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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-45517 | |||||||||
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タイトル | Guillardia theta Fanzor (GtFz) State 2 | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Fanzor / Eukaryotic / RNA-guided / nuclease / Gene editing / RNA BINDING PROTEIN-RNA-DNA complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 detection of maltose stimulus / maltose transport complex / maltose binding / carbohydrate transport / maltose transport / maltodextrin transmembrane transport / carbohydrate transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex, substrate-binding subunit-containing / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / cell chemotaxis ...detection of maltose stimulus / maltose transport complex / maltose binding / carbohydrate transport / maltose transport / maltodextrin transmembrane transport / carbohydrate transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex, substrate-binding subunit-containing / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / cell chemotaxis / outer membrane-bounded periplasmic space / periplasmic space / DNA damage response / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Guillardia theta (クリプト藻(ヌクレオモルフ)) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.28 Å | |||||||||
データ登録者 | Xu P / Saito M / Zhang F | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2024 タイトル: Structural insights into the diversity and DNA cleavage mechanism of Fanzor. 著者: Peiyu Xu / Makoto Saito / Guilhem Faure / Samantha Maguire / Samuel Chau-Duy-Tam Vo / Max E Wilkinson / Huihui Kuang / Bing Wang / William J Rice / Rhiannon K Macrae / Feng Zhang / 要旨: Fanzor (Fz) is an ωRNA-guided endonuclease extensively found throughout the eukaryotic domain with unique gene editing potential. Here, we describe the structures of Fzs from three different ...Fanzor (Fz) is an ωRNA-guided endonuclease extensively found throughout the eukaryotic domain with unique gene editing potential. Here, we describe the structures of Fzs from three different organisms. We find that Fzs share a common ωRNA interaction interface, regardless of the length of the ωRNA, which varies considerably across species. The analysis also reveals Fz's mode of DNA recognition and unwinding capabilities as well as the presence of a non-canonical catalytic site. The structures demonstrate how protein conformations of Fz shift to allow the binding of double-stranded DNA to the active site within the R-loop. Mechanistically, examination of structures in different states shows that the conformation of the lid loop on the RuvC domain is controlled by the formation of the guide/DNA heteroduplex, regulating the activation of nuclease and DNA double-stranded displacement at the single cleavage site. Our findings clarify the mechanism of Fz, establishing a foundation for engineering efforts. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_45517.map.gz | 167.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-45517-v30.xml emd-45517.xml | 19.1 KB 19.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_45517.png | 71.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-45517.cif.gz | 6.7 KB | ||
その他 | emd_45517_additional_1.map.gz emd_45517_half_map_1.map.gz emd_45517_half_map_2.map.gz | 87.4 MB 165.4 MB 165.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-45517 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-45517 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_45517_validation.pdf.gz | 868.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_45517_full_validation.pdf.gz | 867.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_45517_validation.xml.gz | 15 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_45517_validation.cif.gz | 17.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-45517 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-45517 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 9cesMC 9cerC 9cetC 9ceuC 9cevC 9cewC 9cexC 9ceyC 9cezC 9cf0C 9cf1C 9cf2C 9cf3C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_45517.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.663 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Guillardia theta Fanzor1-omegaRNA-target DNA complex
全体 | 名称: Guillardia theta Fanzor1-omegaRNA-target DNA complex |
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要素 |
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-超分子 #1: Guillardia theta Fanzor1-omegaRNA-target DNA complex
超分子 | 名称: Guillardia theta Fanzor1-omegaRNA-target DNA complex タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4 |
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由来(天然) | 生物種: Guillardia theta (クリプト藻(ヌクレオモルフ)) |
-分子 #1: DNA (5'-D(P*CP*CP*CP*GP*GP*GP*GP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*AP*G)-3')
分子 | 名称: DNA (5'-D(P*CP*CP*CP*GP*GP*GP*GP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*AP*G)-3') タイプ: dna / ID: 1 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 5.556604 KDa |
配列 | 文字列: (DG)(DG)(DT)(DA)(DC)(DC)(DC)(DG)(DG)(DG) (DC)(DA)(DT)(DT)(DT)(DA)(DA)(DG) |
-分子 #3: DNA (5'-D(P*AP*TP*GP*AP*CP*TP*TP*CP*TP*CP*TP*TP*AP*AP*AP*GP*GP*CP...
分子 | 名称: DNA (5'-D(P*AP*TP*GP*AP*CP*TP*TP*CP*TP*CP*TP*TP*AP*AP*AP*GP*GP*CP*CP*CP*CP*GP*GP*G)-3') タイプ: dna / ID: 3 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: synthetic construct (人工物) |
分子量 | 理論値: 14.552371 KDa |
配列 | 文字列: (DG)(DA)(DG)(DA)(DA)(DC)(DA)(DT)(DT)(DG) (DA)(DC)(DA)(DG)(DA)(DG)(DT)(DA)(DG)(DA) (DG)(DT)(DT)(DT)(DA)(DA)(DT)(DG)(DC) (DC)(DT)(DT)(DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DC)(DC) (DC) (DG)(DG)(DG)(DT)(DA)(DC)(DC) |
-分子 #2: Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein,Guillardia theta...
分子 | 名称: Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein,Guillardia theta Fanzor1 タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Guillardia theta (クリプト藻(ヌクレオモルフ)) |
分子量 | 理論値: 124.818938 KDa |
組換発現 | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
配列 | 文字列: MKSSHHHHHH HHHHGSSMKI EEGKLVIWIN GDKGYNGLAE VGKKFEKDTG IKVTVEHPDK LEEKFPQVAA TGDGPDIIFW AHDRFGGYA QSGLLAEITP DKAFQDKLYP FTWDAVRYNG KLIAYPIAVE ALSLIYNKDL LPNPPKTWEE IPALDKELKA K GKSALMFN ...文字列: MKSSHHHHHH HHHHGSSMKI EEGKLVIWIN GDKGYNGLAE VGKKFEKDTG IKVTVEHPDK LEEKFPQVAA TGDGPDIIFW AHDRFGGYA QSGLLAEITP DKAFQDKLYP FTWDAVRYNG KLIAYPIAVE ALSLIYNKDL LPNPPKTWEE IPALDKELKA K GKSALMFN LQEPYFTWPL IAADGGYAFK YENGKYDIKD VGVDNAGAKA GLTFLVDLIK NKHMNADTDY SIAEAAFNKG ET AMTINGP WAWSNIDTSK VNYGVTVLPT FKGQPSKPFV GVLSAGINAA SPNKELAKEF LENYLLTDEG LEAVNKDKPL GAV ALKSYE EELAKDPRIA ATMENAQKGE IMPNIPQMSA FWYAVRTAVI NAASGRQTVD EALKDAQTNS SSNNNNNNNN NNLG IEENL YFQSNASNIR IVKRKAKGFF KCEDLVTIKD AVKAAHRIMS DASILVRSYY LRWFQSSYPL DSDDKELELE HFHIS MACS IVQGITRPPV RGVGPEQSVK IDVFNDMLDE YKRLYERAPN DKENETDLSL SHVLAYSIDN LLTAYKNNIE AHFSKY VKR FIRCDMLAKG FNKSEANRVA AIYTNAYIYD SSLDLEPDFM ERLGLEATSY SSLFPSKINK GGFPRVYDLK ANPWVYL PK MVMINQALET DFSSVEHKER RLLNPLPFYS SFVPMHIRID TSGLSQLLMT KDRLDDFKRS YLAEFGVSLN IKNKGDML A SFEKIFGRKA TSNREAGLYA TEMWSFLTNL KTCRQWKELD GVVRKNDPKG TQWMFDNAVV TDGVSISFQV IDNSMFGRK AFSGRKKRVA CQEANDEEDS KQVTREELKT SKLLGCDPGK RDILAITDGI KTICYTKGQR DMDTHKTIRL RTSLKRRRGC GLEEYETQV MNRFQKRSCH PEMFRRYACS RKRMEHMLLE CYSHPVFREF KFLVYNKTKS SEHRFMHRVL ETFKRPQTNL S KARCASGV MRMNALKEVQ RHGDIIIGWG NWGKNPNALR CSAGPTPGIG IRRRFESLFK TTTVPEHYTS QECPSCKGRC LR KATGNPI MRHHLLRCTN DSCCSRWWNR NVAGAFNILT RLLDGQTLSG NETTGDGLGG DDL UniProtKB: Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein, Cas12f1-like TNB domain-containing protein |
-分子 #4: RNA (142-MER)
分子 | 名称: RNA (142-MER) / タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Guillardia theta (クリプト藻(ヌクレオモルフ)) |
分子量 | 理論値: 49.948816 KDa |
配列 | 文字列: CACUAUCCGG UAACGAAACU ACCGGAGACG GGUUAGGAGG UGACGACCUC UAAAACCUAG AACUUAGAGU GCAAAAACGC CAUUACGAU UGUGAUGCCU AUUCAAGGGU GUCCCAAGUG UAAAAAGAAA GCACUCUAAG AGCAUUAAAC UCUACU |
-分子 #5: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 1 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 59.28 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.28 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 468892 |
初期 角度割当 | タイプ: RANDOM ASSIGNMENT |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |