[日本語] English
- EMDB-51225: 5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP -

+
データを開く


IDまたはキーワード:

読み込み中...

-
基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-51225
タイトル5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP
マップデータmain map
試料
  • 複合体: 5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP
    • タンパク質・ペプチド: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25 kDa protein
    • タンパク質・ペプチド: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 35 kDa protein
    • RNA: P120-5'SS
    • RNA: U11 snRNA
キーワードminor spliceosome / U11 snRNP / RNA-protein complex / SPLICING
機能・相同性
機能・相同性情報


snRNA binding / U12-type spliceosomal complex / mRNA Splicing - Minor Pathway / intercellular bridge / RNA splicing / mRNA splicing, via spliceosome / mRNA binding / nucleolus / nucleoplasm / nucleus / cytosol
類似検索 - 分子機能
snRNP35, RNA recognition motif / U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25kDa protein / SNRNP25, ubiquitin-like domain / Ubiquitin-like domain / : / RNA recognition motif / RNA recognition motif / Eukaryotic RNA Recognition Motif (RRM) profile. / RNA recognition motif domain / RNA-binding domain superfamily ...snRNP35, RNA recognition motif / U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25kDa protein / SNRNP25, ubiquitin-like domain / Ubiquitin-like domain / : / RNA recognition motif / RNA recognition motif / Eukaryotic RNA Recognition Motif (RRM) profile. / RNA recognition motif domain / RNA-binding domain superfamily / Ubiquitin domain profile. / Ubiquitin-like domain / Ubiquitin-like domain superfamily / Nucleotide-binding alpha-beta plait domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 35 kDa protein / U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25 kDa protein
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å
データ登録者Zhao J / Galej WP
資金援助European Union, 1件
OrganizationGrant number
European Research Council (ERC)950278European Union
引用ジャーナル: Mol Cell / : 2025
タイトル: Structural basis of 5' splice site recognition by the minor spliceosome.
著者: Jiangfeng Zhao / Daniel Peter / Irina Brandina / Xiangyang Liu / Wojciech P Galej /
要旨: The minor spliceosome catalyzes excision of U12-dependent introns from precursors of eukaryotic messenger RNAs (pre-mRNAs). This process is critical for many cellular functions, but the underlying ...The minor spliceosome catalyzes excision of U12-dependent introns from precursors of eukaryotic messenger RNAs (pre-mRNAs). This process is critical for many cellular functions, but the underlying molecular mechanisms remain elusive. Here, we report a cryoelectron microscopy (cryo-EM) reconstruction of the 13-subunit human U11 small nuclear ribonucleoprotein particle (snRNP) complex in apo and substrate-bound forms, revealing the architecture of the U11 small nuclear RNA (snRNA), five minor spliceosome-specific factors, and the mechanism of the U12-type 5' splice site (5'SS) recognition. SNRNP25 and SNRNP35 specifically recognize U11 snRNA, while PDCD7 bridges SNRNP25 and SNRNP48, located at the distal ends of the particle. SNRNP48 and ZMAT5 are positioned near the 5' end of U11 snRNA and stabilize binding of the incoming 5'SS. Recognition of the U12-type 5'SS is achieved through base-pairing to the 5' end of the U11 snRNA and unexpected, non-canonical base-triple interactions with the U11 snRNA stem-loop 3. Our structures provide mechanistic insights into U12-dependent intron recognition and the evolution of the splicing machinery.
履歴
登録2024年7月31日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年2月5日-
マップ公開2025年2月5日-
更新2025年2月19日-
現状2025年2月19日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

-
構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

-
マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_51225.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 325 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈main map
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.73 Å/pix.
x 440 pix.
= 321.2 Å
0.73 Å/pix.
x 440 pix.
= 321.2 Å
0.73 Å/pix.
x 440 pix.
= 321.2 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.73 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.03
最小 - 最大-0.079917565 - 0.14640306
平均 (標準偏差)0.00004318046 (±0.0025444657)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ440440440
Spacing440440440
セルA=B=C: 321.2 Å
α=β=γ: 90.0 °

-
添付データ

-
追加マップ: sharp map

ファイルemd_51225_additional_1.map
注釈sharp map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

-
ハーフマップ: half A

ファイルemd_51225_half_map_1.map
注釈half A
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

-
ハーフマップ: half B

ファイルemd_51225_half_map_2.map
注釈half B
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

