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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Structure of the retron IA complex with HNH nuclease in the "down" orientation | |||||||||
![]() | Unsharpened Full map from Non-Uniform Refinement | |||||||||
![]() |
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![]() | Retron / IA / Immune / Transferase-DNA-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | ![]() DNA synthesis involved in DNA repair / RNA-directed DNA polymerase activity / RNA-directed DNA polymerase / double-strand break repair / defense response to virus / RNA binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.13 Å | |||||||||
![]() | Burman N / Thomas-George J / Wilkinson R / Wiedenheft B | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural basis of antiphage defense by an ATPase-associated reverse transcriptase. 著者: Jerrin Thomas George / Nathaniel Burman / Royce A Wilkinson / Senuri de Silva / Quynh McKelvey-Pham / Murat Buyukyoruk / Adelaide Dale / Hannah Landman / Ava Graham / Steven Z DeLuca / Blake Wiedenheft / ![]() 要旨: Reverse transcriptases (RTs) have well-established roles in the replication and spread of retroviruses and retrotransposons. However, recent evidence suggests that RTs have been conscripted by cells ...Reverse transcriptases (RTs) have well-established roles in the replication and spread of retroviruses and retrotransposons. However, recent evidence suggests that RTs have been conscripted by cells for diverse roles in antiviral defense. Here we determine structures of a type I-A retron, which explain how RNA, DNA, RT, HNH-nuclease and four molecules of an SMC-family ATPase assemble into a 364 kDa complex that provides phage defense. We show that phage-encoded nucleases trigger degradation of the retron-associated DNA, leading to disassembly of the retron and activation of the HNH nuclease. The HNH nuclease cleaves tRNA, stalling protein synthesis and arresting viral replication. Taken together, these data reveal diverse and paradoxical roles for RTs in the perpetuation and elimination of genetic parasites. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 211.4 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 26.4 KB 26.4 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 15.9 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 62.7 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 421.9 MB | ![]() | |
Filedesc metadata | ![]() | 8.5 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 391.2 MB 391.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 909.4 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 908.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 25.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 32.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Unsharpened Full map from Non-Uniform Refinement | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.9061 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Independent Half Map A
ファイル | emd_49053_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Independent Half Map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Independent Half Map B
ファイル | emd_49053_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Independent Half Map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Retron IA surveillance complex with HNH nuclease bound in the "do...
全体 | 名称: Retron IA surveillance complex with HNH nuclease bound in the "down" orientation |
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要素 |
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-超分子 #1: Retron IA surveillance complex with HNH nuclease bound in the "do...
超分子 | 名称: Retron IA surveillance complex with HNH nuclease bound in the "down" orientation タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #1: AAA family ATPase
分子 | 名称: AAA family ATPase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 63.393953 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MWSHPQFEKI NKMNLETCYV DFLELESHVI NEDYLKESVE LQKLISTLNE SKFHLNKIGI HDFKRIRELQ ISLEDDLTVF VGDNGFGKS TILDAIAIVL SWLRSNIEKE SKPGTYIKSH EVNNSVDVEY ASIDANIKLK DFNTSILITK AKEGAYYSRN N ELLGVKKL ...文字列: MWSHPQFEKI NKMNLETCYV DFLELESHVI NEDYLKESVE LQKLISTLNE SKFHLNKIGI HDFKRIRELQ ISLEDDLTVF VGDNGFGKS TILDAIAIVL SWLRSNIEKE SKPGTYIKSH EVNNSVDVEY ASIDANIKLK DFNTSILITK AKEGAYYSRN N ELLGVKKL ASIYRLVNKY VDNASLPLMA YYSIARSYIG GGVDRKRKNA KTKTVWSKFD VYDEIEFDRN DFTDFFQWLV FL HNRASQE KLSESQTTIN ALFSDIQSLK ATLTQLSAID NIDSTVIKGL ELSLKEKLNY MKSLQSGEHK FNNAVSLYDS VIN TILKFL PEFQWIKLVY GDDDYKIILK KGEVELDIQQ LSQGEKTIFT LVGDLARRLI LLNPNLSNPL LGYGIVLIDE IDLH LHPQW QQTIIERLTS TFPNVQFVIT THSPQVLSTV SSRSVRILQE VEVDGVNDLI VSHPDYQIKG VSNQDALLYG MRTDP IPST KENGWLEEYK KLVELNRYSS DEALLLREKV IKHFGLDHPL VQECDDLISV LEFKNKINQH FSGSKDVK UniProtKB: AAA family ATPase |
