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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5630 | |||||||||
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タイトル | Cryo-electron tomography of in situ flagellar motor of Borrelia burgdorferi FlgC mutant | |||||||||
マップデータ | Flagellar motor of a FlgC mutant in B. burdorferi | |||||||||
試料 |
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キーワード | Flagellar motor / assembly / Type III secretion / Lyme disease spirochete / molecular machine | |||||||||
生物種 | Borrelia burgdorferi (バクテリア) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 38.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhao X / Zhang K / Boquoi T / Hu B / Motaleb MA / Miller KA / James ME / Charon NW / Manson MD / Norris SJ ...Zhao X / Zhang K / Boquoi T / Hu B / Motaleb MA / Miller KA / James ME / Charon NW / Manson MD / Norris SJ / Li C / Liu J | |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2013 タイトル: Cryoelectron tomography reveals the sequential assembly of bacterial flagella in Borrelia burgdorferi. 著者: Xiaowei Zhao / Kai Zhang / Tristan Boquoi / Bo Hu / M A Motaleb / Kelly A Miller / Milinda E James / Nyles W Charon / Michael D Manson / Steven J Norris / Chunhao Li / Jun Liu / 要旨: Periplasmic flagella are essential for the distinctive morphology, motility, and infectious life cycle of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi. In this study, we genetically trapped ...Periplasmic flagella are essential for the distinctive morphology, motility, and infectious life cycle of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi. In this study, we genetically trapped intermediates in flagellar assembly and determined the 3D structures of the intermediates to 4-nm resolution by cryoelectron tomography. We provide structural evidence that secretion of rod substrates triggers remodeling of the central channel in the flagellar secretion apparatus from a closed to an open conformation. This open channel then serves as both a gateway and a template for flagellar rod assembly. The individual proteins assemble sequentially to form a modular rod. The hook cap initiates hook assembly on completion of the rod, and the filament cap facilitates filament assembly after formation of the mature hook. Cryoelectron tomography and mutational analysis thus combine synergistically to provide a unique structural blueprint of the assembly process of this intricate molecular machine in intact cells. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5630.map.gz | 20.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5630-v30.xml emd-5630.xml | 10.9 KB 10.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5630.png | 225.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5630 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5630 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5630_validation.pdf.gz | 79.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5630_full_validation.pdf.gz | 78.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5630_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5630 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5630 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5630.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 62.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Flagellar motor of a FlgC mutant in B. burdorferi | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 5.7 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgC mutant cells
全体 | 名称: In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgC mutant cells |
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要素 |
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-超分子 #1000: In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgC mutant cells
超分子 | 名称: In situ flagellar motor from B. burgdorferi FlgC mutant cells タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 20 |
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-超分子 #1: flagellar motor
超分子 | 名称: flagellar motor / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Borrelia burgdorferi (バクテリア) / 株: B31 / 別称: Lyme disease spirochete |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | 詳細: BSK-II liquid medium supplemented with 6% rabbit serum |
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グリッド | 詳細: freshly glow-discharged holey carbon grids |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: HOMEMADE PLUNGER 手法: Bacterial culture was deposited onto freshly glow-discharged, holey carbon grids for 1 min. Grids were blotted with filter paper and then rapidly frozen in liquid ethane, using a homemade ...手法: Bacterial culture was deposited onto freshly glow-discharged, holey carbon grids for 1 min. Grids were blotted with filter paper and then rapidly frozen in liquid ethane, using a homemade gravity-driven plunger apparatus. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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温度 | 最低: 170 K |
日付 | 2012年5月1日 |
撮影 | 実像数: 21315 / 平均電子線量: 100 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 8.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 倍率(公称値): 31000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: OTHER / Tilt series - Axis1 - Min angle: -65 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 65 ° |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | The subvolumes of the flagellar motors were extracted computationally from the tomograms and were further aligned in 3D. |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 38.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: IMOD, Raptor, Protomo / 使用したサブトモグラム数: 999 |
最終 3次元分類 | クラス数: 4 |