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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-43490 | |||||||||
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タイトル | Endogenous trans-translation complex with tmRNA*SmpB in the P site and alanyl-tRNA in the A site and deacyl-tRNA in the E site of E. coli 70S ribosome | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | endogenous tmRNA / tmRNA decoding / A-minor interactions / SmpB / cryo-EM / alanyl-tRNA / RIBOSOME | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 trans-translation / stringent response / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / positive regulation of ribosome biogenesis / translational termination / DnaA-L2 complex / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation ...trans-translation / stringent response / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / positive regulation of ribosome biogenesis / translational termination / DnaA-L2 complex / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / cytosolic ribosome assembly / transcription antitermination / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / response to antibiotic / mRNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Teran D / Zhang Y / Korostelev AA | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Front Microbiol / 年: 2024 タイトル: Endogenous trans-translation structure visualizes the decoding of the first tmRNA alanine codon. 著者: David Teran / Ying Zhang / Andrei A Korostelev / 要旨: Ribosomes stall on truncated or otherwise damaged mRNAs. Bacteria rely on ribosome rescue mechanisms to replenish the pool of ribosomes available for translation. Trans-translation, the main ribosome- ...Ribosomes stall on truncated or otherwise damaged mRNAs. Bacteria rely on ribosome rescue mechanisms to replenish the pool of ribosomes available for translation. Trans-translation, the main ribosome-rescue pathway, uses a circular hybrid transfer-messenger RNA (tmRNA) to restart translation and label the resulting peptide for degradation. Previous studies have visualized how tmRNA and its helper protein SmpB interact with the stalled ribosome to establish a new open reading frame. As tmRNA presents the first alanine codon via a non-canonical mRNA path in the ribosome, the incoming alanyl-tRNA must rearrange the tmRNA molecule to read the codon. Here, we describe cryo-EM analyses of an endogenous ribosome-tmRNA complex with tRNA accommodated in the A site. The flexible adenosine-rich tmRNA linker, which connects the mRNA-like domain with the codon, is stabilized by the minor groove of the canonically positioned anticodon stem of tRNA. This ribosome complex can also accommodate a tRNA near the E (exit) site, bringing insights into the translocation and dissociation of the tRNA that decoded the defective mRNA prior to tmRNA binding. Together, these structures uncover a key step of ribosome rescue, in which the ribosome starts translating the tmRNA reading frame. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_43490.map.gz | 620.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-43490-v30.xml emd-43490.xml | 74 KB 74 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_43490.png | 96.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-43490.cif.gz | 14.1 KB | ||
その他 | emd_43490_half_map_1.map.gz emd_43490_half_map_2.map.gz | 258.6 MB 258.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-43490 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-43490 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_43490_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_43490_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_43490_validation.xml.gz | 20.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_43490_validation.cif.gz | 23.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-43490 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-43490 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8vs9MC 8vsaC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_43490.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 669.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.87 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_43490_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_43490_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : CryoEM of tmRNA and SMPB bound to P site and alanyl-tRNA bound to...
+超分子 #1: CryoEM of tmRNA and SMPB bound to P site and alanyl-tRNA bound to...
+分子 #1: 16S ribosomal RNA
+分子 #2: 23S ribosomal RNA
+分子 #3: 5S ribosomal RNA
+分子 #4: A-tRNA
+分子 #5: E-tRNA
+分子 #59: TMRN
+分子 #6: 50S ribosomal protein L2
+分子 #7: 50S ribosomal protein L3
+分子 #8: 50S ribosomal protein L4
+分子 #9: 50S ribosomal protein L5
+分子 #10: 50S ribosomal protein L6
+分子 #11: Large ribosomal subunit protein bL9
+分子 #12: 50S ribosomal protein L1
+分子 #13: 50S ribosomal protein L10
+分子 #14: 50S ribosomal protein L11
+分子 #15: 50S ribosomal protein L13
+分子 #16: 50S ribosomal protein L14
+分子 #17: 50S ribosomal protein L15
+分子 #18: 50S ribosomal protein L16
+分子 #19: Large ribosomal subunit protein bL17
+分子 #20: 50S ribosomal protein L18
+分子 #21: 50S ribosomal protein L19
+分子 #22: 50S ribosomal protein L20
+分子 #23: Ribosomal protein L21
+分子 #24: 50S ribosomal protein L22
+分子 #25: 50S ribosomal protein L23
+分子 #26: 50S ribosomal protein L24
+分子 #27: 50S ribosomal protein L25
+分子 #28: 50S ribosomal protein L27
+分子 #29: 50S ribosomal protein L28
+分子 #30: 50S ribosomal protein L29
+分子 #31: Large ribosomal subunit protein uL30
+分子 #32: Large ribosomal subunit protein bL31
+分子 #33: 50S ribosomal protein L32
+分子 #34: Large ribosomal subunit protein bL33
+分子 #35: 50S ribosomal protein L34
+分子 #36: 50S ribosomal protein L35
+分子 #37: 50S ribosomal protein L36
+分子 #38: 30S ribosomal protein S2
+分子 #39: 30S ribosomal protein S3
+分子 #40: 30S ribosomal protein S4
+分子 #41: 30S ribosomal protein S5
+分子 #42: 30S ribosomal protein S6
+分子 #43: 30S ribosomal protein S7
+分子 #44: 30S ribosomal protein S8
+分子 #45: Small ribosomal subunit protein uS9
+分子 #46: 30S ribosomal protein S10
+分子 #47: 30S ribosomal protein S11
+分子 #48: 30S ribosomal protein S12
+分子 #49: 30S ribosomal protein S13
+分子 #50: Small ribosomal subunit protein uS14
+分子 #51: Small ribosomal subunit protein uS15
+分子 #52: 30S ribosomal protein S16
+分子 #53: Small ribosomal subunit protein uS17
+分子 #54: 30S ribosomal protein S18
+分子 #55: 30S ribosomal protein S19
+分子 #56: 30S ribosomal protein S20
+分子 #57: 30S ribosomal protein S21
+分子 #58: SsrA-binding protein
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 29.9 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.1 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |