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- EMDB-4734: Structure of the core Shigella flexneri type III secretion system... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-4734
タイトルStructure of the core Shigella flexneri type III secretion system export gate complex SctRST (Spa24/Spa9/Spa29).
マップデータ
試料
  • 複合体: Shigella flexneri type III secretion export gate (Spa24Spa9Spa29)
    • タンパク質・ペプチド: Surface presentation of antigens protein SpaP
    • タンパク質・ペプチド: Surface presentation of antigens protein SpaR
    • タンパク質・ペプチド: Surface presentation of antigens protein SpaQ
キーワードType III secretion / T3SS / Flagella / Cryo-EM / Membrane protein / Protein transport
機能・相同性
機能・相同性情報


protein secretion / protein targeting / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Type III secretion protein SpaR/YscT / Type III secretion protein HrpO / Yop virulence translocation protein R / Bacterial export protein family 3 / Bacterial export proteins, family 3 / Flagella transport protein fliP family signature 1. / Type III secretion system inner membrane P protein / FliP family / Flagella transport protein fliP family signature 2. / Type III secretion system inner membrane R protein / Bacterial export proteins, family 1
類似検索 - ドメイン・相同性
Surface presentation of antigens protein SpaP / Surface presentation of antigens protein SpaQ / Surface presentation of antigens protein SpaR
類似検索 - 構成要素
生物種Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å
データ登録者Johnson S / Kuhlen L
資金援助 英国, 5件
OrganizationGrant number国
Medical Research Council (United Kingdom)M011984 英国
Wellcome Trust201536 英国
Wellcome Trust109136 英国
Wellcome Trust201536 英国
Wolfson FoundationWL160052 英国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2018
タイトル: Structure of the core of the type III secretion system export apparatus.
著者: Lucas Kuhlen / Patrizia Abrusci / Steven Johnson / Joseph Gault / Justin Deme / Joseph Caesar / Tobias Dietsche / Mehari Tesfazgi Mebrhatu / Tariq Ganief / Boris Macek / Samuel Wagner / Carol ...著者: Lucas Kuhlen / Patrizia Abrusci / Steven Johnson / Joseph Gault / Justin Deme / Joseph Caesar / Tobias Dietsche / Mehari Tesfazgi Mebrhatu / Tariq Ganief / Boris Macek / Samuel Wagner / Carol V Robinson / Susan M Lea /
要旨: Export of proteins through type III secretion systems is critical for motility and virulence of many major bacterial pathogens. Three putative integral membrane proteins (FliP, FliQ, FliR) are ...Export of proteins through type III secretion systems is critical for motility and virulence of many major bacterial pathogens. Three putative integral membrane proteins (FliP, FliQ, FliR) are suggested to form the core of an export gate in the inner membrane, but their structure, assembly and location within the final nanomachine remain unclear. Here, we present the cryoelectron microscopy structure of the Salmonella Typhimurium FliP-FliQ-FliR complex at 4.2 Å. None of the subunits adopt canonical integral membrane protein topologies, and common helix-turn-helix structural elements allow them to form a helical assembly with 5:4:1 stoichiometry. Fitting of the structure into reconstructions of intact secretion systems, combined with cross-linking, localize the export gate as a core component of the periplasmic portion of the machinery. This study thereby identifies the export gate as a key element of the secretion channel and implies that it primes the helical architecture of the components assembling downstream.
履歴
登録2019年3月26日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年5月22日-
マップ公開2019年5月29日-
更新2024年5月22日-
現状2024年5月22日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6r6b
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_4734.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_4734.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.82 Å/pix.
x 288 pix.
= 236.736 Å		0.82 Å/pix.
x 288 pix.
= 236.736 Å		0.82 Å/pix.
x 288 pix.
= 236.736 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.822 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.01 / ムービー #1: 0.01
最小 - 最大-0.009494857 - 0.029651769
平均 (標準偏差)0.00000022427794 (±0.0014135778)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ288288288
Spacing288288288
セルA=B=C: 236.73601 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z0.8220.8220.822
M x/y/z288288288
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z236.736236.736236.736
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS288288288
D min/max/mean-0.0090.0300.000

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_4734_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: #1

ファイルemd_4734_additional.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: None

ファイルemd_4734_half_map_1.map
注釈None
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: None

ファイルemd_4734_half_map_2.map
注釈None
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Shigella flexneri type III secretion export gate (Spa24Spa9Spa29)

全体名称: Shigella flexneri type III secretion export gate (Spa24Spa9Spa29)
要素
  • 複合体: Shigella flexneri type III secretion export gate (Spa24Spa9Spa29)
    • タンパク質・ペプチド: Surface presentation of antigens protein SpaP
    • タンパク質・ペプチド: Surface presentation of antigens protein SpaR
    • タンパク質・ペプチド: Surface presentation of antigens protein SpaQ

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超分子 #1: Shigella flexneri type III secretion export gate (Spa24Spa9Spa29)

超分子名称: Shigella flexneri type III secretion export gate (Spa24Spa9Spa29)
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌)
分子量理論値: 191 KDa

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分子 #1: Surface presentation of antigens protein SpaP

分子名称: Surface presentation of antigens protein SpaP / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 5 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌)
分子量理論値: 24.215562 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MLSDMSLIAT LSFFTLLPFL VAAGTCYIKF SIVFVMVRNA LGLQQVPSNM TLNGIALIMA LFVMKPIIEA GYENYLNGPQ KFDTISDIV RFSDSGLMEY KQYLKKHTDL ELARFFQRSE EENADLKSAE NNDYSLFSLL PAYALSEIKD AFKIGFYLYL P FVVVDLVI ...文字列:
MLSDMSLIAT LSFFTLLPFL VAAGTCYIKF SIVFVMVRNA LGLQQVPSNM TLNGIALIMA LFVMKPIIEA GYENYLNGPQ KFDTISDIV RFSDSGLMEY KQYLKKHTDL ELARFFQRSE EENADLKSAE NNDYSLFSLL PAYALSEIKD AFKIGFYLYL P FVVVDLVI SSILLALGMM MMSPITISVP IKLVLFVALD GWGILSKALI EQYINIPA

UniProtKB: Surface presentation of antigens protein SpaP

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分子 #2: Surface presentation of antigens protein SpaR

分子名称: Surface presentation of antigens protein SpaR / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌)
分子量理論値: 32.644086 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MDISSWFESI HVFLILLNGV FFRLAPLFFF LPFLNNGIIS PSIRIPVIFL VASGLITSGK VDIGSSVFEH VYFLMFKEII VGLLLSFCL SLPFWIFHAV GSIIDNQRGA TLSSSIDPAN GVDTSELAKF FNLFSAVVFL YSGGMVFILE SIQLSYNICP L FSQCSFRI ...文字列:
MDISSWFESI HVFLILLNGV FFRLAPLFFF LPFLNNGIIS PSIRIPVIFL VASGLITSGK VDIGSSVFEH VYFLMFKEII VGLLLSFCL SLPFWIFHAV GSIIDNQRGA TLSSSIDPAN GVDTSELAKF FNLFSAVVFL YSGGMVFILE SIQLSYNICP L FSQCSFRI SNILTFLTLL ASQAVILASP VMIVLLLSEV LLGVLSRFAP QMNAFSVSLT IKSLLAIFII FICSSTIYFS KV QFFLGEH KFFTNLFVRE NLYFQGQFGS WSHPQFEKGG GSGGGSGGGS WSHPQFEK

UniProtKB: Surface presentation of antigens protein SpaR

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分子 #3: Surface presentation of antigens protein SpaQ

分子名称: Surface presentation of antigens protein SpaQ / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Shigella flexneri (フレクスナー赤痢菌)
分子量理論値: 9.433338 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MSDIVYMGNK ALYLILIFSL WPVGIATVIG LSIGLLQTVT QLQEQTLPFG IKLIGVSISL LLLSGWYGEV LLSFCHEIMF LIKSGV

UniProtKB: Surface presentation of antigens protein SpaQ

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度8.4 mg/mL
緩衝液pH: 8
構成要素:
濃度名称
100.0 mMTris
150.0 mMsodium chloride
1.0 mMEDTA
グリッドモデル: Quantifoil, UltrAuFoil, R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec.
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 実像数: 3741 / 平均露光時間: 8.0 sec. / 平均電子線量: 48.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 775073
初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

4173


詳細: 40 angstrom low pass filtered
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0) / 使用した粒子像数: 212561
初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL
得られたモデル

PDB-6r6b:
Structure of the core Shigella flexneri type III secretion system export gate complex SctRST (Spa24/Spa9/Spa29).

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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