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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4788 | |||||||||
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タイトル | D. melanogaster CMG-DNA with ATP, State 2B | |||||||||
マップデータ | State 2B, sharpened map (RELION PostProcess) | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 Unwinding of DNA / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / DNA endoreduplication / Activation of ATR in response to replication stress / Activation of the pre-replicative complex / eggshell chorion gene amplification / Orc1 removal from chromatin / DNA amplification / DNA strand elongation involved in mitotic DNA replication ...Unwinding of DNA / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / DNA endoreduplication / Activation of ATR in response to replication stress / Activation of the pre-replicative complex / eggshell chorion gene amplification / Orc1 removal from chromatin / DNA amplification / DNA strand elongation involved in mitotic DNA replication / GINS complex / mitotic DNA replication preinitiation complex assembly / resolution of meiotic recombination intermediates / premeiotic DNA replication / mitotic DNA replication / CMG complex / DNA replication preinitiation complex / MCM complex / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic DNA replication initiation / chromosome condensation / DNA strand elongation involved in DNA replication / DNA duplex unwinding / DNA unwinding involved in DNA replication / DNA replication origin binding / DNA replication initiation / DNA helicase activity / mitotic spindle organization / regulation of DNA-templated transcription elongation / meiotic cell cycle / helicase activity / mitotic cell cycle / single-stranded DNA binding / DNA helicase / DNA replication / cell division / chromatin binding / ATP hydrolysis activity / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.46 Å | |||||||||
データ登録者 | Eickhoff P / Martino F / Locke J / Nans A / Costa A | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell Rep / 年: 2019 タイトル: Molecular Basis for ATP-Hydrolysis-Driven DNA Translocation by the CMG Helicase of the Eukaryotic Replisome. 著者: Patrik Eickhoff / Hazal B Kose / Fabrizio Martino / Tatjana Petojevic / Ferdos Abid Ali / Julia Locke / Nele Tamberg / Andrea Nans / James M Berger / Michael R Botchan / Hasan Yardimci / Alessandro Costa / 要旨: In the eukaryotic replisome, DNA unwinding by the Cdc45-MCM-Go-Ichi-Ni-San (GINS) (CMG) helicase requires a hexameric ring-shaped ATPase named minichromosome maintenance (MCM), which spools single- ...In the eukaryotic replisome, DNA unwinding by the Cdc45-MCM-Go-Ichi-Ni-San (GINS) (CMG) helicase requires a hexameric ring-shaped ATPase named minichromosome maintenance (MCM), which spools single-stranded DNA through its central channel. Not all six ATPase sites are required for unwinding; however, the helicase mechanism is unknown. We imaged ATP-hydrolysis-driven translocation of the CMG using cryo-electron microscopy (cryo-EM) and found that the six MCM subunits engage DNA using four neighboring protomers at a time, with ATP binding promoting DNA engagement. Morphing between different helicase states leads us to suggest a non-symmetric hand-over-hand rotary mechanism, explaining the asymmetric requirements of ATPase function around the MCM ring of the CMG. By imaging of a higher-order replisome assembly, we find that the Mrc1-Csm3-Tof1 fork-stabilization complex strengthens the interaction between parental duplex DNA and the CMG at the fork, which might support the coupling between DNA translocation and fork unwinding. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_4788.map.gz | 14.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-4788-v30.xml emd-4788.xml | 36.1 KB 36.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_4788_fsc.xml | 13.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_4788.png | 133.9 KB | ||
その他 | emd_4788_additional.map.gz emd_4788_half_map_1.map.gz emd_4788_half_map_2.map.gz | 171.7 MB 171.2 MB 171.1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4788 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4788 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_4788_validation.pdf.gz | 435.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_4788_full_validation.pdf.gz | 435 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_4788_validation.xml.gz | 19.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4788 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4788 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4788.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | State 2B, sharpened map (RELION PostProcess) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.08 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: State 2B, non-sharpened map (RELION Refine3D)
ファイル | emd_4788_additional.map | ||||||||||||
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注釈 | State 2B, non-sharpened map (RELION Refine3D) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: State 2B, half-map 2 (RELION Refine3D)
ファイル | emd_4788_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | State 2B, half-map 2 (RELION Refine3D) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: State 2B, half-map 1 (RELION Refine3D)
ファイル | emd_4788_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | State 2B, half-map 1 (RELION Refine3D) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : CMG helicase bound to forked DNA in the presence of ATP, State 2B
+超分子 #1: CMG helicase bound to forked DNA in the presence of ATP, State 2B
+超分子 #2: CMG helicase
+超分子 #3: DNA
+分子 #1: DNA
+分子 #2: DNA
+分子 #3: CDC45L
+分子 #4: IP07275p
+分子 #5: Probable DNA replication complex GINS protein PSF2
+分子 #6: AT18545p
+分子 #7: DNA replication complex GINS protein SLD5
+分子 #8: DNA replication licensing factor Mcm2
+分子 #9: DNA replication licensing factor Mcm5
+分子 #10: DNA replication licensing factor Mcm6
+分子 #11: DNA replication licensing factor Mcm3
+分子 #12: DNA replication licensing factor MCM4
+分子 #13: DNA replication licensing factor Mcm7
+分子 #14: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #15: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.6 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |