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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | yeast TFIIIC TauB subcomplex bound to a tRNA gene | |||||||||
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![]() | Base-specific contacts / B-box / tRNA gene / DNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() 5S class rRNA transcription by RNA polymerase III / transcription factor TFIIIC complex / RNA polymerase III general transcription initiation factor activity / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / transcription by RNA polymerase III / protein localization to chromatin / mitochondrion / DNA binding / nucleoplasm / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.46 Å | |||||||||
![]() | Seifert-Davila W / Girbig M / Hauptmann L / Hoffmann T / Eustermann S / Mueller C / Chaban A / Duss O / Baudin F | |||||||||
資金援助 | 1件
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![]() | ![]() タイトル: Structural and kinetic insights into tRNA promoter engagement by yeast general transcription factor TFIIIC. 著者: Wolfram Seifert-Dávila / Anastasiia Chaban / Florence Baudin / Mathias Girbig / Luis Hauptmann / Thomas Hoffmann / Olivier Duss / Sebastian Eustermann / Christoph W Müller / ![]() 要旨: Transcription of transfer RNA (tRNA) genes by RNA polymerase (Pol) III requires the general transcription factor IIIC (TFIIIC), which recognizes intragenic A-box and B-box DNA motifs of type II ...Transcription of transfer RNA (tRNA) genes by RNA polymerase (Pol) III requires the general transcription factor IIIC (TFIIIC), which recognizes intragenic A-box and B-box DNA motifs of type II gene promoters. However, the underlying mechanism has remained elusive, in part due to missing structural information for A-box recognition. In this study, we use single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM) and single-molecule fluorescence resonance energy transfer (smFRET) to reveal structural and real-time kinetic insights into how the 520-kDa yeast TFIIIC complex engages A-box and B-box DNA motifs in the context of a tRNA gene promoter. Cryo-EM structures of τA and τB subcomplexes bound to the A-box and B-box were obtained at 3.7 and 2.5 Å resolution, respectively, while cryo-EM single-particle mapping determined the specific distance and relative orientation of the τA and τB subcomplexes revealing a fully engaged state of TFIIIC. smFRET experiments show that overall recruitment and residence times of TFIIIC on a tRNA gene are primarily governed by B-box recognition, while footprinting experiments suggest a key role of τA and the A-box in TFIIIB and Pol III recruitment following TFIIIC recognition of type II promoters. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 116 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 19.7 KB 19.7 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 101.7 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 7.7 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 98.2 MB 98.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9gc3MC ![]() 9gckC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.822 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_51228_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_51228_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Yeast TFIIIC TauB monomer bound to a tRNA gene
全体 | 名称: Yeast TFIIIC TauB monomer bound to a tRNA gene |
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要素 |
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-超分子 #1: Yeast TFIIIC TauB monomer bound to a tRNA gene
超分子 | 名称: Yeast TFIIIC TauB monomer bound to a tRNA gene / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #1: Transcription factor tau 138 kDa subunit
分子 | 名称: Transcription factor tau 138 kDa subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 136.6025 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MVLTIYPDEL VQIVSDKIAS NKGKITLNQL WDISGKYFDL SDKKVKQFVL SCVILKKDIE VYCDGAITTK NVTDIIGDAN HSYSVGITE DSLWTLLTGY TKKESTIGNS AFELLLEVAK SGEKGINTMD LAQVTGQDPR SVTGRIKKIN HLLTSSQLIY K GHVVKQLK ...文字列: MVLTIYPDEL VQIVSDKIAS NKGKITLNQL WDISGKYFDL SDKKVKQFVL SCVILKKDIE VYCDGAITTK NVTDIIGDAN HSYSVGITE DSLWTLLTGY TKKESTIGNS AFELLLEVAK SGEKGINTMD LAQVTGQDPR SVTGRIKKIN HLLTSSQLIY K GHVVKQLK LKKFSHDGVD SNPYINIRDH LATIVEVVKR SKNGIRQIID LKRELKFDKE KRLSKAFIAA IAWLDEKEYL KK VLVVSPK NPAIKIRCVK YVKDIPDSKG SPSFEYDSNS ADEDSVSDSK AAFEDEDLVE GLDNFNATDL LQNQGLVMEE KED AVKNEV LLNRFYPLQN QTYDIADKSG LKGISTMDVV NRITGKEFQR AFTKSSEYYL ESVDKQKENT GGYRLFRIYD FEGK KKFFR LFTAQNFQKL TNAEDEISVP KGFDELGKSR TDLKTLNEDN FVALNNTVRF TTDSDGQDIF FWHGELKIPP NSKKT PNKN KRKRQVKNST NASVAGNISN PKRIKLEQHV STAQEPKSAE DSPSSNGGTV VKGKVVNFGG FSARSLRSLQ RQRAIL KVM NTIGGVAYLR EQFYESVSKY MGSTTTLDKK TVRGDVDLMV ESEKLGARTE PVSGRKIIFL PTVGEDAIQR YILKEKD SK KATFTDVIHD TEIYFFDQTE KNRFHRGKKS VERIRKFQNR QKNAKIKASD DAISKKSTSV NVSDGKIKRR DKKVSAGR T TVVVENTKED KTVYHAGTKD GVQALIRAVV VTKSIKNEIM WDKITKLFPN NSLDNLKKKW TARRVRMGHS GWRAYVDKW KKMLVLAIKS EKISLRDVEE LDLIKLLDIW TSFDEKEIKR PLFLYKNYEE NRKKFTLVRD DTLTHSGNDL AMSSMIQREI SSLKKTYTR KISASTKDLS KSQSDDYIRT VIRSILIESP STTRNEIEAL KNVGNESIDN VIMDMAKEKQ IYLHGSKLEC T DTLPDILE NRGNYKDFGV AFQYRCKVNE LLEAGNAIVI NQEPSDISSW VLIDLISGEL LNMDVIPMVR NVRPLTYTSR RF EIRTLTP PLIIYANSQT KLNTARKSAV KVPLGKPFSR LWVNGSGSIR PNIWKQVVTM VVNEIIFHPG ITLSRLQSRC REV LSLHEI SEICKWLLER QVLITTDFDG YWVNHNWYSI YESTENLYFQ SMSASAWSHP QFEKGGGSGG GSGGSAWSHP QFEK S UniProtKB: Transcription factor tau 138 kDa subunit |
-分子 #2: Transcription factor tau 91 kDa subunit
分子 | 名称: Transcription factor tau 91 kDa subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 76.48407 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: HHHHHHENLY FQGMAVIPAK KRGRPRKSVV AEVPYDSLAS PVSENSGSKR PRRNASKKAV ANFAQLVHAG RDDVINTTQV NNVDDTDDD DFVLNDEGDG EESDNVEIEF ENELESTKNE VADLNSSGSG ASVRPSGRRN TVQKLRLKKN STKNMKSSSP G SSLGQKGR ...文字列: HHHHHHENLY FQGMAVIPAK KRGRPRKSVV AEVPYDSLAS PVSENSGSKR PRRNASKKAV ANFAQLVHAG RDDVINTTQV NNVDDTDDD DFVLNDEGDG EESDNVEIEF ENELESTKNE VADLNSSGSG ASVRPSGRRN TVQKLRLKKN STKNMKSSSP G SSLGQKGR PIRLLKDLSS ARDKIERIYG LNKEKLLLLA KVKEGFETSV FDFPFKNIQP DSPYFVCLDP PCKKESAYNK VI GDKNRTV YHEINKTEFE NMIKLRTKRL KLLIGEVDAE VSTGDKIEFP VLANGKRRGF IYNVGGLVTD IAWLNIEENT DIG KDIQYL AVAVSQYMDE PLNEHLEMFD KEKHSSCIQI FKMNTSTLHC VKVQTIVHSF GEVWDLKWHE GCHAPHLVGC LSFV SQEGT INFLEIIDNA TDVHVFKMCE KPSLTLSLAD SLITTFDFLS PTTVVCGFKN GFVAEFDLTD PEVPSFYDQV HDSYI LSVS TAYSDFEDTV VSTVAVDGYF YIFNPKDIAT TKTTVSRFRG SNLVPVVYCP QIYSYIYSDG ASSLRAVPSR AAFAVH PLV SRETTITAIG VSRLHPMVLA GSADGSLIIT NAARRLLHGI KNSSATQKSL RLWKWDYSIK DDKYRIDSSY EVYPLTV ND VSKAKIDAHG INITCTKWNE TSAGGKCYAF SNSAGLLTLE YLS UniProtKB: Transcription factor tau 91 kDa subunit |
-分子 #3: Transcription factor tau 60 kDa subunit
分子 | 名称: Transcription factor tau 60 kDa subunit / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 67.755172 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MKLLKDLLVD RKEFEDWKNN LTWARDGTLY LTTFPDISIG QPKYAKDINC NSKNLFHVKE FPLEFENKLD FELAQQNGLL NSQPVCYPR VCKPSPIDDW MAVLSNNGNV SVFKDNKMLT NLDSKGNLSS RTYHCFEWNP IESSIVVGNE DGELQFFSIR K NSENTPEF ...文字列: MKLLKDLLVD RKEFEDWKNN LTWARDGTLY LTTFPDISIG QPKYAKDINC NSKNLFHVKE FPLEFENKLD FELAQQNGLL NSQPVCYPR VCKPSPIDDW MAVLSNNGNV SVFKDNKMLT NLDSKGNLSS RTYHCFEWNP IESSIVVGNE DGELQFFSIR K NSENTPEF YFESSIRLSD AGSKDWVTHI VWYEDVLVAA LSNNSVFSMT VSASSHQPVS RMIQNASRRK ITDLKIVDYK VV LTCPGYV HKIDLKNYSI SSLKTGSLEN FHIIPLNHEK ESTILLMSNK TSYKVLLEDE LHVTADNIIA PYLEKKFKKW STI WNEFNN YETTLVIHGI SLSPDGYSIA IVYDMERVAF KYKIASEQSF NIMFAPLYHT WTISERAVGL AWYQTYQIYN QSLP KLPEN FSMNKKLLNG NYPISLDFQS YLNALMKSEE MRIIMFLNMT IDKPSILSFL EALYEYAINK KSELTNSFDL ACVLS IAAI LKREAPIYNG TLLMKNSFLE ETFNLESFTA DPETVTSTTN NTWKRCGVTL LPILTTHVKI CPVSKQRVID IKRDDL NDY GWFTRGLLER FNEISVYCGT TLEVM UniProtKB: Transcription factor tau 60 kDa subunit |
-分子 #4: DNA (40-MER)
分子 | 名称: DNA (40-MER) / タイプ: dna / ID: 4 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 12.358934 KDa |
配列 | 文字列: (DG)(DC)(DC)(DG)(DA)(DT)(DG)(DA)(DA)(DA) (DC)(DC)(DC)(DT)(DG)(DG)(DT)(DT)(DC)(DG) (DA)(DT)(DT)(DC)(DT)(DA)(DG)(DG)(DA) (DG)(DA)(DT)(DG)(DG)(DC)(DA)(DT)(DT)(DT) (DT) |
-分子 #5: DNA (40-MER)
分子 | 名称: DNA (40-MER) / タイプ: dna / ID: 5 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 12.265904 KDa |
配列 | 文字列: (DA)(DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DC)(DC)(DA)(DT) (DC)(DT)(DC)(DC)(DT)(DA)(DG)(DA)(DA)(DT) (DC)(DG)(DA)(DA)(DC)(DC)(DA)(DG)(DG) (DG)(DT)(DT)(DT)(DC)(DA)(DT)(DC)(DG)(DG) (DC) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 39.6 e/Å2 詳細: dataset1: 39.6 dataset2: 43.6 dataset3: 43.2 dataset4: 43.2 dataset5: 44.4 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.7 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL / In silico モデル: Alphafol multimer V2.3.0 |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.46 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 570437 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |