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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-50218 | ||||||||||||
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タイトル | Negative staining EM map for Mis18 core complex | ||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||
試料 |
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キーワード | Centromere / CENP-A / Mis18 complex / Centromere Inheritance / Integrative structural analysis / CELL CYCLE | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 chromocenter / CENP-A containing chromatin assembly / cell communication / chromosome, centromeric region / Cajal body / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / chromosome segregation / nuclear speck / cell division / intracellular membrane-bounded organelle ...chromocenter / CENP-A containing chromatin assembly / cell communication / chromosome, centromeric region / Cajal body / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / chromosome segregation / nuclear speck / cell division / intracellular membrane-bounded organelle / chromatin / DNA binding / nucleoplasm / identical protein binding / nucleus / metal ion binding / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 27.3 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Jeyaprakash AA / Medina-Pritchard B | ||||||||||||
資金援助 | 英国, European Union, 3件
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引用 | ジャーナル: EMBO Rep / 年: 2024 タイトル: Structural basis for Mis18 complex assembly and its implications for centromere maintenance. 著者: Reshma Thamkachy / Bethan Medina-Pritchard / Sang Ho Park / Carla G Chiodi / Juan Zou / Maria de la Torre-Barranco / Kazuma Shimanaka / Maria Alba Abad / Cristina Gallego Páramo / Regina ...著者: Reshma Thamkachy / Bethan Medina-Pritchard / Sang Ho Park / Carla G Chiodi / Juan Zou / Maria de la Torre-Barranco / Kazuma Shimanaka / Maria Alba Abad / Cristina Gallego Páramo / Regina Feederle / Emilija Ruksenaite / Patrick Heun / Owen R Davies / Juri Rappsilber / Dina Schneidman-Duhovny / Uhn-Soo Cho / A Arockia Jeyaprakash / 要旨: The centromere, defined by the enrichment of CENP-A (a Histone H3 variant) containing nucleosomes, is a specialised chromosomal locus that acts as a microtubule attachment site. To preserve ...The centromere, defined by the enrichment of CENP-A (a Histone H3 variant) containing nucleosomes, is a specialised chromosomal locus that acts as a microtubule attachment site. To preserve centromere identity, CENP-A levels must be maintained through active CENP-A loading during the cell cycle. A central player mediating this process is the Mis18 complex (Mis18α, Mis18β and Mis18BP1), which recruits the CENP-A-specific chaperone HJURP to centromeres for CENP-A deposition. Here, using a multi-pronged approach, we characterise the structure of the Mis18 complex and show that multiple hetero- and homo-oligomeric interfaces facilitate the hetero-octameric Mis18 complex assembly composed of 4 Mis18α, 2 Mis18β and 2 Mis18BP1. Evaluation of structure-guided/separation-of-function mutants reveals structural determinants essential for cell cycle controlled Mis18 complex assembly and centromere maintenance. Our results provide new mechanistic insights on centromere maintenance, highlighting that while Mis18α can associate with centromeres and deposit CENP-A independently of Mis18β, the latter is indispensable for the optimal level of CENP-A loading required for preserving the centromere identity. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_50218.map.gz | 85.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-50218-v30.xml emd-50218.xml | 16.1 KB 16.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_50218_fsc.xml | 13.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_50218.png | 17.9 KB | ||
マスクデータ | emd_50218_msk_1.map | 91.1 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-50218.cif.gz | 5.1 KB | ||
その他 | emd_50218_half_map_1.map.gz emd_50218_half_map_2.map.gz | 83.8 MB 84 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-50218 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-50218 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_50218_validation.pdf.gz | 887.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_50218_full_validation.pdf.gz | 887.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_50218_validation.xml.gz | 17.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_50218_validation.cif.gz | 23.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-50218 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-50218 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_50218.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.48 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_50218_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_50218_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_50218_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Mis18 alpha, Mis18 beta, Mis18BP1 20-130
全体 | 名称: Mis18 alpha, Mis18 beta, Mis18BP1 20-130 |
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要素 |
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-超分子 #1: Mis18 alpha, Mis18 beta, Mis18BP1 20-130
超分子 | 名称: Mis18 alpha, Mis18 beta, Mis18BP1 20-130 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-分子 #1: Mis18 alpha
分子 | 名称: Mis18 alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: SNAAGVRSLR CSRGCAGGCE CGDKGKCSDS SLLGKRLSED SSRHQLLQKW ASMWSSMSED ASVADMERAQ LEEEAAAAEE RPLVFLCSGC RRPLGDSLSW VASQEDTNCI LLRCVSCNVS VDKEQKLSKR EKENGCVLET LCCAGCSLNL GYVYRCTPKN LDYKRDLFCL ...文字列: SNAAGVRSLR CSRGCAGGCE CGDKGKCSDS SLLGKRLSED SSRHQLLQKW ASMWSSMSED ASVADMERAQ LEEEAAAAEE RPLVFLCSGC RRPLGDSLSW VASQEDTNCI LLRCVSCNVS VDKEQKLSKR EKENGCVLET LCCAGCSLNL GYVYRCTPKN LDYKRDLFCL SVEAIESYVL GSSEKQIVSE DKELFNLESR VEIEKSLTQM EDVLKALQMK LWEAESKLSF ATCKS UniProtKB: Protein Mis18-alpha |
-分子 #2: Mis18 beta
分子 | 名称: Mis18 beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: SNAAAQPLRH RSRCATPPRG DFCGGTERAI DQASFTTSME WDTQVVKGSS PLGPAGLGAE EPAAGPQLPS WLQPERCAVF QCAQCHAVLA DSVHLAWDLS RSLGAVVFSR VTNNVVLEAP FLVGIEGSLK GSTYNLLFCG SCGIPVGFHL YSTHAALAAL RGHFCLSSDK ...文字列: SNAAAQPLRH RSRCATPPRG DFCGGTERAI DQASFTTSME WDTQVVKGSS PLGPAGLGAE EPAAGPQLPS WLQPERCAVF QCAQCHAVLA DSVHLAWDLS RSLGAVVFSR VTNNVVLEAP FLVGIEGSLK GSTYNLLFCG SCGIPVGFHL YSTHAALAAL RGHFCLSSDK MVCYLLKTKA IVNASEMDIQ NVPLSEKIAE LKEKIVLTHN RLKSLMKILS EVTPDQSKPE N UniProtKB: Protein Mis18-beta |
-分子 #3: Mis18BP1
分子 | 名称: Mis18BP1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 詳細: 20-130 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: GPDSMQRRNL PMDAIFFDSI PSGTLTPVKD LVKYQNSSLK LNDHKKNQFL KMTTFNNKNI FQSTMLTEAT TSNSSLDISA IKPNKDGLKN KANYESPGKI FLRMKEKVLR DKQEQP UniProtKB: Mis18-binding protein 1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 材質: 2% uranyl acetate |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F816 (8k x 8k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |