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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5374 | |||||||||
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タイトル | Structural basis for broad detection of genogroup II noroviruses by a monoclonal antibody that binds to a site occluded in the viral particle | |||||||||
マップデータ | Surface rendering of GII.10 norovirus VLP | |||||||||
試料 |
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キーワード | norovirus | |||||||||
生物種 | Norovirus genogroup GII.10 (ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Hansman GS / Taylor DW / McLellan JS / Smith TJ / Georgiev I / Tame JRH / Park SY / Yamazaki M / Gondaira F / Miki M ...Hansman GS / Taylor DW / McLellan JS / Smith TJ / Georgiev I / Tame JRH / Park SY / Yamazaki M / Gondaira F / Miki M / Katayama K / Murata K / Kwong PD | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Virol / 年: 2012 タイトル: Structural basis for broad detection of genogroup II noroviruses by a monoclonal antibody that binds to a site occluded in the viral particle. 著者: Grant S Hansman / David W Taylor / Jason S McLellan / Thomas J Smith / Ivelin Georgiev / Jeremy R H Tame / Sam-Yong Park / Makoto Yamazaki / Fumio Gondaira / Motohiro Miki / Kazuhiko Katayama ...著者: Grant S Hansman / David W Taylor / Jason S McLellan / Thomas J Smith / Ivelin Georgiev / Jeremy R H Tame / Sam-Yong Park / Makoto Yamazaki / Fumio Gondaira / Motohiro Miki / Kazuhiko Katayama / Kazuyoshi Murata / Peter D Kwong / 要旨: Human noroviruses are genetically and antigenically highly divergent. Monoclonal antibodies raised in mice against one kind of norovirus virus-like particle (VLP), however, were found to have broad ...Human noroviruses are genetically and antigenically highly divergent. Monoclonal antibodies raised in mice against one kind of norovirus virus-like particle (VLP), however, were found to have broad recognition. In this study, we present the crystal structure of the antigen-binding fragment (Fab) for one of these broadly reactive monoclonal antibodies, 5B18, in complex with the capsid-protruding domain from a genogroup II genotype 10 (GII.10) norovirus at 3.3-Å resolution and, also, the cryo-electron microscopy structure of the GII.10 VLP at ∼10-Å resolution. The GII.10 VLP structure was more similar in overall architecture to the GV.1 murine norovirus virion than to the prototype GI.1 human norovirus VLP, with the GII.10 protruding domain raised ∼15 Å off the shell domain and rotated ∼40° relative to the GI.1 protruding domain. In the crystal structure, the 5B18 Fab bound to a highly conserved region of the protruding domain. Based on the VLP structure, this region is involved in interactions with other regions of the capsid and is buried in the virus particle. Despite the occluded nature of the recognized epitope in the VLP structure, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) binding suggested that the 5B18 antibody was able to capture intact VLPs. Together, the results provide evidence that the norovirus particle is capable of extreme conformational flexibility, which may allow for antibody recognition of conserved surfaces that would otherwise be buried on intact particles. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5374.map.gz | 54.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5374-v30.xml emd-5374.xml | 10 KB 10 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5374.png | 1.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5374 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5374 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5374_validation.pdf.gz | 78.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5374_full_validation.pdf.gz | 78 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5374_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5374 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5374 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5374.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 58.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Surface rendering of GII.10 norovirus VLP | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.4 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : GII.10 norovirus VLP
全体 | 名称: GII.10 norovirus VLP |
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要素 |
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-超分子 #1000: GII.10 norovirus VLP
超分子 | 名称: GII.10 norovirus VLP / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: icosahedral (T3) / Number unique components: 1 |
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分子量 | 実験値: 10 MDa / 理論値: 10 MDa |
-超分子 #1: Norovirus genogroup GII.10
超分子 | 名称: Norovirus genogroup GII.10 / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: GII.10 Vietnam 026 VLP / NCBI-ID: 747305 / 生物種: Norovirus genogroup GII.10 / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes / Syn species name: GII.10 Vietnam 026 VLP |
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宿主 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: VERTEBRATES |
分子量 | 実験値: 10 MDa / 理論値: 10 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / T番号(三角分割数): 3 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.0 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.3 / 詳細: PBS |
グリッド | 詳細: Quantifoil R1.2/1.3 Mo 200 mesh |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV 詳細: Vitrification instrument: FEI Vitrobot Mark IV. Quantifoil Mo 200 mesh holey carbon grid with a thin layer of carbon over the holes 手法: automatic blotting for 8 seconds |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 2200FS |
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日付 | 2011年7月22日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GENERIC TVIPS (4k x 4k) 平均電子線量: 20 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 40000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Gatan / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
詳細 | The particles were selected semi-automatically using the swarm program in EMAN2. |
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CTF補正 | 詳細: Each image |
最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN2 / 使用した粒子像数: 8000 |