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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | CryoEM map of the F plasmid relaxosome with oriT DNA ss-27_+3ds+4_+143 and TraI in its TE mode. ss-27_+3ds+4_+143-R Locally-refined 3.68 A Map. | |||||||||
![]() | Local refinement map | |||||||||
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![]() | Relaxosome / Bacterial Conjugation / DNA processing / Relaxase / DNA binding proteins / DNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() IHF-DNA complex / DNA topoisomerase / DNA topoisomerase type I (single strand cut, ATP-independent) activity / DNA-binding transcription activator activity / protein-DNA complex / structural constituent of chromatin / regulation of translation / chromosome / DNA recombination / DNA helicase ...IHF-DNA complex / DNA topoisomerase / DNA topoisomerase type I (single strand cut, ATP-independent) activity / DNA-binding transcription activator activity / protein-DNA complex / structural constituent of chromatin / regulation of translation / chromosome / DNA recombination / DNA helicase / forked DNA-dependent helicase activity / single-stranded 3'-5' DNA helicase activity / four-way junction helicase activity / double-stranded DNA helicase activity / DNA replication / transcription cis-regulatory region binding / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.68 Å | |||||||||
![]() | Williams SM / Waksman G | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM Structure of the relaxosome, a complex essential for bacterial mating and the spread of antibiotic resistance genes. 著者: Sunanda M Williams / Sandra Raffl / Sabine Kienesberger / Aravindan Ilangovan / Ellen L Zechner / Gabriel Waksman / ![]() ![]() 要旨: Bacterial mating, or conjugation, was discovered nearly 80 years ago as a process transferring genes from one bacterial cell (the donor) to another (the recipient). It requires three key multiprotein ...Bacterial mating, or conjugation, was discovered nearly 80 years ago as a process transferring genes from one bacterial cell (the donor) to another (the recipient). It requires three key multiprotein complexes in the donor cell: a DNA-processing machinery called the relaxosome, a double-membrane spanning type 4 secretion system (T4SS), and an extracellular appendage termed pilus. While the near-atomic resolution structures of the T4SS and pilus are already known, that of the relaxosome has not been reported to date. Here, we describe the cryo-EM structure of the fully assembled relaxosome encoded by the paradigm F plasmid in two different states corresponding to distinct functional steps along the DNA processing reaction. By varying the structures of model DNAs we delineate conformational changes required to initiate conjugation. Mutational studies of the various protein-protein and protein-DNA interaction hubs suggest a complex sensitive to trigger signals, that could arise from cell-to-cell contacts with recipient cells. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 605.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 33.3 KB 33.3 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 18.7 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 67.5 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 669.9 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 8.7 KB | ||
その他 | ![]() ![]() ![]() ![]() | 328.7 MB 563.4 MB 593.8 MB 594.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9f11MC ![]() 9f0xC ![]() 9f0yC ![]() 9f0zC ![]() 9f10C ![]() 9f12C ![]() 50100 M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Local refinement map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.825 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Local refinement map Unsharpened
ファイル | emd_50121_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Local refinement map Unsharpened | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: DeepEMhancer Post-processed Map
ファイル | emd_50121_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | DeepEMhancer Post-processed Map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Local refinement map - Half-B
ファイル | emd_50121_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Local refinement map - Half-B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Local refinement map - Half-A
ファイル | emd_50121_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Local refinement map - Half-A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : Complex of the relaxosome containing oriT DNA, accessory proteins...
+超分子 #1: Complex of the relaxosome containing oriT DNA, accessory proteins...
+超分子 #2: Heteroduplex OriT DNA containing the nic site
+超分子 #3: IHF heterodimer
+超分子 #4: Train of three TraY proteins
+超分子 #5: Relaxase/helicase protein TraI
+超分子 #6: TraM tetramer
+分子 #1: T-strand DNA (96-MER)
+分子 #2: R-strand DNA (85-MER)
+分子 #3: Integration host factor subunit alpha
+分子 #4: Integration host factor subunit beta
+分子 #5: Relaxosome protein TraY
+分子 #6: Multifunctional conjugation protein TraI
+分子 #7: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 20 mM Hepes pH 7.5, 100 mM NaCl |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
詳細 | The complex after assembly and gel filtration was subjected to glutaraldehyde cross-linking |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 詳細: Movies were collected in counting mode fractionated over 50 frames |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.9 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | ![]() PDB-9f11: |