-
試料の構成要素

-
全体 : 5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP

全体名称: 5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP
要素
  • 複合体: 5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP
    • タンパク質・ペプチド: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25 kDa protein
    • タンパク質・ペプチド: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 35 kDa protein
    • RNA: P120-5'SS
    • RNA: U11 snRNA

-
超分子 #1: 5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP

超分子名称: 5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 100 KDa

-
分子 #1: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25 kDa protein

分子名称: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25 kDa protein
タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 15.290729 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
MDVFQEGLAM VVQDPLLCDL PIQVTLEEVN SQIALEYGQA MTVRVCKMDG EVMPVVVVQS ATVLDLKKAI QRYVQLKQER EGGIQHISW SYVWRTYHLT SAGEKLTEDR KKLRDYGIRN RDEVSFIKKL RQK

UniProtKB: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25 kDa protein

-
分子 #2: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 35 kDa protein

分子名称: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 35 kDa protein
タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 29.514471 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MNDWMPIAKE YDPLKAGSID GTDEDPHDRA VWRAMLARYV PNKGVIGDPL LTLFVARLNL QTKEDKLKEV FSRYGDIRRL RLVRDLVTG FSKGYAFIEY KEERAVIKAY RDADGLVIDQ HEIFVDYELE RTLKGWIPRR LGGGLGGKKE SGQLRFGGRD R PFRKPINL ...文字列:
MNDWMPIAKE YDPLKAGSID GTDEDPHDRA VWRAMLARYV PNKGVIGDPL LTLFVARLNL QTKEDKLKEV FSRYGDIRRL RLVRDLVTG FSKGYAFIEY KEERAVIKAY RDADGLVIDQ HEIFVDYELE RTLKGWIPRR LGGGLGGKKE SGQLRFGGRD R PFRKPINL PVVKNDLYRE GKRERRERSR SRERHWDSRT RDRDHDRGRE KRWQEREPTR VWPDNDWERE RDFRDDRIKG RE KKERGK

UniProtKB: U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 35 kDa protein

-
分子 #3: P120-5'SS

分子名称: P120-5'SS / タイプ: rna / ID: 3 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 3.366978 KDa
配列文字列:
AUAUCCUUUU U

-
分子 #4: U11 snRNA

分子名称: U11 snRNA / タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 43.505629 KDa
配列文字列:
AAAAAGGGCU UCUGUCGUGA GUGGCACACG UAGGGCAACU CGAUUGCUCU GCGUGCGGAA UCGACAUCAA GAGAUUUCGG AAGCAUAAU UUUUUGGUAU UUGGGCAGCU GGUGAUCGUU GGUCCCGGCG CCCUUU

GENBANK: GENBANK: NR_004407.1

-
実験情報

-
構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

-
試料調製

濃度0.2 mg/mL
緩衝液pH: 7.9
構成要素:
濃度名称
200.0 mMKClpotassium chloride
2.0 mMMgCl2magnesium chloride

詳細: 20 mM HEPES-KOH, pH 7.9 200 mM KCl 2 mM MgCl2
グリッドモデル: UltrAuFoil R2/2 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 90 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細This sample was monodisperse

-
電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris X / エネルギーフィルター - スリット幅: 10 eV
詳細Preliminary grid screening was performed on Glacios.
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k)
デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 20000 / 平均電子線量: 41.73 e/Å2 / 詳細: Images were colleted in EER format
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm
最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm
倍率(公称値): 165000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

+
画像解析

粒子像選択選択した数: 4494715 / 詳細: Topaz picking is performed with user-trained model
初期モデルモデルのタイプ: PDB ENTRY
PDBモデル - PDB ID:
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. v4.3.1) / 使用した粒子像数: 52290
初期 角度割当タイプ: RANDOM ASSIGNMENT / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. v4.3.1)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. v4.3.1)
最終 3次元分類クラス数: 5 / 平均メンバー数/クラス: 22588 / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. v4.3.1)
詳細: The heterogeneous refinement was performed to separate particles.

-
原子モデル構築 1

初期モデル
PDB IDChain

chain_id: B, residue_range: 1-132, source_name: AlphaFold, initial_model_type: in silico model

chain_id: C, residue_range: 10-164, source_name: AlphaFold, initial_model_type: in silico model
詳細refinement is done in Phenix
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 温度因子: 73.3
当てはまり具合の基準: Cross-correction coefficient
得られたモデル

PDB-9gbz:
5'-lobe of the substrate-bound U11 snRNP

+
万見について

-
お知らせ

-
2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

-
2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

+
2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

+
2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

+
2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

-
万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

他の情報も見る