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- EMDB-44201: Ubiquitin E2-Ub-E3 HECT tetrahedral transthiolation intermediate ... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-44201
タイトルUbiquitin E2-Ub-E3 HECT tetrahedral transthiolation intermediate mimic - state 2
マップデータFull map from the gold-standard refinement, globally sharpened using an B-factor of -40 A^2, used for model building and refinement.
試料
  • 複合体: Covalent E2-Ub-E3 HECT transthiolation intermediate mimic complex
    • タンパク質・ペプチド: Ubiquitin-conjugating enzyme E2 4
    • タンパク質・ペプチド: E3 ubiquitin-protein ligase pub2
  • タンパク質・ペプチド: Ubiquitin
  • リガンド: 4-aminobutanenitrile
キーワードUBIQUITIN / E2 / E3 / HECT / NEDD4 / RSP5 / PUB2 / UBC4 / TRANSTHIOESTERIFICATION / THIOESTER / TRANSTHIOLATION / TETRAHEDRAL INTERMEDIATE / ADENYLATION / INHIBITOR / LIGASE / NUCLEUS / PHOSPHOPROTEIN / UBL CONJUGATION PATHWAY / UBL / ATP ATP-BINDING / AMP / NUCLEOTIDE-BINDING / ISOPEPTIDE BOND
機能・相同性
機能・相同性情報


RHOQ GTPase cycle / RHOU GTPase cycle / Regulation of PTEN localization / Regulation of PTEN stability and activity / cytoplasm to vacuole targeting by the NVT pathway / cell cortex of cell tip / E3 ubiquitin ligases ubiquitinate target proteins / Peroxisomal protein import / nuclear SCF ubiquitin ligase complex / Synthesis of active ubiquitin: roles of E1 and E2 enzymes ...RHOQ GTPase cycle / RHOU GTPase cycle / Regulation of PTEN localization / Regulation of PTEN stability and activity / cytoplasm to vacuole targeting by the NVT pathway / cell cortex of cell tip / E3 ubiquitin ligases ubiquitinate target proteins / Peroxisomal protein import / nuclear SCF ubiquitin ligase complex / Synthesis of active ubiquitin: roles of E1 and E2 enzymes / Antigen processing: Ubiquitination & Proteasome degradation / SREBP signaling pathway / positive regulation of mitotic metaphase/anaphase transition / HECT-type E3 ubiquitin transferase / E2 ubiquitin-conjugating enzyme / SCF-dependent proteasomal ubiquitin-dependent protein catabolic process / cell division site / ubiquitin conjugating enzyme activity / protein K48-linked ubiquitination / ubiquitin ligase complex / modification-dependent protein catabolic process / protein polyubiquitination / ubiquitin-protein transferase activity / protein tag activity / ubiquitin protein ligase activity / ribosome biogenesis / ubiquitin-dependent protein catabolic process / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / protein ubiquitination / structural constituent of ribosome / ubiquitin protein ligase binding / nucleolus / ATP binding / membrane / nucleus / cytoplasm / cytosol
類似検索 - 分子機能
E3 ubiquitin-protein ligase, SMURF1 type / HECT domain / HECT, E3 ligase catalytic domain / HECT-domain (ubiquitin-transferase) / HECT domain profile. / Domain Homologous to E6-AP Carboxyl Terminus with / Ubiquitin-conjugating enzyme, active site / Ubiquitin-conjugating (UBC) active site signature. / WW domain / WW/rsp5/WWP domain signature. ...E3 ubiquitin-protein ligase, SMURF1 type / HECT domain / HECT, E3 ligase catalytic domain / HECT-domain (ubiquitin-transferase) / HECT domain profile. / Domain Homologous to E6-AP Carboxyl Terminus with / Ubiquitin-conjugating enzyme, active site / Ubiquitin-conjugating (UBC) active site signature. / WW domain / WW/rsp5/WWP domain signature. / C2 domain / C2 domain profile. / WW domain superfamily / Ubiquitin-conjugating enzyme E2, catalytic domain homologues / Ubiquitin-conjugating enzyme E2 / Ubiquitin-conjugating enzyme / Ubiquitin-conjugating (UBC) core domain profile. / WW/rsp5/WWP domain profile. / Domain with 2 conserved Trp (W) residues / WW domain / Ubiquitin-conjugating enzyme/RWD-like / Ribosomal L40e family / Ribosomal_L40e / Ribosomal protein L40e / Ribosomal protein L40e superfamily / C2 domain superfamily / Ubiquitin domain signature. / Ubiquitin conserved site / Ubiquitin domain / Ubiquitin family / Ubiquitin homologues / Ubiquitin domain profile. / Ubiquitin-like domain / Ubiquitin-like domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Ubiquitin-ribosomal protein eL40B fusion protein / Ubiquitin-conjugating enzyme E2 4 / E3 ubiquitin-protein ligase pub2
類似検索 - 構成要素
生物種Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.35 Å
データ登録者Kochanczyk T / Lima CD
資金援助 米国, 2件
OrganizationGrant number国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R35GM118080 米国
引用ジャーナル: To be published
タイトル: Structural basis for transthiolation intermediates in the ubiquitin pathway
著者: Kochanczyk T / Hann ZS / Lux MC / Reyes AMVD / Ji C / Tan DS / Lima CD
履歴
登録2024年3月22日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年6月5日-
マップ公開2024年6月5日-
更新2024年6月5日-
現状2024年6月5日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_44201.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_44201.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Full map from the gold-standard refinement, globally sharpened using an B-factor of -40 A^2, used for model building and refinement.
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.064 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.54
最小 - 最大-2.2791297 - 3.978534
平均 (標準偏差)0.00020246755 (±0.04084663)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 340.48 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: Full map from the gold-standard refinement (unsharpened).

ファイルemd_44201_additional_1.map
注釈Full map from the gold-standard refinement (unsharpened).
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half map 1 from the gold-standard refinement

ファイルemd_44201_half_map_1.map
注釈Half map 1 from the gold-standard refinement
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Half map 2 from the gold-standard refinement

ファイルemd_44201_half_map_2.map
注釈Half map 2 from the gold-standard refinement
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Covalent E2-Ub-E3 HECT transthiolation intermediate mimic complex

全体名称: Covalent E2-Ub-E3 HECT transthiolation intermediate mimic complex
要素
  • 複合体: Covalent E2-Ub-E3 HECT transthiolation intermediate mimic complex
    • タンパク質・ペプチド: Ubiquitin-conjugating enzyme E2 4
    • タンパク質・ペプチド: E3 ubiquitin-protein ligase pub2
  • タンパク質・ペプチド: Ubiquitin
  • リガンド: 4-aminobutanenitrile

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超分子 #1: Covalent E2-Ub-E3 HECT transthiolation intermediate mimic complex

超分子名称: Covalent E2-Ub-E3 HECT transthiolation intermediate mimic complex
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1, #3
由来(天然)生物種: Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) / 株: 972 / ATCC 24843

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分子 #1: Ubiquitin-conjugating enzyme E2 4

分子名称: Ubiquitin-conjugating enzyme E2 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1
詳細: C-terminal GGLVPR is a residual artifact after thrombin cleavage of affinity tag
コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: E2 ubiquitin-conjugating enzyme
由来(天然)生物種: Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) / 株: 972 / ATCC 24843
分子量理論値: 17.043336 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列:
MALKRINREL ADLGKDPPSS SSAGPVGDDL FHWQATIMGP ADSPYAGGVF FLSIHFPTDY PFKPPKVNFT TRIYHPNINS NGSICLDIL RDQWSPALTI SKVLLSISSL LTDPNPDDPL VPEIAHVYKT DRSRYELSAR EWTRKYAIGG LVPR

UniProtKB: Ubiquitin-conjugating enzyme E2 4

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分子 #2: Ubiquitin

分子名称: Ubiquitin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2
詳細: N-terminal GSGG is a residual artifact after TEV protease cleavage of affinity tag
コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) / 株: 972 / ATCC 24843
分子量理論値: 8.769948 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列:
GSGGMQIFVK TLTGKTITLE VESSDTIDNV KSKIQDKEGI PPDQQRLIFA GKQLEDGRTL SDYNIQKEST LHLVLRLRG

UniProtKB: Ubiquitin-ribosomal protein eL40B fusion protein

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分子 #3: E3 ubiquitin-protein ligase pub2

分子名称: E3 ubiquitin-protein ligase pub2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3
詳細: N-terminal SHM is a residual artifact after cleaving the affinity tag
コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: HECT-type E3 ubiquitin transferase
由来(天然)生物種: Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) / 株: 972 / ATCC 24843
分子量理論値: 44.231828 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列: SHMDEYQRKI AYMYDRPEMA VNDAQLQLKV SRATTFEDAY DIISKLSVSD MKKKLLIRFR NEDGLDYGGV SREFFYILSH AIFNPGYSL FEYATDDNYG LQISPLSSVN PDFRSYFRFV GRVMGLAIYH RRYLDVQFVL PFYKRILQKP LCLEDVKDVD E VYYESLKW ...文字列:
SHMDEYQRKI AYMYDRPEMA VNDAQLQLKV SRATTFEDAY DIISKLSVSD MKKKLLIRFR NEDGLDYGGV SREFFYILSH AIFNPGYSL FEYATDDNYG LQISPLSSVN PDFRSYFRFV GRVMGLAIYH RRYLDVQFVL PFYKRILQKP LCLEDVKDVD E VYYESLKW IKNNDVDESL CLNFSVEENR FGESVTVDLI PNGRNIAVNN QNKMNYLKAL TEHKLVTSTE EQFNALKGGL NE LIPDSVL QIFNENELDT LLNGKRDIDV QDWKRFTDYR SYTETDDIVI WFWELLSEWS PEKKAKLLQF ATGTSRLPLS GFK DMHGSD GPRKFTIEKV GHISQLPKAH TCFNRLDIPP YNSKEELEQK LTIAIQETAG FGTE

UniProtKB: E3 ubiquitin-protein ligase pub2

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分子 #4: 4-aminobutanenitrile

分子名称: 4-aminobutanenitrile / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 1 / 式: A1AIV
分子量理論値: 84.12 Da

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度4.5 mg/mL
緩衝液pH: 7.2
構成要素:
濃度式名称
20.0 mMC4H12NO3Tris HCl buffer
100.0 mMNaClSodium chloride
1.0 mg/mlC32H59N2O8SCHAPSO

詳細: 20 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 0.1% CHAPSO
グリッドモデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均露光時間: 4.0 sec. / 平均電子線量: 72.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.8 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: OTHER / 詳細: Ab initio model from cryoSPARC
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.35 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 115970
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT
得られたモデル

PDB-9b56:
Ubiquitin E2-Ub-E3 HECT tetrahedral transthiolation intermediate mimic - state 2

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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