix.
= 214.8 Å
1.07 Å/pix.
x 200 pix.
= 214.8 Å
1.07 Å/pix.
x 200 pix.
= 214.8 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.074 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.0915
最小 - 最大-0.0019311165 - 2.1320615
平均 (標準偏差)0.0038963642 (±0.043640103)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 214.8 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_60396_msk_1.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_60396_half_map_1.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_60396_half_map_2.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : Asymmetric unit of the complex between HBV capsid and D4 Fab

全体名称: Asymmetric unit of the complex between HBV capsid and D4 Fab
要素
  • 複合体: Asymmetric unit of the complex between HBV capsid and D4 Fab
    • タンパク質・ペプチド: Heavy chains of D4 Fab
    • タンパク質・ペプチド: Light chains of D4 Fab
    • タンパク質・ペプチド: Capsid protein

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超分子 #1: Asymmetric unit of the complex between HBV capsid and D4 Fab

超分子名称: Asymmetric unit of the complex between HBV capsid and D4 Fab
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #2-#3, #1
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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分子 #1: Capsid protein

分子名称: Capsid protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: hepatitis B virus genotype C (ウイルス)
分子量理論値: 16.097427 KDa
組換発現生物種: Escherichia phage EcSzw-2 (ファージ)
配列文字列:
MDIDPYKEFG ASVELLSFLP SDFFPSIRDL LDTASALYRE ALESPEHCSP HHTALRQAIL CWGELMNLAT WVGSNLEDPA SRELVVSYV NVNMGLKIRQ LLWFHISCLT FGRETVLEYL VSFGVWIRTP PAYRPPNAPI LST

UniProtKB: Capsid protein

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分子 #2: Heavy chains of D4 Fab

分子名称: Heavy chains of D4 Fab / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 13.342837 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFNFN KFGMHWVRQV PGKGLEWLTY IWYDGSNADY VDSVKGRFTI SRDNSINTLY LQMNSLRAD DTAVYFCARG FYDSSSLESW GQGALVIVSS AS

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分子 #3: Light chains of D4 Fab

分子名称: Light chains of D4 Fab / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 12.504955 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
DIVMTQSPLS LAVTPGEPAS ISCRSSQTLL HNNGYNYFSW YLQKPGQAPQ LLIYLGSNRA PGVSDRFSGS GSGTSFTLEI SRVEAEDVG VYYCMQGRHT PWTFGQGTKV EIKRT

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度3 mg/mL
緩衝液pH: 7.4
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 75 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
温度最低: 70.0 K / 最高: 70.0 K
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k)
デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4137 / 平均露光時間: 4.0 sec. / 平均電子線量: 60.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 1.2 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 817068
初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4) / 使用した粒子像数: 193181
初期 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4) / ソフトウェア - 詳細: non-uniform refine
最終 3次元分類クラス数: 6 / 平均メンバー数/クラス: 193181 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1.2)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデル
PDB IDChain

chain_id: A, source_name: PDB, initial_model_type: experimental model
chain_id: H, source_name: AlphaFold, initial_model_type: in silico model
chain_id: L, source_name: AlphaFold, initial_model_type: in silico model
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT
当てはまり具合の基準: cross-correlation coefficient
得られたモデル

PDB-8zrh:
HBcAg-D4 Fab complex

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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