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- EMDB-41860: Structure of Apo Sialin R168K mutant -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-41860
タイトルStructure of Apo Sialin R168K mutant
マップデータ
試料
  • 複合体: Structure of Apo Sialin R168K mutant
    • タンパク質・ペプチド: Sialin
キーワードTransporter / MEMBRANE PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


sialic acid:proton symporter activity / D-glucuronate transmembrane transporter activity / Defective SLC17A5 causes Salla disease (SD) and ISSD / Organic anion transporters / sialic acid transmembrane transporter activity / sialic acid transport / carbohydrate:proton symporter activity / Sialic acid metabolism / neurotransmitter loading into synaptic vesicle / monoatomic anion transport ...sialic acid:proton symporter activity / D-glucuronate transmembrane transporter activity / Defective SLC17A5 causes Salla disease (SD) and ISSD / Organic anion transporters / sialic acid transmembrane transporter activity / sialic acid transport / carbohydrate:proton symporter activity / Sialic acid metabolism / neurotransmitter loading into synaptic vesicle / monoatomic anion transport / amino acid transport / monoatomic ion transport / response to bacterium / synaptic vesicle membrane / basolateral plasma membrane / lysosome / apical plasma membrane / lysosomal membrane / glutamatergic synapse / membrane / plasma membrane / cytosol
類似検索 - 分子機能
: / Major facilitator superfamily / Major Facilitator Superfamily / Major facilitator superfamily domain / Major facilitator superfamily (MFS) profile. / MFS transporter superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.31 Å
データ登録者Schmiege P / Li X
資金援助 米国, 3件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)135343 米国
National Institutes of Health/Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health & Human Development (NIH/NICHD)110229 米国
Welch FoundationI-1957 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: Structure and inhibition of the human lysosomal transporter Sialin.
著者: Philip Schmiege / Linda Donnelly / Nadia Elghobashi-Meinhardt / Chia-Hsueh Lee / Xiaochun Li /
要旨: Sialin, a member of the solute carrier 17 (SLC17) transporter family, is unique in its ability to transport not only sialic acid using a pH-driven mechanism, but also transport mono and diacidic ...Sialin, a member of the solute carrier 17 (SLC17) transporter family, is unique in its ability to transport not only sialic acid using a pH-driven mechanism, but also transport mono and diacidic neurotransmitters, such as glutamate and N-acetylaspartylglutamate (NAAG), into synaptic vesicles via a membrane potential-driven mechanism. While most transporters utilize one of these mechanisms, the structural basis of how Sialin transports substrates using both remains unclear. Here, we present the cryogenic electron-microscopy structures of human Sialin: apo cytosol-open, apo lumen-open, NAAG-bound, and inhibitor-bound. Our structures show that a positively charged cytosol-open vestibule accommodates either NAAG or the Sialin inhibitor Fmoc-Leu-OH, while its luminal cavity potentially binds sialic acid. Moreover, functional analyses along with molecular dynamics simulations identify key residues in binding sialic acid and NAAG. Thus, our findings uncover the essential conformational states in NAAG and sialic acid transport, demonstrating a working model of SLC17 transporters.
履歴
登録2023年9月7日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年5月29日-
マップ公開2024年5月29日-
更新2024年12月11日-
現状2024年12月11日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_41860.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_41860.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.83 Å/pix.
x 300 pix.
= 249. Å		0.83 Å/pix.
x 300 pix.
= 249. Å		0.83 Å/pix.
x 300 pix.
= 249. Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.83 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.564
最小 - 最大-2.6706564 - 3.7736435
平均 (標準偏差)0.0024321955 (±0.073209345)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ300300300
Spacing300300300
セルA=B=C: 249.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_41860_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_41860_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Structure of Apo Sialin R168K mutant

全体名称: Structure of Apo Sialin R168K mutant
要素
  • 複合体: Structure of Apo Sialin R168K mutant
    • タンパク質・ペプチド: Sialin

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超分子 #1: Structure of Apo Sialin R168K mutant

超分子名称: Structure of Apo Sialin R168K mutant / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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分子 #1: Sialin

分子名称: Sialin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 55.653121 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MDYKDDDDKR SPVRDLARND GEESTDRTPL LPGAPRAEAA PVCCSARYNL AILAFFGFFI VYALRVNLSV ALVDMVDSNT TLEDNRTSK ACPEHSAPIK VHHNQTGKKY QWDAETQGWI LGSFFYGYII TQIPGGYVAS KIGGKMLLGF GILGTAVLTL F TPIAADLG ...文字列:
MDYKDDDDKR SPVRDLARND GEESTDRTPL LPGAPRAEAA PVCCSARYNL AILAFFGFFI VYALRVNLSV ALVDMVDSNT TLEDNRTSK ACPEHSAPIK VHHNQTGKKY QWDAETQGWI LGSFFYGYII TQIPGGYVAS KIGGKMLLGF GILGTAVLTL F TPIAADLG VGPLIVLKAL EGLGEGVTFP AMHAMWSSWA PPLERSKLLS ISYAGAQLGT VISLPLSGII CYYMNWTYVF YF FGTIGIF WFLLWIWLVS DTPQKHKRIS HYEKEYILSS LRNQLSSQKS VPWVPILKSL PLWAIVVAHF SYNWTFYTLL TLL PTYMKE ILRFNVQENG FLSSLPYLGS WLCMILSGQA ADNLRAKWNF STLCVRRIFS LIGMIGPAVF LVAAGFIGCD YSLA VAFLT ISTTLGGFCS SGFSINHLDI APSYAGILLG ITNTFATIPG MVGPVIAKSL TPDNTVGEWQ TVFYIAAAIN VFGAI FFTL FAKGEVQNWA LNDHHGHRH

UniProtKB: Sialin

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 60.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.2 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.8 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: OTHER
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.31 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 263841
初期 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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