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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5596 | |||||||||
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タイトル | Structure of the immature 30S subunit from a Escherichia coli rimM null strain. Conformation 2. | |||||||||
マップデータ | Structure of the immature 30S subunit from a Escherichia coli rimM null strain. Conformation 2. | |||||||||
試料 |
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キーワード | Ribosome assembly / 30S subunit / RimM protein | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 17.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Leong V / Kent M / Jomaa A / Ortega J | |||||||||
引用 | ジャーナル: RNA / 年: 2013 タイトル: Escherichia coli rimM and yjeQ null strains accumulate immature 30S subunits of similar structure and protein complement. 著者: Vivian Leong / Meredith Kent / Ahmad Jomaa / Joaquin Ortega / 要旨: Assembly of the Escherichia coli 30S ribosomal subunits proceeds through multiple parallel pathways. The protein factors RimM, YjeQ, RbfA, and Era work in conjunction to assist at the late stages of ...Assembly of the Escherichia coli 30S ribosomal subunits proceeds through multiple parallel pathways. The protein factors RimM, YjeQ, RbfA, and Era work in conjunction to assist at the late stages of the maturation process of the small subunit. However, it is unclear how the functional interplay between these factors occurs in the context of multiple parallel pathways. To understand how these factors work together, we have characterized the immature 30S subunits that accumulate in ΔrimM cells and compared them with immature 30S subunits from a ΔyjeQ strain. The cryo-EM maps obtained from these particles showed that the densities representing helices 44 and 45 in the rRNA were partially missing, suggesting mobility of these motifs. These 30S subunits were also partially depleted in all tertiary ribosomal proteins, particularly those binding in the head domain. Using image classification, we identified four subpopulations of ΔrimM immature 30S subunits differing in the amount of missing density for helices 44 and 45, as well as the amount of density existing in these maps for the underrepresented proteins. The structural defects found in these immature subunits resembled those of the 30S subunits that accumulate in the ΔyjeQ strain. These findings are consistent with an "early convergency model" in which multiple parallel assembly pathways of the 30S subunit converge into a late assembly intermediate, as opposed to the mature state. Functionally related factors will bind to this intermediate to catalyze the last steps of maturation leading to the mature 30S subunit. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5596.map.gz | 7.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5596-v30.xml emd-5596.xml | 10.3 KB 10.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5596.tif | 757.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5596 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5596 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5596_validation.pdf.gz | 78.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5596_full_validation.pdf.gz | 77.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5596_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5596 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5596 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5596.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 7.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Structure of the immature 30S subunit from a Escherichia coli rimM null strain. Conformation 2. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.54 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Structure of an immature 30S subunit from an E. coli rimM null st...
全体 | 名称: Structure of an immature 30S subunit from an E. coli rimM null strain. Conformation 2 |
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要素 |
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-超分子 #1000: Structure of an immature 30S subunit from an E. coli rimM null st...
超分子 | 名称: Structure of an immature 30S subunit from an E. coli rimM null strain. Conformation 2 タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: monomer / Number unique components: 1 |
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分子量 | 実験値: 930 KDa / 理論値: 930 KDa |
-超分子 #1: ribosome 30S subunit
超分子 | 名称: ribosome 30S subunit / タイプ: complex / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: SSU 30S, PSR16s |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: BW25113 / 細胞中の位置: cytoplasm |
分子量 | 実験値: 930 KDa / 理論値: 930 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 10 mM Mg acetate, 60 mM NH4Cl and 3 mM 2-mercaptoethanol |
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グリッド | 詳細: 400 mesh cupped grid with thin carbon support, glow discharged in air |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 77 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III / 手法: Blot twice for 7 seconds each. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 2010F |
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温度 | 平均: 97 K |
日付 | 2011年7月10日 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM デジタル化 - スキャナー: NIKON SUPER COOLSCAN 9000 デジタル化 - サンプリング間隔: 6.35 µm / 実像数: 250 / 平均電子線量: 15 e/Å2 / ビット/ピクセル: 8 |
Tilt angle min | 0 |
Tilt angle max | 0 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 1 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Liquid nitrogen cooled / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
詳細 | Reconstruction obtained with Xmipp |
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CTF補正 | 詳細: CTFFIND |
最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 17.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Xmipp / 使用した粒子像数: 23275 |