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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-50516 | ||||||||||||
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タイトル | Structure of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of F-actin (conformer 1) | ||||||||||||
マップデータ | Sharpened cryo-EM density map of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (conformer 1). | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | actin / phalloidin / filament / pointed end / DNase I / STRUCTURAL PROTEIN | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Adherens junctions interactions / Cell-extracellular matrix interactions / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / regulation of neutrophil mediated cytotoxicity / zymogen granule / regulation of acute inflammatory response / Gap junction degradation / Formation of annular gap junctions / MAP2K and MAPK activation / RHOF GTPase cycle ...Adherens junctions interactions / Cell-extracellular matrix interactions / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / regulation of neutrophil mediated cytotoxicity / zymogen granule / regulation of acute inflammatory response / Gap junction degradation / Formation of annular gap junctions / MAP2K and MAPK activation / RHOF GTPase cycle / EPHB-mediated forward signaling / Regulation of actin dynamics for phagocytic cup formation / RHO GTPases Activate WASPs and WAVEs / RHO GTPases activate IQGAPs / RHO GTPases Activate Formins / deoxyribonuclease I / DNA Damage Recognition in GG-NER / UCH proteinases / VEGFA-VEGFR2 Pathway / deoxyribonuclease I activity / neutrophil activation involved in immune response / structural constituent of postsynaptic actin cytoskeleton / dense body / Clathrin-mediated endocytosis / DNA catabolic process / NuA4 histone acetyltransferase complex / axonogenesis / actin filament / cell motility / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / actin cytoskeleton / nuclear envelope / actin binding / cytoskeleton / hydrolase activity / axon / focal adhesion / synapse / apoptotic process / protein kinase binding / protein-containing complex / DNA binding / extracellular region / ATP binding / membrane / nucleus / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Bos taurus (ウシ) / Amanita phalloides (タマゴテングタケ) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.84 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Boiero Sanders M / Oosterheert W / Hofnagel O / Bieling P / Raunser S | ||||||||||||
資金援助 | ドイツ, European Union, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Phalloidin and DNase I-bound F-actin pointed end structures reveal principles of filament stabilization and disassembly. 著者: Micaela Boiero Sanders / Wout Oosterheert / Oliver Hofnagel / Peter Bieling / Stefan Raunser / 要旨: Actin filament turnover involves subunits binding to and dissociating from the filament ends, with the pointed end being the primary site of filament disassembly. Several molecules modulate filament ...Actin filament turnover involves subunits binding to and dissociating from the filament ends, with the pointed end being the primary site of filament disassembly. Several molecules modulate filament turnover, but the underlying mechanisms remain incompletely understood. Here, we present three cryo-EM structures of the F-actin pointed end in the presence and absence of phalloidin or DNase I. The two terminal subunits at the undecorated pointed end adopt a twisted conformation. Phalloidin can still bind and bridge these subunits, inducing a conformational shift to a flattened, F-actin-like state. This explains how phalloidin prevents depolymerization at the pointed end. Interestingly, two DNase I molecules simultaneously bind to the phalloidin-stabilized pointed end. In the absence of phalloidin, DNase I binding would disrupt the terminal actin subunit packing, resulting in filament disassembly. Our findings uncover molecular principles of pointed end regulation and provide structural insights into the kinetic asymmetry between the actin filament ends. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_50516.map.gz | 118 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-50516-v30.xml emd-50516.xml | 37 KB 37 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_50516_fsc.xml | 10.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_50516.png | 120.8 KB | ||
マスクデータ | emd_50516_msk_1.map | 125 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-50516.cif.gz | 7.9 KB | ||
その他 | emd_50516_additional_1.map.gz emd_50516_additional_2.map.gz emd_50516_additional_3.map.gz emd_50516_additional_4.map.gz emd_50516_additional_5.map.gz emd_50516_half_map_1.map.gz emd_50516_half_map_2.map.gz | 61.4 MB 117.8 MB 116.1 MB 116.1 MB 62.2 MB 116.1 MB 116.1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-50516 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-50516 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_50516_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_50516_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_50516_validation.xml.gz | 19.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_50516_validation.cif.gz | 24.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-50516 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-50516 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_50516.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Sharpened cryo-EM density map of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (conformer 1). | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.88 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_50516_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Unsharpened cryo-EM density map of the DNase I-...
ファイル | emd_50516_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Unsharpened cryo-EM density map of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (before 3D classification). | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sharpened cryo-EM density map of the DNase I-...
ファイル | emd_50516_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened cryo-EM density map of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (before 3D classification). | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Unfiltered half map 1 of the DNase I-...
ファイル | emd_50516_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | Unfiltered half map 1 of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (before 3D classification). | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Unfiltered half map 2 of the DNase I-...
ファイル | emd_50516_additional_4.map | ||||||||||||
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注釈 | Unfiltered half map 2 of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (before 3D classification). | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Unsharpened cryo-EM density map of the DNase I-...
ファイル | emd_50516_additional_5.map | ||||||||||||
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注釈 | Unsharpened cryo-EM density map of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (conformer 1). | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Unfiltered half map 1 of the DNase I-...
ファイル | emd_50516_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Unfiltered half map 1 of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (conformer 1). | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Unfiltered half map 2 of the DNase I-...
ファイル | emd_50516_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Unfiltered half map 2 of the DNase I- and phalloidin-bound pointed end of actin filaments (conformer 1). | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : F-actin pointed end bound by DNase I and phalloidin.
+超分子 #1: F-actin pointed end bound by DNase I and phalloidin.
+超分子 #2: Actin filament pointed end
+超分子 #3: Phalloidin
+超分子 #4: Two DNase I molecules, each bound to the ultimate and penultimate...
+分子 #1: Actin, cytoplasmic 1, N-terminally processed
+分子 #2: Deoxyribonuclease-1
+分子 #3: Phalloidin
+分子 #5: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #6: MAGNESIUM ION
+分子 #7: PHOSPHATE ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 構成要素:
詳細: 1xKMEI plus phalloidin | ||||||||||||||||||||||||
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 90 sec. | ||||||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 286 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: 3 seconds, force 0.. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 球面収差補正装置: Titan Krios G2 microscope (Thermo Fisher Scientific) with an in-column Cs-corrector. エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 15 eV / 詳細: Gatan energy filter. |
詳細 | 300 kV Titan Krios G2 microscope (Thermo Fisher Scientific) with an in-column Cs-corrector. |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 15978 / 平均電子線量: 64.6 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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詳細 | Real Space Refinement in Phenix. | |||||||||
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT | |||||||||
得られたモデル | PDB-9fju: |