-分子 #2: RNA-directed DNA polymerase
分子 | 名称: RNA-directed DNA polymerase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RNA-directed DNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 36.046191 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MQLTSKIISK FNYNRLAFQL LLNEAPKKYK VYYIPKRGAG FRVIAQPTKE LKNVQRFIVS LLQPKLPVHH KAMAYEYKKS IKDNALLHK DNNYILKMDF QNFFNKIKPD IFFSKLENTG LKLDSFDENT LRNLLFWRPG KKRSTTLILS VGAPSSPFIS N FVMYDFDK ...文字列: MQLTSKIISK FNYNRLAFQL LLNEAPKKYK VYYIPKRGAG FRVIAQPTKE LKNVQRFIVS LLQPKLPVHH KAMAYEYKKS IKDNALLHK DNNYILKMDF QNFFNKIKPD IFFSKLENTG LKLDSFDENT LRNLLFWRPG KKRSTTLILS VGAPSSPFIS N FVMYDFDK SLDDWCRNNG ITYSRYADDI TFSTNIKDIL CRVPKVVKKM LSLHVPGLSI NESKTIFTSM AHNRHVTGVT LT PQGNLSI GRDRKRMLFA KIHKYSLGLL SSEEINKTKG MIAFANYLEG DFLLRLQKKY GCELITKFLM EGNK UniProtKB: RNA-directed DNA polymerase |
-分子 #3: TIGR02646 family protein
分子 | 名称: TIGR02646 family protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 26.824639 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MKYLSRQMPG PSVLNKFDYR RDDWNSLSSN DKKEIWEEII KMQGKLCAYC EKKIEHHKSG GKNKVERHIE HFYRKSYYKN LTFEWSNLF GSCGEPQRCG FYKDKQKYND DDLIKADRQN PDVFFHFLEN GDVHIREGLN EKEHKMAEVT LRVFNLNPSS G GVKAERRR ...文字列: MKYLSRQMPG PSVLNKFDYR RDDWNSLSSN DKKEIWEEII KMQGKLCAYC EKKIEHHKSG GKNKVERHIE HFYRKSYYKN LTFEWSNLF GSCGEPQRCG FYKDKQKYND DDLIKADRQN PDVFFHFLEN GDVHIREGLN EKEHKMAEVT LRVFNLNPSS G GVKAERRR AIELSMTLIK ELVGCASQLI ESGCEIEDVR SMVFDEFKKN VKDRCFTTAI KHVFENRMP UniProtKB: TIGR02646 family protein |
-分子 #4: Retron IA msDNA
分子 | 名称: Retron IA msDNA / タイプ: dna / ID: 4 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 49.825891 KDa |
配列 | 文字列: (DC)(DT)(DC)(DT)(DT)(DC)(DA)(DC)(DT)(DA) (DA)(DA)(DG)(DA)(DC)(DA)(DG)(DC)(DG)(DA) (DA)(DA)(DG)(DA)(DC)(DA)(DC)(DA)(DG) (DA)(DT)(DT)(DT)(DC)(DT)(DC)(DC)(DT)(DT) (DC) (DG)(DC)(DA)(DT)(DA) ...文字列: (DC)(DT)(DC)(DT)(DT)(DC)(DA)(DC)(DT)(DA) (DA)(DA)(DG)(DA)(DC)(DA)(DG)(DC)(DG)(DA) (DA)(DA)(DG)(DA)(DC)(DA)(DC)(DA)(DG) (DA)(DT)(DT)(DT)(DC)(DT)(DC)(DC)(DT)(DT) (DC) (DG)(DC)(DA)(DT)(DA)(DT)(DC)(DT) (DG)(DC)(DC)(DC)(DC)(DG)(DG)(DG)(DC)(DA) (DG)(DG) (DG)(DA)(DT)(DG)(DC)(DG)(DA) (DA)(DG)(DG)(DA)(DG)(DA)(DA)(DA)(DT)(DC) (DT)(DG)(DT) (DG)(DT)(DC)(DT)(DT)(DT) (DC)(DG)(DC)(DA)(DA)(DC)(DC)(DC)(DT)(DA) (DA)(DA)(DC)(DC) (DG)(DG)(DA)(DC)(DA) (DA)(DT)(DA)(DA)(DA)(DT)(DT)(DT)(DA)(DA) (DG)(DC)(DC)(DT)(DG) (DG)(DC)(DT)(DA) (DA)(DT)(DC)(DA)(DC)(DC)(DC)(DG)(DG)(DC) (DT)(DG)(DG)(DA)(DA)(DC) (DC)(DA)(DA) (DT)(DG)(DT)(DT)(DC)(DC)(DT)(DA)(DC)(DA) (DC)(DT)(DA)(DA)(DA)(DG)(DA) (DG)(DC) GENBANK: GENBANK: CP026641.1 |
-分子 #5: Retron IA ncRNA
分子 | 名称: Retron IA ncRNA / タイプ: rna / ID: 5 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 52.085633 KDa |
配列 | 文字列: GCUCUUUAGU GUAGGAAUAU UGGUUCCAGC CGGGUGAUUA GCCAGGCUUA AAUUUAUUGU CCGGUUUAGG GUUGCGAAAG ACACAGAUU UCUCCUUCGC AUCCCUGCCC GGGGCAGAUA UGCGAAGGAG AAAUCUGUGU CUUUCGCUGU CUUUAGUGAA G AG GENBANK: GENBANK: CP026641.1 |
-分子 #6: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 3 / 式: ATP |
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分子量 | 理論値: 507.181 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-ATP: |
-分子 #7: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 1 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: C-flat-1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 45 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 13695 / 平均電子線量: 56.69 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 45000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model 詳細: The structure of each subunit was predicted individually in Alphafold before rigid body fitting in ChimeraX |
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詳細 | Alphafold predicted structures of each individual subunit were first rigid body fit in ChimeraX using the fit in map command before initial relaxation using ISOLDE and final refinement in PHENIX RealSpaceRefinement. COOT was used for manual editing. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient |
得られたモデル | ![]() PDB-9n69: |