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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5739 | |||||||||
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| タイトル | Electron microscopy map of the T6SS TssK component | |||||||||
マップデータ | EM Reconstruction of TssK | |||||||||
試料 |
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キーワード | TssK / Type VI secretion / Hcp / sheath assembly / EM / single-particle / three-fold | |||||||||
| 機能・相同性 | cellular_component / biological_process / molecular_function / Bacterial Type VI secretion, VC_A0110, EvfL, ImpJ, VasE / Type VI secretion system TssK / Type VI secretion system TssK / Type VI secretion system protein TssK 機能・相同性情報 | |||||||||
| 生物種 | ![]() | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 26.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Zoued A / Durand E / Bebeacua C / Brunet YR / Douzi B / Cambillau C / Cascales E / Journet L | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2013タイトル: TssK is a trimeric cytoplasmic protein interacting with components of both phage-like and membrane anchoring complexes of the type VI secretion system. 著者: Abdelrahim Zoued / Eric Durand / Cecilia Bebeacua / Yannick R Brunet / Badreddine Douzi / Christian Cambillau / Eric Cascales / Laure Journet / ![]() 要旨: The Type VI secretion system (T6SS) is a macromolecular machine that mediates bacteria-host or bacteria-bacteria interactions. The T6SS core apparatus assembles from 13 proteins that form two sub- ...The Type VI secretion system (T6SS) is a macromolecular machine that mediates bacteria-host or bacteria-bacteria interactions. The T6SS core apparatus assembles from 13 proteins that form two sub-assemblies: a phage-like complex and a trans-envelope complex. The Hcp, VgrG, TssE, and TssB/C subunits are structurally and functionally related to components of the tail of contractile bacteriophages. This phage-like structure is thought to be anchored to the membrane by a trans-envelope complex composed of the TssJ, TssL, and TssM proteins. However, how the two sub-complexes are connected remains unknown. Here we identify TssK, a protein that establishes contacts with the two T6SS sub-complexes through direct interactions with TssL, Hcp, and TssC. TssK is a cytoplasmic protein assembling trimers that display a three-armed shape, as revealed by TEM and SAXS analyses. Fluorescence microscopy experiments further demonstrate the requirement of TssK for sheath assembly. Our results suggest a central role for TssK by linking both complexes during T6SS assembly. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
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| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_5739.map.gz | 944 KB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-5739-v30.xml emd-5739.xml | 10.4 KB 10.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_5739.png | 42.8 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5739 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5739 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_5739_validation.pdf.gz | 78.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_5739_full_validation.pdf.gz | 77.8 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_5739_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5739 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5739 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5739.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | EM Reconstruction of TssK | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.5 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Purified TssK sample
| 全体 | 名称: Purified TssK sample |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1000: Purified TssK sample
| 超分子 | 名称: Purified TssK sample / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: The sample was monodisperse. / 集合状態: 3 / Number unique components: 1 |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: 160 KDa / 手法: Analytical size exclusion chromatography analysis |
-分子 #1: Type VI secretion system protein TssK
| 分子 | 名称: Type VI secretion system protein TssK / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: TssK / コピー数: 1 / 集合状態: Trimer / 組換発現: Yes |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 分子量 | 実験値: 160 KDa |
| 組換発現 | 生物種: ![]() |
| 配列 | UniProtKB: Type VI secretion system protein TssK GO: biological_process, molecular_function, cellular_component InterPro: Type VI secretion system TssK |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | ネガティブ染色法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 濃度 | 0.05 mg/mL |
|---|---|
| 緩衝液 | pH: 8 詳細: HBS-EP buffer (10mM HEPES, 150mM NaCl, 3mM EDTA, 0.005% Polysorbate 20) |
| 染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Purified protein was immobilized on a glow- discharged carbon grid by incubation for 1 minute, and then stained with 2% uranyl acetate for 10 seconds. |
| グリッド | 詳細: 300 mesh copper grid with thin carbon support, glow discharged for 20 seconds |
| 凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TECNAI SPIRIT |
|---|---|
| 日付 | 2012年11月1日 |
| 撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GENERIC CCD / 実像数: 10 / 平均電子線量: 10 e/Å2 / 詳細: CCD images |
| 電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: LAB6 |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 60000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダー: Room temperature holder / 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC |
| 実験機器 | ![]() モデル: Tecnai Spirit / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
| 詳細 | The particles were submitted to maximum likelihood classification and alignment. |
|---|---|
| 最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 26.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: EMAN, SPIDER, XMIPP / 使用した粒子像数: 5000 |
| 最終 角度割当 | 詳細: ML |
| 最終 2次元分類 | クラス数: 500 |
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UCSF Chimera







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